196170. lajstromszámú szabadalom • Eljárás [(1,3-dioxo-1,3-propán-diil)-diimino]-bisz-benzoesav származékok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 2 196.170 lenlétében 37 "C hőmérsékleten 2 órán át inkubáljuk. Az elegy hez hozzáadjuk a DNP-Ascaris antigén oldatát, az antigén végkoncentrációja 20 jig/ml, és az ele- 5 gyet még 20 percig inkubáljuk. A reagáltatás befejeztével az oldatot 10 percig, alacsony hőmérsékleten 500 g mellett centrifugáljuk és a továbbiakban a felülúszót használjuk. A felülúszóban lévő hisztamint fluorometriásan, ortoftálaldehides módszerrel hatá- ^ q rozzuk meg. Eredményeinket a 7. táblázatban ismertetjük. 7, Táblázat Hasüregi hízósejtekből felszabadult hisztamin ) 5 mennyisége (A kontroll értéke 100) Vegyület 10'6 10'5 10'4 (mól/1) 10‘3 Tranilast 95 95 67 29 11. 55 51 59 13 52. 70 68 60 21 A DNP-Ascaris antigén végkoncentrációja 20 /ag/ /ml. A 11. és 52. vegyület még alacsony, 10-6 mól/1 koncentrációban alkalmazva is gátolja a hisztamin felszabadulását hízósejtből. A vizsgált ÍO^-IO'3 mól/1 koncentrációtartományban a 11. és 52. vegyület nagyobb gátló hatást fejt ki, mint a kontrollként használt Tranilast. 7. Vizsgálati példa Tengerimalac passzív szisztémás anaphylaxiáját (PSA) megelőző hatás Tengerimalacokon vizsgáljuk a találmány szerint előállított vegyületek passzív szisztémás anaphylaxia okozta halált megelőző hatását. A vizsgálati eljárás a következő: Normál Hartley törzsbeli, 240-260 g testtömegű nőstény tengerimalacokat anti-ovalbumin nyúlszérum intravénás beadásával szenzítizálunk. All. számú vegyületet 200 mg/kg dózisban perorálisan beadjuk. Egy óra múlva intravénásán beadunk 0,05 ml fiziológiás sóoldatban oldott 2% ovalbumin antigént. Ezután az állat állapotát figyelemmel kísérjük, és mérjük a halál bekövetkeztéig eltelt időt. Hasonló módon kezeljük a kontroll csoportot, de a 11. számú vegyület helyett fiziológiás sóoldatot adunk perorálisan. Eredményeinket a 8. táblázatban ismertetjük. Mint a táblázatból látható a 11. vegyülettel kezelt állatok átlagos túlélési ideje az ovalbumin antigén beadástól számított 441,7 s, míg a kontroll csoporté csak 294,9 s. Ebből látható, hogy all. vegyület anti-PSA aktivitása statisztikusan szignifikáns. 8. Táblázat Vegyület Dózis Beadás N Az elpusztulásig eltelt idő (s) Átlagos idő a A túlélési (mg/kg) módja pusztulásig idő meg(ÁtlagiS.E) hosszab__________________________ bodása % Kontroll po. 10 236 311 245 251 302 315 237 374 312 366 294,90116,2 11. 200 po . 10 431 492 548 431 488 485 475 352. 367 348 441,70121,5* Megjegyzés: ér jelentése p <0,01 8. Vizsgálati példa Akut toxicitás Az LDjo értékek meghatározására ddy törzsbe 50 tartozó hím egereket és Wistar törzsbe tartozó patkányokat használunk. Vizsgálati módszer: A vizsgálandó minták szuszpenzióját vagy oldatát a szokásos módon beadjuk az állatoknak. Az ezt kö- ec vetően egy héten belül elpusztult állatok számából öö Probit módszerrel kapjuk az LDS0 értékeket. Eredményeinket a 9. táblázatban ismertetjük. 9. Táblázat LD5 o értékek (mg/kg testtömeg) Vegyület Egér p.o. I.v. Patkány 11. 10000< 343,8 10000< 20. 10000< 224,9 lOOtHK 24. 10000< 274,8 _ 30. 8381 257,7 _ 14. 10000< 299,1-23
