197210. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzdermális kezelésre alkalmas, hatóanyagként 2-amino--3-benzoil fenil-ecetsav származékokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
19 197210 20 (a) szabad sav alapra szémitva (b) jelentős mértékben eltér a kontrolitól p<0,05, Dunnett-féle t-teszt Egy másik összehasonlító vizsgálatnál a 5 karragenin által okozott patkányláb ödéma teszt alkalmazása esetén azt találtuk, hogy a 74. példa szerinti hatóanyag a B összetételű krémben (pH=3,5) körülbelül olyan hatásos volt dermális alkalmazás esetén, mint orális io adagolásnál egy adott adagra, míg az indometacinról megállapítottuk, hogy sokkal hatástalanabb dermális adagolás esetén, mint orális bevitelnél egy adott adagra. A 74. példa szerinti vegyület patkányoknak történt 15 dermális adagolás esetén hatásosabbnak bizonyult ödéma ellen, mint az indometacin akár dermálisan, akár orálisan alkalmaztuk azt. Fájdalomcsillapító vizsgálat orális alkal- 20 mazás esetén egereknél Krém-készítmény Hatóanyagot vittünk be az A összetételű 25 készítménybe (pH=7,0) különböző koncentrációkban szabad sav alapra számítva. Fájdalomcsillapító vizsgálati módszer - - Acetil-kolin által okozott hasi összehúzó- 30 dás-teszt egereknél Egereket készítettünk elő1 vizsgálatra oly módon, hogy 1,8 x 1,8 cm méretű felületet leborotváltunk az egerek feje mögött a 35 hátukon és .Nair" szőrtelenitö szerrel szórtelenitettük a bőrt. Az egereknek felesleges mennyiségű ennivalót és innivalót adtunk a kísérlet megkezdése előtt. A következő napon az egereket megmértük és egy kartonlemez- 40-gallérral (2,5 - 1,8 x 2,5 - 1,8 cm méret 1,25 cm átmérőjű nyílással középen) körülvettük a nyak körül annak érdekében, hogy meggátoljuk az alkalmazott vegyületek gyomorba jutásál. Az egereket véletlenszerűen 10-es csoportokra osztottuk IBM jelző által irányított szabálytalan táblák segítségével. Egy 3 rendszerű szabálytalan tömb permutációs láb Iá L használtunk arra, hogy kiválaszszuk a kontroll és a kezelt csoportokat. A véletlenszerűen kiválasztott egereket megetettük és egyedi megfigyelő ketrecekbe helyeztük azokat 1 órával 50 mikroliter krém alkalmazása előtt (a bőrbe bedörzsöltük körülbelül 10 másodpercig). A kontrollként szolgáló egereket olyan krémmel kezeltük, amely nem tartalmazott vizsgálandó hatóanyagot. Négy órával a krémnek a szőrtelenített börfelületen való alkalmazása után acetil-kolin-bromidot fecskendeztünk intraperitoneálisan 6 mg/kg (10 ml//kg mennyiségben sóoldatban) az egerekbe egy 15,875 mm-es 25-ös méretű tű segítségével. Közvetlenül ezután mindegyik egeret egy-egy 1 literes lefordított főzőpohár alá tettük és 3 percig megfigyeltük azokat arra nézve, hogy jelentkeznek-e náluk hasi görcsök. Abban az esetben, ha nem észleltünk görcsöket ez alatt az idő alatt, ez azt jelenti, hogy a reakciót leblokkoltuk. Az EDso értéket és a 95%-os biztonsági határt számítógép segítségével határoztuk meg. Mindegyik koncentráció és kontroll esetén 10 - 10 egeret használtunk. Az 5. táblázatban megadott értékeket a fenti módszerrel kaptuk, amelyhez az A öszszt tételű krémet (pH=7,0) alkalmaztuk. A krémhez 34. példa szerinti hatóanyagot használtunk, míg a kontroll nem tartalmazott hatóanyagot. 5. táblázat Összefüggés a dermálisan alkalmazott 2-amino-3-(4-bróm-benzoil)-benzol-ecetsav-nátriumsó-hidrátot tartalmazó krém és a fájdalomcsillapító hatás között'®) 7,0-es pH-jú krémben Hatóanyagmennyiség Blokkolás EDso, mint a krémben lévő alkalmazott vegyület 50 /ul krémben törne g% % hatóanyag %-os koncentrá(A összetétel) vivöanyag ciója (95%-os biztonság) kontroll (csak krém) 0 0 34. példa szerinti vegyület 0.01 0/ 0.032 20/ 0.128 0.10 60/ 0.32 80/ (0.06 - 0.29) 1.0 80/ 3.16 90/ (a) 4-órés előkezelési idő a krémmel az acetil-kolin-bromiddal való kezelés előtt 11
