195855. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tumorellenes hatású LL-E33288 jelű antibiotikum-komplex és komponensei előállítására

18

195855

19

nálásával végrehajtott fermentációs eljárásokra is kiterjed.

Az LL-E33288 komponensek in vitro antibakteriális aktivitását a Gramm-pozitiv és Gramm-negaliv baktériumok spektruma ellen, standard agar-hígitásos módszerekkel határozzuk meg. Az antibiotikumok felére csökkenő koncentrációit tartalmazó hígítási-sort (Mueller-Hinton) Petri-csészékbe öntünk. Az

agar-felületeket megfelelő berendezés segítségével 1-5 10* telepképző baktériumegységgel beoltjuk. Minimális gátló koncentrációnak (MIC) a törzs azon legkisebb koncent- 5 rációját tekintjük, amely a baktérium növekedését kb. 35 °C-on kb. 18 órán ót végzett inkuhálás után gátolja. A kapott eredményeke!. a III. táblázatban foglaljuk össze.

11 f. Táblázni

LL-E33288

komponensek

in vitro

an ti bakteriális a ktivi tása

Mikrooraganizmus

Minimális gátló ßr-llr ßi-J

koncentráció,

■Ji-Br

mcg/ml

7i-J

Escherichia coli

CMC 8-1-11

0.25

0.50

0.50

0.25

it ft

No. 311-(MP)

0.12

0.25

0.25

0.25

it »I

ATTC 25922

0.12

0.25

0.25

0.25

Klebsiella pneumoniae

CMC 84-5

0.25

0.50

0.50

0.25

it n

AD (MP)

0.12

0.50

0.50

0.25

Enterobacter cloacae

CMC 84-4

0.5

0.50

0.50

0.50

” aerogenes

10 83-44

0.25

0.25

0.50

0.50

Serratia marcescens

CMC 83-27

0.12

0.25

0.50

0.25

it »1

F35 (MP)

0.12

0.50

0.25

0.12

Morganeiia morganii

10 83-18

0.5

1

0.50

0.25

Providencia stuartii

CMC 83-82

0.25

0.50

1

0.25

Citrobacter diversus

K 82-84

0.12

0.50

0.50

0.25

’’ freundii

10 83-13

0.12

0.25

0.25

0.12

Ac inetobacter sp.

CMC 83-89

0.06

0.25

0.25

0.12

” sp.

10 83-49

0.12

0.25

0.25

0.06

Hl. Táblázat (fa

yt alásaj

Minimális gátló

conc.entráció,

mcg/ml

Organizmus

Ü í-Br

/Ji-J

•Ji-Br

7i-J

Pseudomonas aeruginosa

12-4-4 (MP)

0.5

0.50

1

0.25

it ) i

ATCC 27853

0.25

0.25

0.50

0.12

Staphylococcus aureus

Smith

SO.0025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

it 1 i

SSC 82-31

SO.00025

SO.000031

SO.000031

S0.000031

11 1 J

ATCC 25923

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

it J J

SSC 82-20

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

1» 1)

SSC 82-26

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

if U

SSC 82-24

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

it ti

SSc 82-57

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

Staphylococcus epidermidis

CMC-83-133

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

n it

ATCC 12228

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

Enterococcus sp.

CMC 83-53

0.0038

0.031

0.062

0.0078

Streptococcus faecalis

ATCC 29212

SO.00025

0.00012

SO.000031

0.00012

Micrococcus luteus

PCI 1001

SO.00025

SO.000031

SO.000031

SO.000031

Bacillus subtilis

ATCC

SO.00025

SO.000031

SO.000031

sO.000031

Az anti-neoplasztikus hatás vizsgálatára a National Cancer Institute bizonyos in vivo teszt-módszereket dolgozott ki, amelyeket a „Cancer Chemotherapy Reports" III. rész, 3. kötet, 2. sz. (1972) helyen közöltek (Geran és tsai). A fenti jegyzetek alapján standard screenelési módszereket dolgoztak ki, amelyeket a tumorellenes szerek kipróbálása te- G0 rén általánosan alkalmaznak. A fenti módszerek közül találmányunk szempontjából a limfooita leukémia P388, melanotikus melanoma RÍ6, L1210 leukémia és colon 26 adenocarcinoma különösen jelentős. A fenti neoplazmá- G5 kát transzplantá Iható tumorok tesztelésére

11