197046. lajstromszámú szabadalom • Eljárás parazitaellenes hatású makrolid vegyületek, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására és az ezeket tartalmazó növényvédőszerek
7 197046 8 tők, permeteztető szántóban vagy forgó szántóban. Kívánt esetben a tápközeg a szokásos hordozó-, hígító- és egyéb segédanyagokat tartalmazó kompozícióvá alakítható. A fentiekből látható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek fertőzések és rovarfertőzések leküzdésére alkalmasak a fertőzést okozó szervezetekre vagy azok élőhelyére történő juttatás útján. A találmány tárgya tehát eljárás (111) általános képletű, S541 antibiotikumok, azok komponensei és faktorai előállítására. A találmány értelmében egy, a későbbiekben meghatározott, Streptomyccs nemzetségbe tartozó olyan szervezetet tenyésztünk asszimilálható szén-, nitrogén- és ásványisóforrást tartalmazó tápközegen, amely legalább egy fenti vegyületet képes termelni, és kívánt esetben a vegyületet elválasztjuk a tápközegtől és kinyerjük. Az alkalmazott szervezet olyan, amely főleg a találmány szerinti vegyületeket, illetve legalább azok egyikét termeli. Taxonómiai ismereteink alapján megállapítottuk, hogy a fenti anyagok termelésére képes szervezetek a Streptomyces nemzetség egy új faját jelentik, és ezeket Streptomyces thermoarchaensis-nek neveztük el. Ezeket a mikroorganizmusokat talajból izoláltuk, és a nagy-britanniai National Collection of Industrial and Marine Bacteria, Torry Research Station, Aberdeen, Nagy-Britania állandó törzs gyűjteményben helyeztük letétbe az NCIB 12015 számon. Az NCIB 12015 jelű Streptomyces thermoarchaensis morfológiai és tenyésztési jellemzőit a továbbiakban lenjük. A találmány szerinti eljárásban tehát előnyösen Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 jelű mikroorganizmust vagy ennek mutánsait alkalmazzuk. Streptomyces thermoarchaeasis NCIB 12015 mutánsai képződhetnek spontán, vagy különböző eljárásokkal állíthatók elő, így például azokkal, amelyeket a Techniques for the Development of Micro-organisms by H. I. Adler „Radiation and Radioisotopes for Industrial Microorganisms”, Proceedings of the Symposium, Vienna 1973, 241. oldalon, az International Atomic Energy Authority által kiadott közlemény ismertet. Ilyen módszerek például ionizáló sugárzás, kémiai módszerek, pl. N - metil - N' - nitro - N - nitrozo - guanídinnel (NTG) végzett kezelés, hőkezelés és más spontán mutációt célzó szelektív módszerek. így például az S. thermoarchaensis NCIB 12015 négy mutánsát állítottuk elő, és ezeket szintén letétbe helyeztük a National Collection of Industrial and Marine Bacteria, Torry Research Station, Aberdeen, Nagy-Britannia törzsgyűjteményben NCIB 12111, NCIB 12112, NCIB 12113 és NCIB 12114 számon, és ezen mutánsokkal végzett fermentációs eljárás szintén a találmány tárgyát képezi. Az NCIB 12111, 12112 és 12113 mutánsokat a Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 spóráiból hoztuk létre NTG-vei végzett kezelés útján, és a Holliday-féle egylépéses módszerrel jellemeztük [R. Holliday, Nature 178, 987 (1956)]. Az NCIB 12114 mutáns a Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 spontán mutációja útján jött létre, és streptomicinnel szemben rezisztensnek mutatkozott, miután életképes maradt 100 pg/ml streptomicin-szulfáttal 28 °C-on 5 napig végzett kezelés után. Taxonómiai vizsgálataink azt mutatták, hogy a Stiepromyces thermoarchaensis NCIB 12 015 egy előzőleg le nem írt fajba tartozó mikroorganizmus, amelynek tulajdonságait a következőkben ismertetjük, és amely tulajdonságok az egész fajra jellemzők. A fentiek értelmében a találmány kiterjed minden e fajba tartozó mikroorganizmussal végzett fe mentációs eljárásra, amely mikroorganizmusok lényegében hasonló tulajdonságokkal rendelkezne le. A szokásos spóráztató közegeken, zabliszt-agaron, maláta-élesztő-agaron, szervetlen só-keményítő-agaron {Shirlirtg E. B. és Gottlieb D. Int. J. Syst. Eactcriol. 16, 313—340 (1966)1 a Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 oőségesen növekszik, stabil szubsztrát-micéliumot és lég-micéliumot képez., ez utóbbiak tartalmazzák a spórákat nyitott spirális láncokban a fő hifák oldalágaiként. Ezeken a tápközegeken a pigmentáció sárga/bama és a spóratartók szürkék. 10-szeres nagyításnál látható, hogy a spóratartók lánconként 2—5 spiráimenetet ■artalmaznak, és minden menetben 5—10 spóra található. Egy spóratartó általában 20—50 spórát tartalmaz. Letapogató elektronmikroszkóppal, 12000-szeres nagyításnál megállapítható, hogy a spórák sima felületűek, elipszoid alakúak, 0,7xl,4 pm méretűek. A Streptomyces thermoarchaensis NOB 12015 Gram-pozitív, 20 és 50 °C közötti hőmérsékleten növekszik és spórát képez. Az előbbi adatokat összehasonlítva a Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology (nyolcadik kiadás) leírásával, megállapítottuk, hogy a Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 a Streptomyces nemzetségbe tartozik. A Streptomyces thermoarchaensis NCIB 12015 törzsszintű azonosítását Williams és munkatársai által közölt [J. Gen. Microbiol 129, 1815—1830 (1983)] számítógépes azonosítási mátrix segítségével végeztük. A szerzők által leírt 41 taxonómiai teszteredmény a Streptomyccs thermoarchaensis NCIB 12 015-re nézve a következő: Tulajdonság: Eredmény: Spöralánc, örvös — Spóralánc, rostos — Spóralánc, hosszirányban változó — Spóralánc, spirális + Micéliumok fragmentációja — Spóra felülete sima + Spóra felülete érdes — Spóra színe szürke + Spóra színe vörös — Spóra színe zöld — Reverz pigmentáció sárga/bama + Reverz pigmentáció vörös/narancs — Melanintcrmelés — Adonit felhasználás — Celiobióz-felhasználás + D-Fruktóz-felhasználás + 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
