196128. lajstromszámú szabadalom • Eljárás epe helyettesítő, zsíremésztést elősegítő készítmények előállítására
1 2 1. táblázat In vitro enzimes triglicerid hidrolízis epe vagy DIMEB jelenlétében Reakcióidő Fogyott 0,005 N NaOH ml óra I. epe: 5x hígított sertésepe, szubsztrát: olívaolaj, enzim: pankreász szuszpenzió a. (epe) b. (DIMEB) c. (kontroll) 0,5 0,82 1,74 0,0 1 1,17 2,00 0,36 2 1,37 2,20 0,48 19 2,62 4,77 0,63 reakcióseb. növekedése 4x 7,4x II. epe: csirkeepe lOx hígítva, szubsztrát: glicerin-trioleát, enzim: lipáz a. (epe) b. (DIMEB) c. (kontroll) 1 0,20 0,34 0,0 2 0,32 0,80 0 3 0,48 1,16 0 21 0,58 1,86 0,1 reakcióseb. növekedése 6x 18x III epe: csirkeepe 5x hígítva, szubsztrát: glicerin-trioleát, enzim: lipáz a. (epe) b. (DIMEB) c. (kontroll) 1 0,26 0,28 0 2 0,46 0,68 0 4 0,74 1,20 0,14 reakcióseb. növekedése 5x 8,5x 6. példa Lipid felszívódás fokozása DIMEB per os alkalmazásával intakt patkányokon Intakt patkányokon vizsgáltuk a DIMEB hatását étolaj felszívódására. A kísérlet célja annak tisztázása volt, hogy fiziológiás epe-funkciók mellett a DIMEB stimulálja-e az étolaj emulgeálását és intestinális abszorpcióját A kísérleti állatoknak egyidejűleg adtunk be orális úton (gyomorszondával (2 ml naprafogó-étolajat) és 50 mg DIMEB-et. Ezután különböző időpontokban vizsgáltuk a vérplazma triglicerid és szabad zsírsav koncentrációját (II. és III. táblázat). A kezelést követő első órában a kontroll és a kezelt csoportok plazma-triglicerid szintjei (II. táblázat) között nincs szignifikáns különbség. A 4. órában a kontroll és az olajjal kezelt csoportok triglicerid koncentrációja között még nincs szignifikáns eltérés jelezvén azt, hogy az emésztés folyamata még zajlik, de az olaj+DIMEB-el kezelt állatcsoporthoz viszonyítva is szignifikánsan nagyobb plazma triglicerid koncentráció figyelhető meg. A 4. órára a DIMEB alkalmazása több, mint 100%-al emeli a plazma triglicerid koncentrációját. A 6. órában már az olajjal kezelt állatok plazma triglicerid szintje is szignifikánsan emelkedik a kontrolihoz viszonyítva, de ez az érték még mindig szignifikánsan alacsonyabb, mint az olaj* +DIMEB-el kezelt csoportban. Hasonló tendenciák figyelhetők meg a szabad zsírsav tekintetében is (III. táblázat). A plazma triglicerid koncentrációját Van Handel (Van Handel E. 1961. Clin. Chem. 7, 249-251.) szerint, a szabad zsírsav koncentrációját pedig Dumcombe (Dumcombe W. G. 1963. Biochem. J. 88, 7—10.) szerint határoztuk meg. II, táblázat Normál patkányok plazma triglicerid koncentrációja mg/100 ml-ben kifejezve (kezelés: 2 ml étolaj, illetve 2 ml étolaj* *50 mg DIMEB) Kontroll Olaj 01aj*DIMEB 0 óra 1 óra 49±12 43+ 8 44± 6 2,5óra 72±18 61 + 18 4 óra 58+11 121 ± 7 6 óra 88± 5 122±15 III. táblázat Normál patkányok plazmájának szabad zsírsav koncentrációja mg/100 ml-ben kifejezve (kezelés: 2 ml étolaj, illetve 2 ml étolaj* *50 mg DIMEB) Kontroll Olaj 01aj*DIMEB 0 óra 1 óra 97±36 240+ 70 326+ 15 2,5óra 412+146 4941183 4 óra 318+ 93 64U126 6 óra 412± 88 347+ 65 Az ismertetett kísérleti eredmények azt bizonyítják, hogy a DIMEB hatékonyan fokozza a trigliceridek formájában a bélbe juttatott lipidek felszívódását egészséges, intakt állatokon is. 7. példa Az epe helyettesítése nyulakon Nyulakon az epe vezeték lekötésével (choledochus ligatura) tanulmányozni tudjuk azt, hogy normális pankreász elválasztás esetén hogyan pótolható az epe. A kísérleti nyulakat (Orychtolagus cuniculus) a kísérlet előtt 10 napon át standard tápon tartottuk, melynek szerves anyagösszetétele a következő volt: nyersfehéije 16,0% oldható szénhidrát 42,7% nyersrost 12,6% nyerszsír 7,3% vitaminkeverék 1,0% 100 g tápszer energiatartalma 1360 Joule volt. Az állatokat az operatív beavatkozások előtt 12—24 órán át éheztettük, vizet ad libitum kaptak. Egy kísér-196,128 5 10 ’•5 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
