196230. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién antibiotikum származékok vízoldható és stabilis formáinak és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására és antifugális hatású növényvédőszer
1 196230 2 4. táblázat Flavofungin- és a flavofungin-gamma-CD komplex hőstabilitása szobahőmérsékleten és 60 °C-on, az eredeti hatóanyagtartalom %-ában kifejezve Idő (nap) 60 °C-on tárolt Szobahőmérsékleten tárolt flavofungin alapanyag flavofungin-gamma-CD-komplex flavofungin + glükóz keverék flavofungin y-CD-komplex 0 100% 100% 100% 100% 1 43,8% 2 23% 100% 90% 100% 5 99,5% 81% 99,5% 7 99% 99% 10 98% 65% 96% 15 94% 49% 94,8% 20 85,4% 95,0% 29 70,5% 95,0% 35 79,2% 94,9% 44 78,7% 94,8% 50 75,0% 94,5% komplexbe nem zárt flavofungin 60 °C-on már 24 óra után erős bomlást szenved (ezt a teljes UV-spektrum felvétele is igazolja). Ezzel szemben a flavofungin-gamma-CD komplex eredeti hatóanyagtartalmának közel 75%-a maradt változatlanul 50 nap után is. A szobahőmérsékleten tárolt, 10%-os flavofungin tartalmú, glükózzal alkotott fizikai keverék hatóanyagtartalmának az 50%-a elveszik 14 napi tárolás után; a komplex hatóanyagtartalmának viszont több mint 95%-a 50 nap után is változatlanul megmarad. A +4 °C-on zárt edényben 7 hónapig tárolt minta nem mutatott hatóanyagcsökkenést. Mérési eredményeinket a 4. táblázatban foglaltuk össze. A mikrobiológiai értékmérés is megerősítette, hogy gamma-ciklodextrin komplex formában a flavofungin jóval stabilabb. Flavofungin-gamma-ciklodextrin komplexeket 50 napon át szobahőfokon ill. 60 °C-on tartottunk, ezt követően antifungális hatásuk nem változott. (N2 atmoszférában mélyhűtőben tárolt flavofungin minta MIC = 25 /rg/ml S. cerevisiae, C. albicans, C. Crusei és C. pseudotropicals tesztorganizmuson vizsgálva). 2. példa Flavofungin-gamma-CD komplex előállítása heterogén fázisban 9 g gamma-ciklodextrint (nedvességtartalom 1,5%) dörzsmozsárban 1 g flavofunginnal homogenizálunk, majd a keveréket 5 ml 50% etilalkohollal szuszpendáljuk. A szuszpenzió néhány perc keverés után hirtelen megszilárdul, az így kapott kenőcsszerű anyagot vékony rétegben szétterítve vákuumexszikkátorban néhány órán keresztül szárítjuk, majd a szilárd komplexet porítjuk. A kapott termék tömege: 10 g, hatóanyagtartalma: 10 t%. Az 1. példában leírt flavofungin-gamma-CD liofilizált komplexnél a 4. táblázatban ismertetett 30 hőstabilitási vizsgálatokat elvégeztük ezzel a termékkel is. Azt találtuk, hogy az így előállított komplex a liofilizált komplexhez hasonlóan megnövekedett hőstabilitást mutatott, és antifungális hatékonysága sem csökkent. 35 A flavofungin-gamma-ciklodextrin komplex röntgendiffrakciós porfelvételein a jellegzetes refleksziós csúcsok szignifikánsan eltérő 20 ° szögér-, téknél jelentkeznek, mint a gamma-ciklodextrin és a flavofungin hasonló összetételű fizikai keveréké- 40 nek a pordiagramján. Ez eltérő típusú kristályrácsra utal, ami a komplexképzés tényét támasztja alá. A flavofungin gamma-ciklodextrin liofilizált komplex pordiagramja amorf szerkezetre utal. 45 3. példa Nisztatin-gamma-CD komplex előállítása homogén fázisban 50 10 g gamma-ciklodextrint (víztartalma 1,5%) 90 ml desztillált vízben oldottunk 50 °C-on. Oldódás után 2 g nisztatint (biológiai aktivitása 5033 E/mg) adtunk az oldathoz és 5—15 percen keresztül intenzíven kevertettük. Utána az oldatot leszűrtük, a gg kapott sárga színű oldatot liofilezéssel vízmentesítettük. A kapott termék 10 g, nisztatin tartalma spektrofotometriásán mérve: 8%, biológiai aktivitása: 399 E/mg. (A nisztatin 2. nemzetközi egysége 4855 IU/mg, ahol IU megfelel 0,0002059 mg aktifin vitásának. Thomas-Dixon: J. Biol-Stand. 10 (4), bU 369—377, 1982). A nisztatin-gamma-CD komplex világossárga, laza por. Vízben szobahőmérsékleten gyorsan, tisztán oldódik, a kapott vizes oldatban 8—9 fig mg/ml nisztatin mérhető (ami megfelel~ 100 mg komplex/ml oldott anyagnak). A komplex biológiai értékmérésekor a hatóanyagtartalommal és a 7
