196560. lajstromszámú szabadalom • Eljárás interferon-alfát tartalmazó gyógyszer-készítmény előállítására
1 2 niás uronsavak, aszkorbinsav és sói, továbbá különböző szerves pufferrendszerek, úgy citrátpuffer, szukcinátpuffer, tartarátpuffer, fumarátpuffer, glikonátpuffer, oxalátpuffer, laktátpuffer vagy acetátpuffer alkalmazását ismertetik, különböző gyógyszerészeti hordozóanyagokkal, úgymint viaszokkal, nátrium-karboxi-metil-cellulózzaí, karboxi-vinil-származékokkal vagy vízzel együtt (0 080 879 számú európai szabadalmi leírás). Mind az utóbb említett, mind a korábban felsorolt interferon-stabilizáló szerek, valamint elsősorban a gyógyászati készítmények összetétele és azok alkalmazási módja (például a 0 162 332 számú európai szabadalmi leírás) alapjában eltérnek a találmányunk szerinti megoldástól és azzal nem hasonlíthatók össze. Találmányunk célkitűzése az volt, hogy nagytisztaságú, különösen rekombináns úton előállított IFN-alfához alkalmazható olyan hordozómátrixot találjunk, amely legalább a fent felsorolt követelményeknek megfelel, másrészt szerkezete úgy előállítástechnológiai, mind gazdaságossági szempontból a lehető legkedvezőbb - azaz egyszerű szerkezetű és nem befolyásolja hátrányosan a hordozómátrixban levő biológiailag aktív, topikális alkalmazásra szánt IFN-alfa hatóanyag kívánt optimális hatékonyságát. Találmányunk értelmében ezt a feladathalmazt úgy oldjuk meg, hogy hidroxi-etil-cellulózt és zselatint meghatározott keverési arányban összekeverünk és így egy olyan, IFN-alfához alkalmazható hordozó- és stabilizálóanyagot kapunk, amely nemcsak megfelel a fent leírt követelményeknek, hanem meglepő módon különösen stabil biológiai hatást is kölcsönöz az IFN-alfának és így a leginkább megfelelő nagytisztaságú, különösen rekombináns DNS-technológiával előállított IFN-alfa topikális alkalmazásához. A találmányunk szerinti megoldás egy további előnye, hogy az új hordozó/stabilizátor komplex mentes az emberi szérumalbumintól, amely — különösen topikális alkalmazásnál és éppen hosszabb idő alatt — Közismerten a helyi immunreakciótól egészen az allergosis-ig terjedő tünetekhez vezethet. Találmányunk ezért egy javított gyógyszerkészítményre vonatkozik IFN-alfa topikális alkalmazásához. Emellett azt is megállapítottuk, hogy a hordozóanyagként és stabilizálószerként funkcionáló két egyedi összetevő — azaz a hidroxi-etil-ceilulóz és a zselatin — együtt alkalmazva a várhatót meghaladó mértékű aktivitásmegőrző hatást fejt ki az IFN-alfára, itt azt is figyelembe kell venni, hogy az IFN-alfáról és az interferonokról általában ismeretes, hogy — például fizikai hatásokkal szemben — instabil proteinek, akár meztelen formában, akár más gélmátrixokba beépítve (vö. például B. R. Möller és munkatársai fent említett publikációjával), így a találmányunk szerinti készítményformáknak meglepő és előre nem látható módon az IFN-alfa stabilitásnövekedését illetően szinergetikus hatásuk van. Ezáltal a találmányunk szerinti megoldásban a zselatin nem csumán stabilizálószerként szolgál, hanem - csakis a hidroxi-etil-cellulózzal együtt alkotott komplexben — a találmányunkban megállapított és meglepő szinergetikus, IFN-alfát stabilizáló hatást is kifejti. A találmányunk szerinti, topikálisan alkalmazandó IFN-alfa gyógyszerkészítményformákat előnyösen vírus-sztatikumokként alkalmazzuk, így gyógyászati felhasználásuk történhet a bőrön, az orrban, a szemben és a hüvelyben, olyan fertőzéseknél, mint például a herpes labialis, herpes genitalis - beleértve a papillomarertőzéseket is —, szemölcsök és herpes zoster. Az alkalmazási terület felöleli a parakarcinózisok és karcinózisok topikális kezelését is. A találmány tehát olyan topikálisan alkalmazandó gyógyszerkészítményekre vonatkozik, amelyek az emberi interferon-alfa (IFN-alfa) hatóanyagot stabilizáltan tartalmazzák, és amelyek a következő alkotórészekből állnak: 1. egy a hatóanyagot hordozó és stabilizáló anyag komplex formájában, 2. egy antiadhéziós anyag, 3. adott esetben szokásos segédanyagok, úgymint puffer, só, nedvességmegkötőszer, tartósítószer, behatolást segítő adalék, oldószer. Az IFN-alfát hordozó és stabilizáló anyagként alkalmazhatjuk ismert anyagok, úgymint cellulózszármazékok (karboxi-metil-cellulóz, metil-cellulóz, hidroxi-propil-metil-cellulóz), valamint poli(vinil-alkohol)ok, poli(vinil-pirrolidon), poliakrilsav polimer (Carbapol) keverékeit savasav vagy lúgosán feltárt zselatinnal. Az előnyös hordozó- és stabilizálóanyag IFN-alfához az 1-nél nagyobb, előnyösen a 2,5-szubsztitúciós fokú hidroxi-etil-cellulóz a készítmény tömegére számítva 0,1 —2 tömeg%-ban és zselatin a készítmény tömegére számított 0,1-10 tömeg%-ban. Amennyiben poli(vinil-alkohol)-t vagy poli(vinil-pirrolidon)-t használunk, ebből 0,1-tői 15 tömeg%-ig terjedő mennyiséget alkalmazunk. így kifejezetten az IFN-alfának kölcsönözhetünk különleges stabilitást, amit a stabilitási viszonyokat vizsgáló kísérletek példáznak és az 1—3. ábrákon bemutatott görbék szemléltetnek, amelyek példaképpen a 14 heti, -10, >4 és *12 °C-on végzett tárolás eredményeit mutatják. A gél jobb szétterülése érdekében antiadhéziós szerként és antiadhéziós szűrési segédanyagként is alkalmazhatunk anionaktív, kationaktív, valamint semleges felületaktív anyagokat, előnyösen polietoxilezett szorbitánésztereket, mint a Polysorbat 20, 60, 80. Az antiadhéziós szer mennyisége általában 0,05- 0,3 tömeg%. Szervetlen és szerves pufferoldatként az IFN-alfa készítményekhez optimális 6,5-7,4 pH-tartományban megfelelőnek bizonyult a nátrium-foszfát puffer, kálium-hidrogén-foszfát — nátrium-dihidrogén-foszfát puffer, valamint a citromsav — foszfát puffer, a kálium-nátrium-glutamát-foszfát puffer és a szukcinát puffer. A találmány szerinti, IFN-alfát tartalmazó készítményformákhoz nedvességmegkötőszerként alkalmazható például glicerin, 1,2-propilénglikol, szorbit, butilénglikol, valamint poliolok (például polietilénglikol 400). Megfelelő, a bőrt nem izgató tartósítószerek például egy p-hidroxi-benzoesavészter (Nipa-észter), előnyösen p-lűdroxi-benzoesav-metilészter, további benzoesavak, szorbinsav, klór-hexidin-diglukonát, benzalkónium-klorid vagy hexadecil-trímetil-ammónium-bromid (Cetrimoniumbromid). Egy megfelelő, az IFN-alfa 2-vel kompatibilis behatolást segítő adalék a dimetil-szulfoxid 50 tömeg%ig terjedő mennyiségben. Nem-alkoholos hidrogéleknél a legmegfelelőbb oldószer a víz. A bőrön, a szemben, az orrban vagy más testüregekben topikális alkalmazásra alkalmas gyógyszerforma például a hidrogél. Ez általában 0,1—2,0 tömeg% zselatint és ugyanennyi cellulózszármazékot és/vagy 196.5ö0 5 10 15 20 25 3C 35 40 45 50 55 60 3
