196194. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 1,4-diszubsztituált piperazinok és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
3 196194 4 A találmány tárgya eljárás az I általános képletű új difenil-metoxi-alkil-piperazinok, gyógyászatilag elfogadható savaddlciós és kvaterner sóik, valamint az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására. Az I általános képletben: Rí, Rz hidrogénatom, halogénatom, trihalogén-metil-csoport, 1-4 szénatomos alkilcsoport, nitrocsoport hidroxicsoport vagy 4-(2-5-szénatomosl-alkenil-piperazinil-csoport Ra, R4 hidrogénatom, halogénatom, hidroxicsoport, 1-4 szénatomos alkoxicsoport, benzil-oxi-csoport vagy trihalogén-metil-csoport, Rs jelentése hidrogénatom, vnffv 1-4 szénatomos alkilcsoport, R6 jelentése 3-6 szénatomos alkil-, alkenil-, alkinil-, vagy egy -C-R7 képletű csoport, ahol II 0 » R7 jelentése 2-5 szénatomos alkil-, alkenil-, vagy alkinilcsoport, és n értéke 2 vagy 3 azzal a megkötéssel, hogy ha R2-R5 = H, n = 2 és Rí = 2-klór, akor R# izopropil-, izobutil- és n-butilcsoportoktól eltérő szubsztituens, vagy ha R2-R5 = H, n = 3 és Ri = 2-C1, illetve, ha R2-R5 = H, n = 2 és Rí = 2-metilcsoport, akkor R6-nak mindkét esetben izopropilcsoporttól eltérő szubsztituenst kell képviselnie, vagy ha R1-R5 = H, n = 2, akkor Rí a propionil-csoporttól eltérő szubsztituens. A disclaimerekkel kizárt ismert vegyületek előállítását a Chemical Abstracts 52. 12 873 i [H. G. Morren: Ind. Chim. belge 22, 409-20 (1957)], a Chemical Abstracts 52. 20 101 f és 54:12 169a helyen referált 551 032 és 549 420 számú belga, valamint a Chemical Abstracts 85: 160 163 p helyen re - ferált 2 276 824 számú francia szabadalmi leírások közük. A fenti vegyületek a farmakológia! vizsgálatok szerint gyenge antihisztamin hatás mellett erős gyomorfekély gátló hatásúak anélkül, hogy más farmakológiai hatással rendelkeznének, illetőleg a francia szabadalmi leírásban közölt vegyidet köhögéscsillapitó hatású. Ezzel szemben, meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy a találmány szerinti I általános képletű új vegyületek szelektív, erős központi idegrendszeri dopaminerg hatással rendelkeznek, és ily módon alkalmasak a dopaminerg rendszer degenerációja és/vagy hipofunkciója következtében előálló kóros állapotok, mint pl. depresszió, parkinzonizmus, bizonyos neuroendokrin megbetegedések, .öregedés', impotencia stb. kezelésére. A vegyületek dopaminerg aktivitását in vitro és in vivo állatkísérletekben határoztuk meg. Az in vivo aktivitás meghatározásnál azt is vizsgáltuk, hogy a vegyületek mennyiben képesek kivédeni az l-metil-4-fenil-l,2,3,6- -LeLrahidropiridin (MPTP) nerurotoxikus hatását. Az MPTP-röl 1979-ben írták le, hogy a dopaminerg rendszer degenerációját okozza emberen és majmokon [lásd. Davis, G. C. és munkatársai: Psychiat. Res. 1, 249-254 (1979); Burns R. S. és munkatársai: Proc. Natl. Acad. Sei. (USA) 80, 4546-4550 (1983)], majd a vegyület szelektív dopaminerg károsító hatását egereken is kimutatták, [pl: Hallman H. és munkatársai: Eur. J. Pharmacol. 97, 133-136 (1984); Pileblad E. és munkatársai: Neuropharniacol. 24, 689-694 (1985)]. Az MPTP-vel, kísérleti állatokon létrehozott szelektív dopaminerg károsító hatás a humán dopaminerg rendszer degenerációs és hipofunkciós jellegű megbetegedésével analóg folyamatnak tekinthető és alkalmas modell olyan vegyületek vizsgálatára, melyek a terápiában a dopaminerg rendszer kóros működésével kapcsolatos betegségek kezelésére szolgálhatnak [Bradbury, A. J. és munkatársai: The Lancet, 1444-45 (1985); Przuntek, H. és munkatársai: Life Sei. 37, 1195-1200 (1985)]. A vizsgálatokhoz 20-25 g-os, him, CFY egereket (LATI, Gödöllő) használtunk. A vegyületeket 1%-os Tween 80-ban homogenizáltuk és 0,1 mmól/kg-os dózisban a táblázatban megadott módon 1 órával az MPTP beadása előtt adtuk az állatoknak. Az MPTP-t fiziológiás sóoldatban frissen feloldva 70 mg/kg-os dózisban szubkután adtuk az egereknek. Az állatokat az MPTP adása után 72-96 óra múlva dekapitálással leöltük, az agyat gyorsan eltávolitottuk, jéghideg fiziológiás sóoldatban lehűtöttük és a striatumot kiboncoltuk, majd szárazjégen lefagyasztottuk. A szövetek súlyát (fagyott állapotban) lemértük, 1 ml 0,4 N jéghideg, 0,5% NaíSíOs-t, 0,25% NaíEDTA-t és 100 ng N-metil-dopan.int (belső standard a katechol-aminok meghatározásához) tartalmazó perklórsavban Ultra-Turrax készülékkel homogenizáltuk. A homogenizátumot 20 000 g-vel centrifugáltuk 10 percig +4 °C-on, majd a felülúszóból 0,8 ml-t kivettünk. 20 mg aktivált AI2O3 hozzáadása után a pH-t 0,8 ml 0,5 M-os Tris oldattal 8- -ra állítottuk és a csöveket 20 percig rázattuk. Az alumínium-oxidot ülepítettük, a felülúszót leszivattuk, majd 3x5 ml desztillált vízzel mostuk. Az aluninium-oxidon adszorbeálódott katechol-aminokat 1 ml 0,05 N perklórt avval eluáltuk. Az eluátum egy részletéből dopamint határoztunk meg nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel elektrokémiai detektálással: (Labor MIM OE-320 pumpa, 4x150 mm-es Nucleosil 5 C-18 analitikai és 4x20 mm-es Nucleosil 5 C-18 előtét oszlop, glassy-carbon munkaelektróddal és Ag/AgCh referenciaelektróddal ellátott elektrokémiai 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
