196229. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A 40926 antibiotikum N-acilamino-glukuronil-aglikonjai és az A 40926 antibiotikum aglikonjai, valamint az ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 196229 2 Aeluálószer: CH3CN 10% NaH2P04 • H2O (2,5 g/1) 90% pH 6,0-ra beállítva B eluálószer: CH3CN 70% NaH2P04-H20(2,5g/l) 30% pH 6,0-ra beállítva eluálás: lineáris grádiens (5%—60% B eluálószer az A eíuálószerben), 40 perc alatt áramlási sebesség: 1,8 ml/perc UV detektor: 254 nm belső standard: teikoplanin A2 2 komponens (Gruppo Lepetit S. p. A.) E) sóképzésre képes savas csoportok F) sóképzésre képes amino-csoportok G) a maghoz nem kapcsolódik mannóz-egység. Az A 40926 antibiotikum N-acilaminoglukuronil-aglikon A faktor (nem-só alakban) a következő jellemzőket mutatja: A) a következő abszorpciós maximumokat tartalmazó UV abszorpciós spektrum: lambdamax (nm) a) 0,1N HC1 282 b) pH 7,4 foszfát puffer 282; 310 (váll) c) 0,1N KOH 302 B) a 4. ábra szerinti IR abszorpciós spektrum, amely a következő abszorpciós maximumokat mutatja (cm-1): 3700—3000; 3000—2800; 1650; 1585; 1505; 1460 (nujol); 1375 (nujol); 1295; 1230; 1210; 1150; 1070; 1060; 1010; 845; 820; 720 (nujol) C) az 5. ábra szerinti 'H—NMR spektrum, amely a következő jelcsoportokat mutatja (ppmben) 270 MHz-en DMSO—d«-ban (hexadeutero-dimetilszulfoxid) felvéve, belső standardként (0,00 ppm) TMS-t alkalmazva (delta, ppm): 0,85, t (terminális CH3); 1,0—1,3 (alifás CHj-ek); 1,42, m (OC—C—CH2); 2,00, t (CO—CH2); 2,35, s (NCHj); 2,49, s (DMSOdj); 2,82, m (Z2); 2,8—3,8 (cukor-protonok és Z’2); 4,12, m (X6); 4,56, s (XI); 4,34, d (X5); 4,41, d (X7); 4,96, m (X2); 5,08—5,12 (4F és Z6); 5,40 (az acilaminoglukuronilsav anomer protonja); 5,58, d (X4); 5,74, s (4B); 6,05, d (X3); 7,75, s (6B); 6,25—8,40, s, d és m (aromás CH-k és pepiid—NH-k). D) retenciós idő (Rt) 1,20 a teikoplanin A2 2 komponenshez viszonyítva, amelynek R( értéke 20,3 perc, az elemzést fordított fázisú HPLC technikával végezve a következő körülmények között: oszlop: Ultrasphere ODS (5 pm/Altex/Beckman) 4,6 mm (belső átmérő) x 250 mm előoszlop: Brownlee Labs RP 18 (5 um) Aeluálószer: CH3CN 10% NaH2P04-H20 (2,5 g/1) 90% pH 6,0-ra beállítva B eluálószer: CH3CN 70% NaH2POH20(2,5g/l) 30% pH 6,0-ra beállítva eluálás: lineáris grádiens (5%—60% B eluálószer A eíuálószerben), 40 perc alatt áramlási sebesség: 1,8 ml/perc UV detektor: 254 nm belső standard: teikoplanin A2 2 komponens (Gruppo Lepetit S. p. A.) E) molekulatömeg kb. 1554, FAB—MS-sel meghatározva F) sóképzésre képes savas funkciók G) sóképzésre képes amino-funkció H) a maghoz nem kapcsolódik mannóz-egység. Az A 40926 antibiotikum N-acilaminoglukuronil-aglikon Bo faktor fa nem-addíciós só alakban) a következő tulajdonságokkal rendelkezik: A) UV abszorpciós spektruma a következő abszorpciós maximumokat mutatja: larnbdamax (nm) a) 0,1N HC1 282 b) pH 7,4 foszfát puffer 282; 310 (váll) c) 0,1N KOH 302 B) a 6. ábrán bemutatott IR abszorpciós spektrum, amely a következő abszorpciós maximumokat mutatja (cm-1); 3700—3100; 3000—2800 (nujol); 1650; 1585; 1505; 1460 (nujol); 1375 (nujol); 1295; 1230; 1210; 1150; 1060; 1010; 980; 840; 820; 720 (nujol); C) a 7. ábrán bemutatott 'H—NMR spektrum, amely a következő jel-csoportokat (ppm-ben) mutatja 270 MHz-en, DMSO—d«-han (hexadeuterodimetilszulfoxid) felvéve, belső standardként (0,00 ppm) TMS-t alkalmazva (delta, ppm); 0,84, d (izopropil—CH3-ek); 1,(V—1,3 (alifás CH2- ek); 1,3—1,6 (OC—C—CH2 és izopropil—CH); 2,00, t (OC-CH2); 2,32, s (NCHj); 2,49, s (DMSOds); 2,82, m (Z2); 2,9—3,8 (cukor protonok); 4,12, m (X6); 4,44, s (XI); 4,33, d (X5); 4.37, d (X7); 4,95, m (X2); 5,06-5,10 (4F és Z6); 5.38, d (az acilaminoglukuronilspv anomer protonja); 5,59, d (X4); 5,72, s (4B); 6,05, d (X3); 7,74, s (6B); 6,27—8,5 (aromás és peptid NH-k) D) retenciós idő (R<) 1,30 a teikoplanin A2 2 komponenshez (R< = 20,3 perc) viszonyítva, az elemzést fordított fázisú HPLC-vel a következő körülmények között végezve): oszlop: .Ultrasphere ODS (5 pm/Altex/Beckman) 4,6 mm (belső átmérő) x250 mm elő-oszlop: Brownlee Labs RP 18 (5 pm) A eluálószer: CH3CN 10% NaH2P04H20 (2,5 g/1) 90% pH 6,0-ra beállítva B eluálószer: CHjCN 70% NaH2P04-H20 (2,5 g/1) 30% pH 6,0-ra beállítva eluálás: lineáris grádiens (5%—60% B eluálószer A eíuálószerben), 40 perc alatt áramlási sebesség: 1,8 ml/perc UV detektor: 254 nm belső standard: teikoplanin A2 2 komponens (Gruppo Lepetit S. p. A.) E) molekulatömeg kb. 1568, FAB—MS-sel meghatározva F) sóképzésre képes savas csoportok G) sóképzésre képes amino-csoport H) a maghoz nem kapcsolódik mannóz-egység Az A 40926 antibiotikum N-acilaminoglukuronil-aglikon B, faktor molekulatömege kb. 1569, FAB—MS-sel meghatározva, és fizikokémiai tulajdonságai lényegében megegyeznek az A 40926 antibiotikum N-acilaminoglukuronil-aglikon Bo faktor előbbiekben ismertetett jellemzőivel, a következő eltérésekkel: 0,84-nél (delta, ppm) triplettel rendelkezik (amely egy n-propil-csoport metilcsoportjának tulajdonítható) az előbbiekben leírt NMR rendszerben, és retenciós ideje a teikoplanin 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
