196230. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién antibiotikum származékok vízoldható és stabilis formáinak és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására és antifugális hatású növényvédőszer
196230 2 nensből álló negatív sávból áll. 330 és 300 nm között a monomer nem ad spektrumot. A cirkulár díkroizmus spektrum alapján megállapítottuk, hogy az Amphotericin B-gamma-CD komplex vizes oldatában, kellően nagy gamma-CD koncentráció esetén, az Amphotericin B ugyanolyan monomer alakjában stabilizálódik, mint 50%-os etilalkoholos oldatban. Hígabb oldatban a komplex disszociációja révén felszabaduló Amphotericin B csak dimerizálódik, a jelenlévő gamma-CD megakadályozza a nagy asszociációfokú polimer állapot kialakulását. A találmányunk tárgya tehát eljárás új, vízoldható és stabilis polién antibiotikum-származékok előállítására, oly módon, hogy vízben korlátozottan oldódó, illetve gyakorlatilag oldhatatlan polién antibiotikumokat gamma-CD-nel reagáltatunk, víz jelenlétében, keverés közben. A polién antibiotikumot 1 mmól antibiotikumra számolva 1—40 mmól gamma-CD-nel reagáltatjuk, 1—500 ml víz jelenlétében. Az eljárás kivitelezésének két módját alkalmazzuk: ______ a) a polién antibiotikumot 1 mmól antibiotikumra számolva 1—40 mmól gamma-CD-nel reagáltatjuk, 20—500 ml víz jelenlétében, 25—55 °C-on, keverés közben, majd a kapott antibiotikum-gamma-CD-komplexet izoláljuk, vagy b) a polién antibiotikumot 1 mmól antibiotikumra számolva 1 —40 mmól gamma-CD-nel reagáltatjuk, 1—50 ml 20—80 térfogat %-os, vízzel elegyedő szerves oldószer — előnyösen etanol — jelenlétében, keverés illetve gyúrás közben. A kapott antibiotikum-gamma-CD komplexet liofilezéssel, porlasztva szárítással, alacsony hőmérsékleten történő vákuumbepárlással vagy vákuumszárítással izoláljuk. A találmányunk szerinti eljárással előállított antibiotikum-gamma-CD komplexek felhasználhatók stabilis, injektábilis és lokálisan alkalmazható gyógyászati készítmények, illetve növényvédőszer kombinációk előállítására. Találmányunk tárgya továbbá eljárás antifungális hatású gyógyászati készítmények — előnyösen hintőpor, szem- és fülcsepp, kenőcs, tabletta, hüvelykúp, injekció, szövettenyészetek gombamentesítésére használható adalékanyag — előállítására, oly módon, hogy az előállított polién-antibiotikum-gamma-CD komplexet a gyógyászati készítményeknél szokásos módon gyógyászati készítménnyé készítjük ki. Találmányunk tárgya továbbá eljárás antífungális hatású növényvédőszerek — előnyösen vetőmagcsávázószerek, permetezőszerek — előállítására, oly módon, hogy az előállított polién-antibiotikum-gamma-CD komplexet a növényvédőszerek előállításánál szokásos módon növényvédőszerré készítjük ki. A találmányunk szerinti eljárással előállított polién-antibiotikum-gamma-CD komplexekből homogén oldat készíthető. Pl. az irodalomból ismert 10—30000 E/ml hatékonyságú szemcsepp, melyben nisztatin vizes szuszpenzió formájában található, előállítható 30—70 mg/ml nisztatin-gamma-CD komplex oldásával, így homogén oldat keletkezik. A megnövekedett vízoldékonyság lokálisan alkalmazott szereknél, nagy valószínűséggel, fokozódó hatékonysággal is együtt jár. A komplexképzés szempontjából valamennyi polién antibiotikum azonos módon viselkedik, tehát a felsoroltakon kívül például a candidicin, a pimaricin, a candidin, a hamycin, a candihexin, stb. is, ezért találmányunkat nem kívánjuk korlátozni csupán a leírt polién antibiotikumokra. Találmányunk részleteit az alábbiakban néhány polién antibiotikum gamma-ciklodextrin komplexének előállításán illetve a komplexek alkalmazásán és formulázásán szemléltetjük. PÉLDÁK 1. példa A Flavofungin-gamma-ciklodextrin komplex előállítása homogén fázisban. 22 g gamma-ciklodextrint (víztartalma 1,5%) 500 ml desztillált vízben oldottunk 30 °C-on, majd 2,5 g szilárd flavofungint adtunk az oldathoz és három órán át intenzíven kevertettük. Ezután az oldatot leszűrtük és a kapott intenzív sárga szűrletet liofilezéssel vízmentesítettük. A kapott termék 21 g. flavofungin tanalma spektrofotometriásán mérve 9,3%, a bevitt flavofunginnak kb. 80%-át kaptuk vissza komplex formájában. A flavofungin-gamma-CD komplex laza, sárga színű por. 100 mg komplex 2,5 ml desztillált vízben 50 °C-on pillanat szerűen tisztán oldódik. Az így készült oldat koncentrációja 3,6 mg/ml flavofunginra nézve, az oldat 6 napon át szobahőmérsékleten szórt fényben tárolva semmiféle fizikai vagy kémiai úton kimutatható változást nem szenved. Az 1. táblázat oldódási adataiból látható, hogy a 4% körüli gamma-CD oldatnál érjük el az oldódási maximumot, a kb. 4 mg/ml oldott flavofungin koncentrációt, így ez az oldat adja liofilizálással való víztelenítés után a legkedvezőbb összetételű 9— '0%-os hatóanyagtartalmú komplexet. A termogravimetriás, a differenciál scanning kalorimetriás (DSC) illetőleg a Thermal Evolution Analysis (TEA) vizsgálatok jellegzetes különbségeket mutattak a flavofungin, a flavofungin-gamma-CD komplex, illetőleg a Óavofungin-gamma-CD keverék között. A flavofungin 100 °C-ig 7%-os tömegváltozást mutat, amely a TEA görbe alapján szerves anyag eltávozásából származik. 100 °C fölött bomlani kezd és 300 °C-ig 24% tömegváltozást szenved. A flavofungin-gamma-CDliofilezett minta komplex voltát egyrészt az bizonyítja, hogy a TEA görbén nem jelentkezik 100 °C-ig szervesanyag eltávozás, amely a szabad flavofunginra lenne jellemző, másrészt a DSC görbén sem jelentkezik a flavofungin oxidációjára jellemző, 100—200 °C közötti exoterm változás, ugyanakkor a DSC görbén 263 °C-on jelentkezik egy exoterm folyamatra jellemző csúcs, amely a komplexből felszabaduló flavofungin oxidációjára jellemző. A flavof jngin-gamma-ciklodextrin komplex hőstabilitásáí vizsgáltuk: az anyagokat 1 mm-es rétegvastagságban oraüvegen kiterítve levegőtől, fénytől nem védetten tároltuk szobahőmérsékleten ill 60 °C-on szárítószekrényben. A különböző időpontokban vett mintákat spektrofotometriásán analizáltuk. A kémiai mérések alapján azt találtuk, hogy a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
