196230. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién antibiotikum származékok vízoldható és stabilis formáinak és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására és antifugális hatású növényvédőszer
1 ző nisztatin-gamma-CD komplexszel való kezelés alkalmával kaptak (302 mg/kg). Az 1 hetes megfigyelési idő alatt egy állat sem pusztult el. A vizsgálatok alapján egyértelmű, hogy a nisztatin-gamma-CD komplexből subcutan toxikus dózis szívódott fel, míg a szabad nisztatin subcutan nem, vagy csak elhanyagolható mértékben szívódik fel. A felszívódást kvalitative vérszintméréssel igazoltuk, felvettük a nisztatin UV-spektrumát, mely alkalmas a szérumban való megjelenésének jelzésére. Vizsgálataink szerint a subcutan adagolt szabad nisztatinból még 200 mg/kg dózis sem adott vérszintet, míg a nisztatin-gamma-CD komplexből már 20 mg/kg dózis jól mérhető vérszintet eredményezett: kezelés után 2—4 órával 6—10 pg/ml értéket mutatott. 9. Polién antibiotikumok gamma-CD komplexeinek hemolízis csökkentő hatásának vizsgálata a) Nisztatin-gamma-CD komplex Humán vérből előállított vörösvérsejt-szuszpenzión vizsgáltuk a szabad nisztatin, nisztatin-gamma-CD komplex (hatóanyag tartalom: 8%) és gamma-CD hemolitikus hatását, T. Irie et al. [J. Pharm. Dyn. 6, 408-414 (1983)] módszerével. Az eredményeket az 50%-os hemolízishez tartozó koncentrációval jellemeztük: EHso. A szabad nisztatinra kapott érték: EH50 = 57 pg/ml, mely jól egyezik az irodalomban közűitekkel [J. Antibiotics 22, 1080—81 (1979)], miszerint EH5o = 50pg/ml. Méréseink szerint a nisztatin-gamma-CD komplexnek a nisztatinra vonatkoztatott értéke: EH5o = 115|j.g/ml. Látható, hogy a CD-komplexben a nisztatin hemolizáló hatása a felére csökkent. A hemolizáló hatás koncentráció függését vizsgálva megállapítottuk, hogy a nisztatin-gamma-CD komplexnek 70 pg/ml nisztatin koncentrációig gyakorlatilag nincsen hemolizáló hatása, ugyanakkor az azonos koncentrációjú szabad nisztatin már 70%-os hemolízist okoz.___ A komplexben lévő gamma-CD-vel azonos mennyiségű gamma-CD hemolizáló hatását vizsgálva, azt állapítottuk meg, hogy az irodalmi adatoknak megfelelően 1600 -g/ml koncentrációig nem okoz hemolízist. b) Amphotericin B-gamma-CD komplex Amphotericin B és Amphotericin B-gamma-CD komplex (hatóanyagtartalom: 0,6%, előállítása a 6. példa szerint történt) hemolizáló hatását vizsgáltuk az a) pontban leírt módon. A szabad Amphotericin B esetében EHso = 4,8 |ig/ml-nek adódott, mely szintén jól egyezik az irodalomban talált értékkel (5|tg/ml). Az Amphotericin B-gamma-CD komplex a hatóanyagra számított 25 pg/ml-es koncentráció esetén is csak 2,5%-os hemolízist okozott, míg a szabad Amphotericin B ugyanilyen koncentrációban 92,4%-os hemolízist. Példák a polién-antibiotikumok-gamma-ciklodextrin komplexeinek gyógyszerkészítményekben és növényvédőszerekben történő alkalmazására 2 10. példa Nisztatin hintőpor előállítása: 100000 NE hatáserősségű nisztatin tartalommal grammonként. 250 mg nisztatin-gamma-ciklodextrin komplex 1 g-ra kiegészítve talkummal. (A nisztatin-gamma-ciklodextrin komplex mennyisége 400 E/mg nisztatin biológiai aktivitású anyagra vonatkozik.) 11. példa Nisztatin szem- illetve fülcsepp: 10000, illetve 30000 E nisztatin tartalom milliliterenként. 30, illetve 70 mg nisztatin-gamma-ciklodextrin komplex, amely 400 NE/mg hatáserősségű, homogén közegben liofilezéssel sterilen készült, ad 1 ml desztillált víz. Az oldat célszerűen a felhasználás előtt frissen készítendő, és szobahőmérsékleten tárolva a készítéstől számított 10 napon belül felhasználható. Aktivitásának több mint 70%-át megtartotta ilyen körülmények között is. (A kereskedelmi forgalomban lévő hasonló készítmények a nisztatint mikronizált por alakban tartalmazzák, amiből a felhasználáskor szuszpenziói kell készíteni, amit fénytől védve, hűtőszekrényben kell tárolni, ennek ellenére aktivitásának nagy részét 1 héten belül elveszti). 12. példa Nisztatin kenőcs: 100000 NE/g nisztatin tartalmú; 1 g 400 NE/mg nisztatin tartalmú gamma-ciklodextrin komplexet keverünk 3 g unguentum-Simplex kenőcshöz. 13. példa Nisztatin tabletta: 200000 NE nisztatin tartalom tablettánként. 500 mg Nisztatin-gamma-ciklodextrin komplex (400 NE/mg hatáserősségű) 145 mg laktóz 30 mg burgonyakeményítő 20 mg talkum 5 mg kalciumsztearát tablettánként. A tabletta össztömege: 700 mg A tablettákat önmagában ismert módon, közvetlen préseléses technológiával készítjük. 14. példa Nisztatin hüvelykúp: 100000 NE nisztatin/kúp 250 mg átlagosan 400 NE/mg nisztatin tartalmú gamma-ciklodextrin komplexet 2 g átlagtömegű Adeps solidus (szilárd-zsír) vagy Mássá polyoxyaetheni (polietilénglikol) alapanyagú kúpba dolgozzuk. 15. példa Amphotericin B injekció: 5, illetve 10 mg/ml; intravénás infúzióban való alkalmazása. 700, illetve 1400 mg 0,8% hatóanyagtartalmú 11 196230 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
