197212. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírus- és daganatellenes hatású gyógyszerkészítmények előállítására
19 197212 20 8. táblázat Jelölés megnevezés Sejt-típus Faj Kétszereződési idő (nap)* Telepképződés alacsony szérum- koncentráció esetében** Túlélési arány RITA vese majom 1.9-0.73? CV-1 vese majom 1.21-1.20 5 C-6 SV40 transzformált majom 1.65 + <4x10-655 MEF embrió fibroblaszt egér 1.14-0.60'S SV3T3 SV40 transzformált egér 0.53 + <2xlO-«§5 MEF-K1 BPV-1 transzformált egér 0.58 + <3x10-6 55 MCA-3F keratinocit egér 1.5-0.25§ 0.81§ MCA-3D keratinocit egér 1.45-HEL-30 kémiailag transzformált keratinocit egér 0.78 + <2xl0-5§§ A-PDV kémiailag transzformált keratinocit egér 0.65 + <3xl0-6 HEF fibroblaszt hörcsög 1.73-S 0.67 s HEF-BPV BPV-1 transzformált hörcsög 0.48 + <2xl0-6§5 Hela cervix karcinoma ember 1.0 + <3xl0-6 5§ HEL fibroblaszt ember 2.35-0.54 5 HTB72 rosszindulatú melanoma ember 2.9 + 0.087 5 MRC-5 SV-80 fibroblaszt SV-40 transzformált fibroblaszt ember ember 2.9 + 0.80 5 <4x10-6 55. Wi-38 fibroblaszt ember 2.85-0.73 S A 8. táblázat jelmagyarázata § 24 órával a D609/undekánsav kombináció eltávolítása után a sejteket tripszineztük, és tripánkékkel végzett festéssel Neubauer-féle hemaaitométerrel a csíraképes sejtek számát meghatároztuk. A túlélési arányt a kezeletlen és kezelt tenyészetekben kapott sejt-szamok viszonyaként fejeztük ki. §§ A 37 °C-on végzett 10 napos inkubálást követően a tenyészeteket 2 percen ét 2%-os formaldehidben fixáltuk és 1 percen át 0,5%-os kristály-ibolyával festettük meg. A legnagyobb túlélési arányt azok a sejtek mutattak, amelyeket a kezelést megelőzően oltottunk be a Petri-csészékbe. Egyetlen esetben sem tudtunk túlélő sejteket kimutatni. * 6 cm-es Petri-csészékbe 4xl05 sejtet vittünk be és BME-vel, 5% FBS-sel, 5%-os szén-dioxid atmoszférában inkubáltuk. 1 és 2 nap múlva két Petri-csészében a sejtszámot mindegyik sejt-nemzetség esetében meghatároztuk. A megállapított növekedési görbékből a kétszereződési időt extrapolállással határoztuk meg. ** 6 cm-es Petri-csészékbe mindegyik sejttípusból 103 sejtet helyeztünk el, és 1%, 2%, 5% vagy 10% FBS-t tartalmazó táptalajon 2 héten ét inkubáltunk. A telepeket 1%-os formaldehidben végzett fixálás után kristály-ibolyával festve tettük láthatóvá. A 6. ábrán a Meth-A-daganat közvetlenül átültetése után végzett kezelését mutatjuk be. Himnemű, 8-10 hetes 20 g testsúlyú Balb-c egereket lxlO6 daganatsejttel i.p. adagolással inokuláltunk. Az átültetést köve- 60 tőén 1 órával megkezdtük az állatok kezelését. A kezelést naponta egyszeri adagolással 5 napon át 50 mg/kg D609 jelű vegyületet, 50 mg/kg kálium-undekanoétot és 25 U-inzulin/kg-ot tartalmazó izotóniás glükóz oldattal 65 végeztük. Az anyagokat i.p. 1 ml/20 testsúly g oldatban adagoltuk. Tiz állatot kizárólag inzulin izotóniás glükózzal készített oldatával kezeltünk. A D609/undekénsav kombinációval kezelt csoportból nyolc állat több, mint 90 napon át életben maradt. A 7. ébrén Meth-A-daganat transzplantációját kővetően hosszabb idő múlva D609/ /undekánsav kombinációval végzett kezelését mutatjuk be. 10-12 hetes, 20 g testsúlyú 11
