196833. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sztatint vagy származékait tartalmazó peptid származékok előállítására
1 2 1H NMR (CD,OD): ő 1,00 (széles d, 6H), 5,13 (s, 211), 7,1 7,5(jn,10ll). C) Az (N-/t-butil-«xi-karbonil/-sztatin)-(amino-/2-szek-butil-e(ilén/)-/N-benzil-oxi-karbonil-fenil-alanin/-bcrizilés/fer előállít iS sah oz 1,55 g (3,63 mmól) (amino-/2-szek-butil-e tilcn/)-fenilalanin-benziiészter-dihidrokloridot szuszpendálunk 40 ml metilén-kloridban. 0 C hőmérsékletre britjük, és ezen a hőmérsékleten semlegesítjük 0,808 g (7,99 mmól) trietil-aminnal. 1,00 g (3,63 mmól) N-/t-butil-oxi-karbonil/sztatint és 0,74 g (5,45 mmól) N/-hidroxi-bcnzotriazolt, majd 2 ml metilén-kloridban 0,74 g (3.63 mmól) diciklohexíl-karbodiimidet adunk 0 C hőmérsékleten a szuszpenzióhoz, és a reakciókeveréket 3 órán keresztül kevertetjük ezen a hőmérsékleten, majd 16 órán át szobahőmérsékleten. A kivált csapadékot kiszűrjük, a szürletet bepároljuk és 125 ml etil-acetátban kevertetjük. A nem oldódó anyagot ismét kiszűrve, az etil-acetátos fázist 135 ml telített vizes NallCO^ oldattal mossuk, nátrium-szulfáttal szárítjuk és bepárolva, habos anyagot kapunk. A habos terméket gyors-kromatografálással tisztítjuk, elucnsként 35% etil-acetátot tartalmazó hexánt használva. 1,96 g tisztított (N-/t-butil-oxi-karbonil-sztatin)-(amino-/2-szck-butil -éti-. lén/)-fenilalanin-bcnzilészterhez jutunk habos anyag formájában (88%-os kinyerés). Rf = 0,58 (etil-acetát/hexán, 1 : 1). 'H-NMR (CDCU): 5 0,6-1,1 (m, 12H), 1,5 (s, 9H), 4,88 (d, J = V 111), 5,06 (s, 211), 7,15 (s, 511), 7.25 (s, 5H). 191 g (3.12 mmól) tisztított (N-/t-hiitil-oxikarbonil/-sztatin)-(amino-/2-szek-butiI-etilén/)-feníI-alanin-bcnzilcszter 16 ml díoxánban 67 mikroliter (0.80 g. 4,68 mmól) bcnzil-oxi-karbonil-kloriddal (Chemalog) acilezünk. Telített vizes NatiCOj oldattal a kémhatást pH = 8 értéken tartva. Amikor a vékonyrétegkromatografiás vizsgálatok szerint valamennyi kiindulási anyag átalakult, a dioxánt csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és a vízzel hígított maradékot etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos extraktumot MgSO^-tal szárítva és bepárolva, a bepárlási maradékot gyors-kromatografálással tisztítjuk, 2,06 g fehér habos anyagot nyerve. Rj^ 0,7 (etil-acetát/hexán 1 : 1). ifl-NMR (CDCU): 6 0,6-1,0 (m, 1211), 1,47 (s, 911), 7.0 -7,4 (m, 1 5H). D G) Az 5. példa F —J) reakciólépéseinél leírtakhoz hasonlóan 2.03 g (2,72 mmól), az előző, C) lépésnél tisztított (N-/t-butil-oxi-karbonil-feniIalanin/-benzilésztert 0,595 g tisztított (N-/t-butil-oxi-karbonil/-fenilalanin)-hisztidin-sztatin-(amino-/2-szek-butil-eti]én/)-(N-bcnzil-oxi-karbonil-fenilalanin/-benzilészterré alakítjuk. A termékhez habos anyag formájában jutunk. Rp = 0.36 (5% metanol kloroformban). ’íl-NMR (CDCU): 5 0.6-1,0 (m, 12H), 1,38 (s, 911), 6.75 (s, III), 7,1 -7,3 (m, 20H), 7,38 (s, 111). II) A kívánt (N-/t-butil-oxi-karbonil/-fenilalanin)-hisztidin-sztatin-(amino-/2-szek-butil-etilén/)-fenilalanin ecetsavas sójának előállításához 150 mg (0,15 mmól) (N-/t-butil-oxi-karbonil|-fcnilalanin)-hisztidin-szlatin-(amino-/2-szek-butil-etilén/)-.N-benzil-oxi-karbonil-fenilalaninrbcnzilésztcrt 4 ml etanol/ecetsav 1 : 1 arányú elegyében oldunk, és 18 mg 10%-os Pd/C katalizátort adunk hozzá. A keveréket 12 órán keresztül hidrogénezzük szobahőmérsékleten 2,9 bar nyomású hidrogéngáz alatt. A keveréket szűrjük, a szürletet szilárd anyagig (128 mg) pároljuk, amit éterben eldörzsölve 109 mg kívánt végterméket kapunk (84%-os kinyerés). Op.: 117-126 C. Rf = 0,57 (butanol/víz/ecetsav 4 : 1 : 1). 'll-NMR (CD,OD, 250 MHz). 5 0,8 1,0 (m, 12H), 1,36 (s, 9H), 1,92 (s, 6H), 2,2-2,45 (m, 2H), 4,28 (dd, J = 9, és 4, 1H). 3,54 (széles t, 1H), 6,92 (s, H{), 7,2 7.4 (m, 10H), 7,63 (s, 1H). 9. példa Az (N-/t-butil-oxi-karbonil/-Phe)-His-ciklosztatin-Lys-Phe előállítását az alábbi reakciólépésekcn keresztül végezzük. A) A (Ifi) képletű N-/t-butil-oxi-karbonil/-cik!osztatin előállításához 10,02 g (9,70 mmól) N-/t-butil-oxi-karbonil/-4(S)-amino-3(S)-hidroxi-5-fenil-pentán-savat oldunk 200 ml metanolban, és 6,5 ml jégecetet valamint 1,5 g 10%-os Rh/C katalizátort adva az oldathoz, nyolc órán keresztül hidrogénezünk szobahőmérsékleten 3,2 bar nyomású hidrogéngáz alatt. A keveréket megszűrjük, a szürletet bekoncentráljuk. és a kapott fehér szilárd anyagot hexánban eldörzsöljük, 8.46 g tisztított terméket nyerve (83%os kinyerés). Op.: 109 110°C. Rf = 0.72 (kloroform/metanol/ecetsav, 18:2:1). 1 H-NMR (CDCI3): 5 1,45 (s, 911), 2,55 (d,J = 6,2H). B) Az (N-/t-butil-oxi-karbonil/-fcnilalanin)-liisztidin-ciklosztatin-lizin-fenilalanin előállítását az 1. példában leírtak szerint végezzük, de az N-/t-butil-oxi-karbonü/-sztatin helyett N-/t-butil-oxi-karbonil/-ciklosztatint használunk. 1 H-NMR (CD3OD): 1,50 (s,9H, BÖK). 10. példa Az (N-/t-butiI-oxi-karbonil/-prolin)-fenilaIanin-hisztidin -ciklosztatin-lizin-fcnilalanin előállításához az-1. példa A F) reakciólépésc szerint hisztidin-cikios7.tatin-(N-epszilon-benzil-oxi-karbonil-lizin/)-fenilalanin-ben/.jlésztcr-dilridrokloridot állítunk elő, oly módon, hogy az N-/t-butil-oxi-karbonil/-sztatin- helyett N-|t-butil-oxi-karbonil/-ciklosztatint használunk. A kívánt terméket az I. példa C.)cs H) reakciólépésénél leírtak szerint állítjuk elő, de az N-/t-butil-oxi-karbonil/Tenilalanin helyett (N-/t-butil-oxi-karbonil/-pro!in/-fenilalanin (kereskedelmi forgalomból beszerezhető) használunk. Szilikagélen, kloroform/-metanol 95 : 5 ciuenst használva. Szilikagélen, kloroform/metanol 95 : 5 ciuenst használva, kromatografálással tisztítjuk az anyagot, szilárd, tisztított terméket nyerve. 1 H-NMR (CD3OD): 51.49 (s, 9H, BÖK). 11. példa A 8. példában leírtak szerint, de N-/t-butil-oxi-karbonil/-sztatin helyett N-/t-butil-oxi-karbonil/-ciklosztatint használva, az (N-/t-butil-oxi-karbonil/-fenilalanin)-hisztidin-ciklosztatin-(aniino-/2-szek-butil -etilén/)-fenilalanin ecetsavas sóját állítjuk elő, Op.: 150- 153°C. (bomlik) 11 96 833 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
