195855. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tumorellenes hatású LL-E33288 jelű antibiotikum-komplex és komponensei előállítására
14 195855 15 Dekarboxilezés Sav-Növekedés NRRL-J5839 fiziológiai reakció 5% Náci Lizozim táptalaj Acetát Benzoát Citrát Laktat Malát Mucát Oxalát Propionat Piruvát Szűkeiét Tartarát Adonit-ból Arabinóz-ból Cellobióz-ból Dextrin-bői Dulcit-ból Eritritből Fruktózból Galaktózból Glükózból Glicerinből Inozitból Laktózból Maltózból Mannitból Mannózból a-metil-D~glü Rozidból Melibiózbó) Raffinózból Ramnózból Szalicinböl Szorbitból Szaccharinbói Trehalózból Xilózból ß-metil-D-xilozidboi 10° 42ü 45° + - pozitív, - - negativ, V = változó, Gy - gyenge.-t+ + + + + + V + + + + + + + + + + + Az LL-E33288-R66, NRRL—15975 mutáns 50 A fermentáció termelésének javítása céljából az LL-E33288 erdeti tenyészetét (NRRL-15839) lemezen tenyésztjük és 50 db különálló telepet izolálunk. Ezeket NS1-NS50 jelöléssel látjuk el (NS=természetes szelekció,„natural selection”). A fenti izolált törzsekkel végzett fermentációk tanúsága szerint a közepes spóraképződést mutató törzsek általában jobb LL-E33288 komplex termelést adnak. E csoport GO reprezentatív képviselője az izolált NS6 törzs. Az izolált NS6 törzset kiindulási tenyészetként alkalmazva spóra-szuszpenziókat készítünk és ezeket különböző mutagén 05 ágensekkel kezeljük. Nitrozo-guaninides kezelés után különálló telepeket izoláltunk, ezek azonban nem mutattak számottevően jobb LL-E33288 komplex termelést. UV besugárzás után különálló telepeket izolálva azt találtuk, hogy az UV 610 jelű telep magas 55 termelőképességű mutáns. Az izolált UV 610 mutánsból nyertük az 1-7. sz. a!-izolátumokat. A további kísérletekhez az UV 610(3) jelű al-izolátumokat alkalmazzuk. Az LL-E33288 komplex rendkívül erős baktériumellenes és antineoplasztikus tulajdonságai miatt lehetséges, hogy bizonyos antibiotikum-hatér-koncentráció elérése után a bioszintetizált antibiotikum a termelő törzsre toxikus) gátló hatást fejt ki. Ezért megkisé-9
