196451. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikrobiológiai alaptáptalaj előállítására növényi és állati eredetű enzimek együttes alkalmazásával
2 196451 3 A találmány tárgya eljárás mikrobiológiai alaptáptalaj előállítására növényi és állati eredetű enzimek együttes alkalmazásával, amellyel a háziállatok, főként szarvasmarha, sertés húséból (izomzat, zsigerek) növényi fehérjékből, tejfehérjékből mechanikai művelettel (aprítás-keverés) szabályzott hőmérséklet, pH érték, valamint növényi és állati eredetű emésztóenzimek adagolása mellett mikroorganizmusok tenyésztésére alkalmas mikrobiológiai alaptéptalajt állítunk elő, amelyet konzerv vagy gyorsfagyasztott formában juttatunk el a felhasználóhoz. A gyakorlatban számos eljárás ismert mikrobiológiai alaptáptalaj előállítására. A leggyakrabban alkalmazott eljárás szerint mikrobiológiai alaptéptalajt oly módon készítenek - közvetlenül a felhasználás helyén -, hogy zsírtalanított ló vagy szarvasmarha húst mechanikai úton aprítják (pld. húsdarálón megdarálják) csapvizben áztatják, főzik és a főzetet leszűrik. Ezt a szűrletet úgynevezett .húslét" alkalmazzák mikrobiológiai alaptáptalajként mikroorganizmusok tenyésztésére. Ezen eljárás hátránya, hogy hosszú ' időt vesz igénybe, friss hús beszerzése nehézkes, a .húslé" igényesebb mikroorganizmusok kitenyésztésére nem alkalmas és költséges. ismeretesek a gyakorlatban az úgynevezett húskrémek, húskivonatok - mikrobiológiai alaptáptalajként való alkalmazásra -, amelyeket oly módon állítanak elő, hogy a háziállatok zsírtalanított, kötőszövettől megtisztított húsát (izomzat, zsigerek) enzimatikus úton feltárják, ebből vizes kivonatot készítenek és azt bepárolva, szárítva, fagyasztva, liofilezve forgalmazzák. Ilyen eljárásokat ismertet az Oxoid Handbuch 1977. D 4230 Wesel 187. oldal (angol), a Lab-lemco húskrém Oxoid L 29 (angol), Merck Mikrobiologisches Handbuch Merck Darmstadt 399. oldal, Fleischextrakt Art. Nr. 3979 (NSZK), Difco beef extract (USA). A fenti eljárással előállított alaptáptalaj bár alkalmas igényesebb mikroorganizmusok tenyésztésére, de hátránya, hogy a mér emésztett anyagot oldani, majd bepárolni, illetve felhasználás előtt ismét oldani kell, amely az eljárást bonyolítja, időtartamét és a költségeket jelentősen megnöveli, és az eljárással előállított termékek csak import útján valutáért szerezhetők be. A találmány szerinti eljárás ezen hátrányokat küszöböli ki, lehetővé teszi az alaptáptalaj nagyüzemi előállítását zárt emésztő berendezések (digesztorok) alkalmazása nélkül, igen gyorsan és egyszerűen. A találmány szerinti eljárás azon a felismerésen alapszik, hogy az alaptáptalaj kiindulási anyagait, háziállatok húsát és növényi eredetű fehérjéket melegítjük, majd mechanikai behatással, úgymint nagyfordulatú keveréssel aprítjuk - feltárjuk az emésztőenzimek részére -, majd két fázisban növényi és állati eredetű emésztőenzimeket és pH beállítása céljából adagoló anyagokat (savat, lúgot) keverünk hozzá, akkor az emésztés rendkívül gyorsan, mintegy 20-40 perc alatt megtörténik és igényesebb mikroorganizmusok tenyésztésére is alkalmas alaptáptalaj állítható elő. A találmány tehát eljárás mikrobiológiai alaptáptalaj előállítására növényi és állati eredetű enzimek együttes alkalmazásával, amelynél háziállatok főként szarvasmarha, sertés húsát (izomzat, zsigerek) növényi fehérjékkel (pld. szója) 1 : 1 - 1 : 10 arányban keverjük, a keveréket 303-323 °K-ra (30-50 °C)-ra melegítjük és 1000-10000 fordulat/perc fordulatszám mellett aprítjuk-keverjük legalább 10 percig, majd két fázisban növényi és állati eredetű enzimeket és a pH értéket szabályzó anyagokat, majd vizet adagolunk, az alaptáptalajt formázzuk. Az első fázisban az aprított, felmelegitett állati és növényi eredetű fehérjekeverékhez 1000-10000 fordulat/perc mellett kevei-ve növényi eredetű enzimet, célszerűen pap>aint, annak tömegére számított 0,2-1,5 t% arányban adunk és az aprítást 10-15 percig végezzük. A második fázisban a keverékhez annak tömegére számítva 2,0-3,0 t%-ban állati eredetű enzimet, célszerűen pepszint adunk (Pb. Hung, VI Magyar Gyógyszerkönyvi minőség) és a keverék (feltárandó anyag) pH-ját ásványi savval (előnyösen 105Í sósav) 2,0-3,0 értékre állítjuk. A keverékhez 5 t%-os mennyiségben 303- -323 °K-os (30-50 °C-os) ivóvíz minőségű vizet adunk a keverék homogenitása céljából. A keverést 10-15 percig végezzük. Az apritási-keverési művelet utolsó percében a pH értéknek 5,0-6,0-ra való beállítása céljából 5- -10%-os NaOH oldatot adagolunk a keverékhez. Az eljárás befejezésével az alapanyag feltáródik és végtermékként kenhető krémszerű anyagot kapunk, amelyet konzerv vagy gyorsfagyasztott állapotban - hűtóláncon keresztül - juttatunk el a felhasználókhoz mikrooiológiai alap táptalaj ként. Az eljárás végtermékeként előállított alaptáptalaj vízben könnyen oldódik, krémszerű halmazállapotú, minimális emészthetetlen kötőszöveti részeket, a mikroorganizmusok növekedéséhez szükséges nitrogén tartalmú vegyületeket, aminósavakat, peptideket, vitaminokat tartalmaz. A találmány szerinti eljárást a továbbiakban egy kiviteli példán mutatjuk be. Kiindulási anyagok: 40 kg friss marhasziv, in- és faggyútlanitott; 10 kg friss marhamáj; 10 kg 94%-os növényi fehérje izolátum (pld. szója); 5 kg defibrinált marhavér; Feltáró enzimek: 1 kg papain; 2 kg pepszin Adalék anyagok: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
