197212. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírus- és daganatellenes hatású gyógyszerkészítmények előállítására
15 197212 16 6. táblázat A vizsgált a a daganatok száma a kezeállat kezelés kezelés lésre haszelőtt után nált szer 1 11 10 2 4 3 3 8 7 4 4 2 6 4 0 kontroll 7 7 7 8 5 5 9 10 8 10 4 1 11 7 5 összesen 64 48 =25% regresszió A 6. táblázat adataiból kitűnik, hogy a találmány szerinti kombináció esetében, amely DEXA-t és undekénsavat tartalmaz, a bőr-daganatok regressziója 59%-os, míg a kezeletlen állatok esetében ez az érték csak 25%-os. A találmány szerinti készítmények virus- és daganatellenes hatására vonatkozó vizsgálati eredményt az alábbiakban ismertetjük. (A) D609/undekánsav vírusellenes hatása Ismert, hogy xantán vegyületek savas pH-értékeken különböző DNS- és RNS-vírusokkal szemben hatásosak [Sauer, G., Amtmann, E., Melber, K., Knapp, A., Müller, K., Hummel, K., és Scherm, A.: DNA RNA virus species are inhibited by xanthates, a class of antiviral compounds with unique properties. Proc. Natl. Acad. Sei. USA 81, 3263-3267 (1984)]. Jelen esetben azonban lehetővé vélt, hogy e vegyületek egyedülállóan széles spektrumú vírusellenes hatását magasabb és fiziológiás (7,4) pH-értékekre is kiterjesszük, olyan módon, hogy bizonyos - lipofil és hidrofil csoportot egyaránt tartalmazó - ionos adjuvéns vegyületeket velük egyidejűleg vagy kombinációban adagolunk. így a triciklodekén-9-il-xantát (D609) nátrium-dezoxikoláttal, nátrium-dodecilszulfáttal és bizonyos zsírsavakkal, mint adjuvánsokkal - melyek önmagukban viruselllenes hatással nem rendelkeznek - képzett kombinációi különböző DNS és RNS vírusok - így például herpes simplex, vezikuléris stomatitis és Coxsackie B4 - replikécióját in vitro pH=7,4 értéken gátolják. A D609/undekánsav pH=7,4 értéken RNS-vlrusokra kifejtett vírusellenes hatása 7. táblázat Vírus D609 undekánsav vírus-hozam speciese [pg/ml] [pg/ml] [pfu/ml] VSVb 0 0 (4.3+1) xlO6 5 0 (5.6+0.05)xl06 0 40 (4.3+0.3)xl06 5 40 (1.3±0.2)xl04 Coxsalkie B4 0 0 (1.15±0.2)xl06 10 40 (7.7+0.25)xl04 ab Az értékeket kettős kísérletekben, a kapott vírus-hozam adatokat szintén kettős kísérletek alapján határoztuk meg. A VSV utódokat 10 órával, a Coxsalkie Bl-eket 24 órával a fertőzés után gyűjtöttük össze. A különböző lánchosszúságú telített zsírsavak esetében a szénatomszám tekintetében bizonyos előny mutatkozott: a 11 szénatomot tartalmazó undekánsav hatékonysága három nagyságrenddel nagyobbnak bizonyult, a rövidebb (8 szénatomos) vagy hosszabb (18 szénatomos) szénláncú monokarbonsavakénál. A dózis-hatás kinetikai összefüggések alapján megállapítottuk, hogy az a dózis, amely a herpes vírusok replikációját 1000-es faktorral gátolja, a nem-fertőzött növekvő kontroli-tenyészetek mitotikus aktivitására nem gyakorol hatást. A D609-undekánsav 1:1 arányú kombinációja bizonyult a legelőnyösebbnek, miként az a 4. ábrán is látható (fekete körök). Hasonló eredményeket kapunk a HTLV III vírus esetében is, amelyet szöveti tenyészetben 10 pg D609 és 10 Mg undekánsav/ml kombinációjával 3 és 5 napos alkalmazási időszakok után lehetett gátolni (5. ábra). A kombinációval végzett kezelés a mitogénnel aktivált perifériás humán vér limfociták mitotikus hatását nem befolyásolja, valamint azokra olyan koncentrációkban nincs hatással, amelyekben a B- és T-sejt limfómák elpusztulnak ([1. (B) fejezet és 6. ábra]. Ez a tény a D609/undekánsav kombinációt az AIDS-betegség kemoterápiás kezelésére potenciálisan alkalmassá teszi. D609 és undekánsav különböző koncentrációban herpes vírus növekedését gátló hatását a 4. ábrán mutatjuk be. Mindkét komponens koncentrációját az abszcisszán tün-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
