196764. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hidroxi- és alkoxi-pirimidin származékok előállítására
1 2 genáz és lipoxigenáz enz.imaktivitás gátló hatását patkány bazofil leukémia (RBL-1) sejtekben. Eszerint a teszt szerint, amint azt a Jakschick et al., Prostaglandins 16, 733-747 /1978/ idézet ismerteti, RBL-1 sejt monoréteget tenyésztünk,egy vagy két napig forgócső-kultúrában. Eagle-féle minium esszenciális közegben, 16V?-os hővel inaktivált borjúembrió szérum és egy antibiotikus/antimikotikus elegyben. A sejteket centrifugálás után mossuk, és a pufferben inkubáljuk. A sejtszuszpenzió 0,5 ntl-nyi térfogatát preinkubáljuk 30 °C-on 10 percig a vizsgálandó szer 1 pl-nyi dimetil-szulfoxidos (DMSO) oldatával. Az inkubálást iniciáljuk úgy, hogy szimultán, etanolban oldott (,4C)-arachidonsavat (5 /ul), DMSO-ban oldott kalcium-ionofórt (A -21387), (2 /al) adagolunk úgy, hogy a végsó' koncentráció 5, illetve 7,6 /uM legyen. Őt perccel később, az inkubálást leállítjuk úgy, hogy 0,27 ml acetonitril/ecetsav (100:3) elegyet adagolunk. Vékonyréteg kromatográfiás vizsgálatot végzünk acetonitril/víz/ecetsav oldószerelegy alkalmazásával. A következő példák szemléltetik a találmányt. 1. példa 2-(p-klór-fenil -pro pil -amino)-4,6-dimetil -5- -hidroxi-pirinüdin (Rí =R5=H, R2 =p-klór-fenil-propil-csoport, R3=R4= metilcsoport) 0,27 g (0,78 rnnról) 5-acetoxi^l,6-dimetil-2-(p-klór-fenil-propil-amido)-pirimidint 3,5 ml (3,5 mmól) hexánban oldott 1 mólos Dibal-oldattal kezelünk —23 °C-on, 5 ml száraz tetrahidrofuránban, nitrogénatmoszférában, 3 órán keresztül. A reakcióelegyet 15 ml vizes ammónium-kloriddal kioltjuk és szobahőmérsékleten egy éjjelen át keverjük. A reakcióelegyet ezután szűrjük és a szűrletet öszszesen 40 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumokat szárítjuk, koncentráljuk és kromatografáljuk hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyével, így 0,1 g (37%) a címben adott, kristályos vegyületet nyerünk, op.: 124-126 °C. 2. példa 2-(p-Metil-fenil-propil-amino)-4,6-dimetíl-5-hidroxi-pirimidin (R,=H, R2=p-metiI-fenil-propil-csoport, R3=R4=metilcsoport, R5- H) 7,7 g (24 mmól) 5-acetoxi-4,6-dimetil-l-(p-metil-fenil-propil-amido)-pirimidint kezelünk 1 mólos Dibal hexános oldattal (94 ml, 94 mmól), 150 ml száraz tetrahidrofurán oldatban —35 °C-on, nitrogénatmoszférában. 3,5 óra múlva a reakcióelegyet 100 ml telített ammónium-kloriddal kioltjuk, szobahőmérsékletre visszük és egy órán keresztül keverjük. Szűréssel tiszta oldatot kapunk, melyet 100 ml vízzel felhígítunk és 250 ml etil-acetáttal extrahálunk, A szárított extraktumokat koncentráljuk és szilikagélen kromatografáljuk hexán és etil-acetát 1:1 arányú elegyével, 2,0 g (31%) a címben adott vegyületet nyerünk, op.: 103—104 °C. 3. példa Hasonló módon, mint azt az. 1. ]>éldában leírtuk, a következő vegyületeket állítjuk elő: 2-(n-nonil-amino)-4,6- dimetil-5-hidroxi-pirimidin, NMR (CDCU) 0,8-1,6 (m, 1711), 2,25 (s, 6H), 3,1- —3,4 (m, 2H), 4,6-dimetil-5-hidroxi-2-(fenil-hexil-amino)- pirimidin, op.: 43—45 °C. 4-izopropil-5-hidroxi-6-metil-2-(p-klór-fenil-propii-amino)-pirimidin, NMR (CDC13): 7,10 (m,4H), 4,20 (b, s, 1H), 3,30 (m, 3H), 2,6 (m, 2H), 2,3 (s, 3H), 1,80 (m, 2H), 1,2 (d, 6H), és 4-izopropií- 5- lüdroxi-6-metil-2-(nonil-amino)-pirimidin, NMR (CDC13) 6,30 (b.s, 1H),4,75 (b,s, 1H), 3,55-3,10 (m, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,60-0,90 (m, 23H). 4. példa A) 5 g (27 mmól) 3-acetoxi-5-metil-2,4-hexándion és 6,4 g (54 mmól) guanidin-acetát 100 ml dimetil-formamidban (DMF) lévő elegyét 100 °C-on melegítjük 3 órán keresztül. Lehölés után a koncentrált reakcióterméket egy szilikagél tölteten keresztül szűrjük olyan eluenst alkalmazva, mely egyenlő térfogatrész hexánból és etil-acetátból áll. A szűrletet koncentráljuk és a maradékot feleslegben adagolt ecetsav-anhidriddel kezeljük trietil-amin jelenlétében. A reakcióelegyet koncentráljuk és a maradékot forró hexánból kristályosítjuk, 1,7 g (31%) 5-acetoxi-2- -amino-4-izopropil-6-metií-pirimidint nyerünk, op.: 141—142 °C. B) 0,5 g (2,4 mmól) piridinben levő 5-acetoxi-2- -amino-4-izopropil-6-metil-pirimidint 3,6 mmól 6-fenil-hexánsav-kloriddal kezelünk 0 °C-on, 0,5 órán ke-resztül.A reakcióelegyet 25 °C-ra melegítjük és ezen a hőmérsékleten tartjuk fél óráig. A reakcióelegyet koncentráljuk és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk hexán/etil-acetát 3;1 arányú elegyét használva eluensként, 0,66 g (72%) 5-acetoxi-4-izopropil-6- -metil-2-(fenil-hexil-amido)-pirimidint nyerünk. NMR (CDC13): 8,28 (b, s, 1H), 7,20 (s, 5H), 3,20-2,50 (m, 5H), 2,35 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,90-1,40 (m, 6H), 1,08 (d, 6H. C) A B) pont alatt előállított vegyületet a 3. példa eljárása szerint reagáltatjuk, így 4-izopropil-5-hidroxi-6-metil-2-(fenil-hexil-amino)-pirimidin képződik, op.: 60-61 °C. 5. példa 2-(Dimetil-amino)-4-izopropiI-6-metil-5- -hidroxi-piri midin (Rí =R2 ^metilcsoport, R3=izopropilcsoport, R4= metilcsoport) A) 3 g (16 mmól) 3-acetoxi-5-metil-2,4-hexándiont, 4,4 g (16 mmól) 1,1-dimetil-guanidin-szulfátot és 2,6 g (32 mmól) nátrium-acetátot elegyítünk dimetil-formamidban és az elegyet nitrogénatmoszférában 100 °C-on 4 órán keresztül hevítjük. A reakcióelegyet lehűtjük és koncentráljuk. Szilikagélen kromatografáljuk (hexán/etil-acetát 9:1 arányú elegyével) és 0,4 g barna olaj keletkezik, 5-acetoxi-2-(di-metil-amino]Pl-izopropil-6-metil-piri midin. 196.764 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
