196230. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién antibiotikum származékok vízoldható és stabilis formáinak és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására és antifugális hatású növényvédőszer
196230 2 A fenti problémák a jól vízoldható és stabilis gamma-ciklodextrin komplex alkalmazásával kiküszöbölhetők. b) A nisztatin-gamma-ciklodextrin komplex biológiai értékmérése agardiffúzós módszerrel Candida albicans tesztgomba alkalmazásával történt, a meghatározáskor a komplexek csak vízben lettek oldva, amíg a nisztatin kalciumkloridos metanolban és az így készült oldatok vízzel tovább hígítva. (Ph. Hg. VI. Tomus. II. 827. oldal). 8. táblázat Néhány komplex hatóanyagtartalma (spektrofometriásan mért) és biológiai aktivitása: Komplex Hatóanyagtartalom (UV-spektrofotomet.) Biológiai aktivitás E/mg 1. 7,5 % 351 2. 7,6% 362 3. 8,0% 399 4. 8,4% 450 A komplexképzéshez használt nisztatin alapanyag biológiai aktivitása 5033 E/mg volt. c) Az Amphotericin B-gamma-ciklodextrin komplex antifungális hatékonyságát Candida albicans teszt organizmuson ellenőriztük agar-diffúziós módszerrel. A minimálisan gátló koncentrációd üg/ml volt Amphotericin B-re számítva, ami megfelel a nem komplexált anyag hatékonyságának. 8. Polién antibiotikumok gamma-CD komplexeinek felszívódás vizsgálata a) Nisztatin felszívódása per os adagolt nisztatin-gamma-CD komplexből A felszívódás vizsgálatát egereken végeztük, Candida albicans szuszpenzió intravénás adagolásával előidézett szepszis modellen. Az így létrehozott szepszis 2—3 nap alatt 100%-os elhullást okozott. A kísérleti állatoknak per os (p. o.) adagoltunk nisztatin-gamma-CD komplexet, melynek nisztatin tartalma 8% (előállítása a 3. példa szerint történt). Evvel paralell intravénásán (i. v.) adagoltunk nisztatint. A kezeletlen kontrolihoz képest a túlélési idő meghosszabbodott. Ha a nisztatin-gamma-CD komplex formájában per os adagolt és a szabad nisztatin formájában intravénásán adagolt nisztatin azon dózisait összevettük, melyek azonos túlélési idő meghosszabbodást hoznak létre (9. sz. táblázat), azt találtuk, hogy a komplex formából a nisztatin hatóanyagnak átlagosan a 6,2%-a került a véráramba. A legmagasabb dózisoknál (i. v. 1,56 és p. o. 25 mg/kg) a túlélési idő visszaesése már a nisztatin enyhe toxikusságának a következménye. b) Nisztatin felszívódása subcutan adagolt nisztatin-gamma-CD komplexből. Átlagosan 180 g tömegű CFY nőstény patkányokat kezeltünk nisztatinnal, nisztatin-gamma-CD komplexszel (hatóanyagtartalom 8%), illetve gamma-CD-nel, oly módon, hogy a vizsgálandó anyagok Tween-80-t tartalmazó fiziológiás sóoldattal készült szuszpenzióját subcutan juttattuk az állatokba. A dózisok és az elhullott állatok száma közötti összefüggést a 10. sz. táblázat mutatja. A nisztatin-gamma-CD komplex esetén a 20 mg/kg dózisnál a kezelt állatok 90%-a 48 órán belül elpusztult, míg a szabad nisztatin esetén a 150 mg/kg-os dózisnál sem pusztult el egy állat sem az 1 hetes megfigyelési idő alatt. Kontrollként 10 állatot kezeltünk subcutan annyi gamma-CD-vel, amennyit az állatok a 90%-os elhullást eredménye-5 10 15 20 25 30 35 9. táblázat Nisztatin dózis, i. v. mg/kg Túlélési idő meghosszabbodás % Nisztatin dózis, p. o. mg/kg Túlélési idő meghosszabbodás % Felszívódott nisztatin i. v./p. o. dózis 0,19 30,2 3,12 33,2 6,09 0,39 43,5 6,25 43,5 6,24 0,78 62,7 12,5 63,0 6,24 1,56 34,6 25,0 38,9 6,24 10. táblázat Nisztatin Nisztatin-gamma-CD komplex (hatóanyagtartalom: 8%) Dózis mg/kg Vizsgált állatok száma Elpusztult állatok száma 24 h 48 h 1 hét Dózis mg/kg Vizsgált állatok iZáma Elpusztult állatok száma 24 h 48 h 1 hét 10 10 0 0 0 10 10 0 0 0 20 10 0 0 0 20 10 8 1 0 100 5 0 0 0 150 5 0 0 0 10
