196128. lajstromszámú szabadalom • Eljárás epe helyettesítő, zsíremésztést elősegítő készítmények előállítására
1 2 leti sorozaton belül azonos nemű, 2500—3000 g tömegű nyulakat használtunk, a műtéteket egyidőben végeztük. Kontrollként ál-műtött állatok szolgáltak. A choledocus ligaturât nembutal-éter narkózisban, median laparatomia után végeztük. Ezzel egyidejűleg az epehólyagot steril körülmények között pungáltuk (elkerülendő a ligatura utáni epehólyag rupturát). A sebszélek zárásával egyidejűleg antibiotikumot használtunk. A műtött kísérleti állatokat 48 óra múlva alkalmaztuk a kísérletekhez. A vizsgált anyagokat az állatoknak orálisan, gyomorszondán keresztül adtuk be. A vérvétel a v. auricurális marginálisból történt. Az első kísérletsorozatban az állatoknak 3 ml napraforgó olajat vagy 3 ml napraforgó olajat és 3 ml vízben oldott 200 mg DIMEB-et adtunk be. A kontroll (álműtött) állatok 6 ml vizet kaptak. A IV. táblázat adatai szerint epesavak hiányában és lipáz jelenlétében a lipidek emésztése igen lassú, mivel számottevően nem fokozódott a plazma triglicerid koncentrációja a 6 órás kísérleti periódus alatt. Azon csoport, mely az étolaj adásával egyidejűleg DIMEB-et is kapott, már az első órától kezdve szembetűnően és szignifikáns triglícerid-szint emelkedést mutatott. A 6. órában a csak étolajjal kezelt csoportban 45,30± ±10,83 mg/100 ml triglicerid koncentrációt mértünk a plazmában, míg a zsír+DIMEB-el kezelt csoportnál ez az érték csaknem a háromszorosára 125,63±3,14 mg/100 ml-re emelkedett. Ismeretes, hogy a zsírok emésztése lassúbb folyamat, mint az olajoké. Ezért a második kísérletben choledochus ligáit nyulakon 5 ml sertészsír, vagy 5 ml sertészsír ♦ 300 mg DIMEB orális bevitele után követtük a plazma triglicerid koncentráció változásait (V. táblázat) (Kontroll: 6 ml víz). Már a kezelést követő 1 óra elteltével mintegy 100%-al emelkedett a triglicerid mennyisége, a másik két csoporthoz viszonyítva. Ez a tendencia a 6 órás kísérleti idő alatt permanensen megmaradt. Minden időpontban mért érték szignifikánsan magasabb, mint a másik két csoportnál. E kísérleti sorozat egyértelmű bizonyítékot adott arra, hogy a DIMEB szignifikánsan képes elősegíteni a trigliceridek felszívódását acut kísérletes epesav-hiányban, azaz helyettesíti a természetes epét. Elősegíti a lipidek diszpergálását, a lipáz emésztő funkcióját, és a felszabaduló zsírsavak abszorpcióját. IV. táblázat Choledochus ligatura utáni kezelés hatása nyulak plazma triglicerid koncentrációjára, mg/ 1100 ml-ben. (Kezelés: 3 ml napraforgó olaj, illetve 3 ml napraforgó olaj ♦ 200 mg DIMEB). Kontroll: 6 ml víz. abszolút kontroll: 51,0± 12,82 mg/100 ml 0 órás műtött kontroll: 49,03±16,57 mg/100 ml Álműtött kontroll Olaj Olaj+DIMEB 0 óra 36± 7 46± 5 51 ± 19 1 óra 34± 5 57±10 96±32 2,5óra 30± 5 47±10 87±30 4 óra 46±10 40± 6 61 ±14 6 óra 70± 6 45±10 125± 3 V. táblázat Choledochus utáni kezelés hatása nyulak plazma triglicerid koncentrációjára, mg/100 ml-ben (kezelés: 5 ml sertészsír, illetve 5 ml sertészsír'- 300 mg DIMEB) Kontroll: 6 ml víz Kontroll Zsír Zsír+DIMEB 0 óra 49±14 46± 5 58±19 1 óra 34± 5 57±10 104+30 2,Sóra 30± 5 47±10 92+26 4 óra 46±10 40± 6 83±25 6 órá 70± 6 45±10 125± 3 8. példa Az epe helyettesítése patkányokban A kísérleti patkányokat (Etymis rattus var. albino) a kísérlet előtt 10 nappal standard tápon tartótvuiuv, mvij'uvív ujijíiviviwiv, nyersfehéije 19,6% nyersrost 5,6% oldható szénhidrát 49,2% zsír 4,6% vitamin-keverék 1,0% 100 g ilyen tápszer energiatartalma 1382 Joule. Az első kísérletsorozatban a plazma totállipid kocentrációját vizsgáltuk epe-hiányos patkányokban. A choledochus-ligaturát éter-narcozisban hoztuk létre. A műtét után 48 óra elteltével 1,5 ml sertés zsírt, vagy 1,5 ml sertészsírt + 75 mg DIMEB-et yittünk be oráüsan. 4,5 óra múlva az állatokat dekapitáltuk és a plazma totállipid koncentrációját meghatároztuk. (A totállipid meghatározása de La Huerga et al: Amer. J. Clin. Pathol. 23, 1163 /1953/ szerint történt.) A VI. táblázat adatai szerint a ligatura után nem változott jelentősen a totállipid koncentráció. A csak zsírral kezelt epevezeték-ligaturás állatokban az előző csoporthoz és a kontrolihoz viszonyítva is szignifikáns totállipid koncentráció fokozódást tapasztaltunk. Mindhárom állatcsoporthoz viszonyítva nagyon jelentős és erősen szignifikáns totállipid koncentráció emelkedést figyeltünk meg a zsír + DIMEB- el kezelt állatcsoportban. Míg a zsírt kapottak esetében 2,5-szeresére, addig a zár + DIMEB kezeiteknél 5-szörösére emelkedett a totállipid frakció a vérplazmában. Egy másik kísérletsorozatban vizsgáltuk az epe-hiányos patkányok által ürített faeces totállipid tartalmát. 72 órával a ligatura létesítése után kezdtük meg az orális kezelést 1 ml sertészsír, illetve 1 ml sertészsír + + 150 mg DIMEB nap mennyiségekkel 5 napon keresztül. A faecest a kezelés első 4 napjában összegyűjtöttük. Az 5. napi kezelés után 4 órával későbbi kísérleti állatokat dekapitáltuk, mintáikat feldolgoztuk. A VII. táblázatban a 4 nap alatt a faecesben kiürült lipid mennyiségek változásait látjuk. Az intakt és standard módon táplált kontroll patkányokhoz viszonyítva a hasonló módon táplált, de epevezeték-ligatúrával ellátott állatok faecesében szignifikánsan magasabb az ürülő lipid koncentrációja. A zsírral táplált állatok faecesében rendkívül sok lipid ürül, A lipid-ürülést azonban dramatikusan csökkenti a 150 196 128 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
