196071. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbapeném vegyületek és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 Táblázat Mikroorganizmus 2. A vegyület sorszáma 9. 12. 16. 20. Staphylococcus aureus 209P 0,02 0,01 0,05 0,01 0,01 Staphylococcus aureus 56 0,05 0,1 02 0,05 0,05 Escherichia coli NIHJ 0,02 0,1 0,1 02 0,1 Escherichia coli 609 0,02 02 02 0,4 02 Shigella flexneri 2a 0,05 Klebsiella pneumoniae 806 0,05 0,1 02 02 02 Klebsiella sp. 846 0,02 02 02 02 v 0,1 Proteus vulgaris 0,8 0,8 0,4 3,1 1,5 Salmonella enteritidis G 0,05 02 02 Morganella 'morganii 1510 0,8 1,5 1,5 6,2 3,1 Serratia marcescens IAM 1184 0,05 0,4 0,4 3,1 02 Vizsgáltuk továbbá a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek renális toxicitását. A kísérleti állatok mintegy 3 kg súlyú nyulak voltak. A vizsgált vegyületeket vizes diszperzió formájában használtuk. A vizsgált vegyületek tehát az ismert antibiotikum, az Imi pen em és a találmány szerinti 2. vegyület (a korábban megadott izomer) voltak. A nyulakat két csoportra osztottuk, az egyik a 4 nyúlból álló csoportnak 75 jug/ml dózisban Imipenem-et adtunk be a fülvénába való injektálással. A másik, 5 nyúlból álló csoportnak hasonló módon 150 Atg/ml dózisban a 2. vegyületet adtuk be. Egy hét elteltével mindkét csoportbeli nyulak veséjét kimetszettük és megvizsgáltuk. Az Impenemmel kezelt csoport esetében megfigyelhető volt a vesekéreg régiójában a proximális vesecsövecskék jelentés mértékű degeneratív nekrózisa mind a négy nyúlnál. Ugyanakkor a 2. vegyülettel kezelt csoportba tartozó öt nyúl mindegyikénél sem mutatkozott semmiféle jele a csövecskék nekrózisának. Ezek az eredmények demonstrálják, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyiileteknek csökkent mértékű a renális toxicitásuk az ismert vegyületekhez képest, ugyanakkor kiváló antibakteriális hatásúak. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeket patogén mikroorganizmusok által embernél és más élőlényeknél kiváltott betegségek kezelése céljából orálisan vagy párénterálísan adhatjuk be, bármely hagyományos gyógyászati készítmény formájában. Így például az orális beadás céljából alkalmas készítmények közé tartoznak a tabletták, granulák, kapszulák, porok és szirupok, míg a parenterális beadásra alkalmasak közé tartoznak a szubkután vagy intravénás injektálással alkalmazható injekciós oldatok. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek dózisa többek között a paciens korától, testsúlyától és állapotától, továbbá a beadás módjától és időpontjától függ, rendszerint azonban naponta felnőttnek 200-3000 mg adható be egyszerre vagy több alkalommal. -> A találmányt közelebbről a következő kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. 1. példa a) (5R,6S)-6-[l(6>Hidroxi-etil]-2- (2S,4S>2- -karbamoil-l-[N-(4-nitro-benzil-oxi-karbonil)--acetimidoil ]-pirrolídin 441-tio -2 -karbapenem-3 - -karbonsav-4-nitro-benzilészter 303 mg (5R,oS>6-[l(R)-hidroxi-etil]-2-oxo-karbapenam-3-karbonsav4-nitro-benzilészter 5 ml acetonitrillel készült oldatához jeges hűtés közben nitrogénatmoszférában hozzáadunk 0,182 ml diizopropil-etil-amint és 0,212 ml difenil-foszforil-kloridot, majd az így kapott reakcióelegyet ugyanezen a hőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyhez hozzáadjuk 0,182 ml diizopropil-amin és 320 mg (2S,4S)-l-[N-(4-nitro-benzil-oxi-karbonil)-acetimidoil]-2-karbamoil4-merkapto-pirrolidin 10 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát és ezután az egész reakcióelegyet további 2 órán át keverjük. A reakcióelegyet ezt követően etil-acetáttal hígítjuk, vízzel és telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. így 195 mg mennyiségben a lépés címadó vegyületét kapjuk. NMR-spektrum (90 MHz, DCONfCDs^) 6 ppm: 1,25 (3H,J= 6Hz), 1,7—2,4 (2H),2,13 és 2,33 (együtt 3H, mindegyik), 2,4-4,8 (12H), 5,25 (2H), 5,35 és 5,47 (2H, AB, J= 15Hz), 7,72 és 8,30 (4H, 2AB, J= = 8 Hz). IR-spektrum (KBr) 7maxcm 1: 3400, 1778,1680. b) (5R,6S)-6-[l<R)-Mdroxi-etfl]-2-[(2S,4S>2- -karbamoil-1 -acetimiddl-pirrolidin4-jl-tio]-2--karbapenem-3-karbonsav (2.vegyület) 193 mg, a fenti a) részben ismertetett módon előállított (5R,6S)-6-[l(R)-hidroxi-etil]-2- (2S,4S>24carbamoil-l-[N-(4-nitro-benzil-oxi-karbonil)-acetimidoil]-pirrolidin441-tio -2-karbapenem-3 karbonsav4-nitro-benzilészter 10 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához 10 ml vizet és 400 mg 10 tömeg% fémtartalmú szénhordozós palládiumkatalizátort adunk, majd az így kapott reakcióelegyet hidrogénatmoszférában 2 órán át keverjük. Ezt követően a katalizátort a szűrle tből kiszűrjük, a tetrahidrofúránt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk és a maradékot etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist ezután csökkentett nyomáson végzett bepáriással mintegy 15 ml térfogatra betöményítjuk, majd a Mitsubishi Chemical Industries Ltd. japán cég által Diaion CHP-20P márkanévéi forgalmazott gyantából álló oszlopon kromatografálásnak vetjük alá. Az eluálást vízzel végezzük. így 24 mg rnenynyiségben a lépés címadó vegyületét kapjuk. NMR-spektrum (90 MHz, D20) 5 ppm: 1,10 (3H, J= 6Hz), 2,06 és 2,18 (együtt 3H, mindegyik), 1,66 — —2,4(211), 2,43-426 (12H). UV-spektrum (1I20) X,naxnm'(E): 298,5 (8660). IR-spektrum (KBr) 7m? ..cm'1:3400. 1760, 1690. 196.071 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 C>0 7
