195667. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nitro-antraciklin-származékok előállítására
1 l‘>5 667 1.5 g nátrium-formiátot 15 ml vízben oldunk és az előbbi rcakcióclegyhcz adjuk, a szobahőmérsékletről 50 °C-ra emeljük a hőmérsékletet, és ezt fenntartjuk 24 óra hosszat. A rcakcioelegyhcz n;itrium-hidrogén-karbonát telített viz.es oldatát adjuk, míg a pH bázikussá válik, majd az elegyet szcn-dikioriddal extraháljuk. A szerves réteget nátrium-szulfát felett szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. A nyers terméket szilikagél oszlopon kromatografálva tisztítjuk, ciuálószerként CH2Cl2/MeOH/AcOH (160:20:8) elegyel alkalmazva. A tiszta frakciókat öszszegyűjtjük, vizes telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, majd vízzel semlegességig, végül a terméket cxtraháljuk, víz és 0,1 N sósav-oldat eleggyel, míg pH-ja kb. 3 lesz. A vizes oldatot liofilizálva 0,17 g 4-demetoxi-ll-dezoxi-11-nitro-doxorubicin hidrokloridot kapunk (47%-os kitennelés). IR-spektmm (KBr): 3400, 2900, 1710, 1670, 1635, 1590, 1540 cm"1. Tömegspektrum: m/z 543 (MH+). UV-spektrum és látható spektmin (MeOH) lambdamax : 208, 222, 256, 402 mn. Rf (F254 Merck szilikagél lemezt használva; CH2Cl2 /McOH/AcOH/HjO 80:20:73) = 0,407. A találmány szerinti eljárással előállított (A') általános képletíí antraciklin-glikozidot, vagy annak gyógyászatiig elfogadható sóját gyógyászati készítmények hatóanyagaként alkalmazhatják, gyógyászatiig elfogadható hígító- vagy hordozóanyagokkal keverve. Az (A') általános képletíí vegy iilet vagy sója terápiásán hatásos mennyisége inert hordozó- vagy hígítószerrel kombinálható. Az (A') általános képletíí vegyületek és sóik értékes hatóanyagok ember- és állatok terápiás kezelésében. Lzck elsősorban tmnorellenes hatású szerek, a kezelt személynek terápiásán hatékony mennyiségben adagolva. A 6. példa szerinti és 4. példa szerinti vegyületek biológiai hatékonysága A fenti vegyül eteket daunorubicinnel (DNR) öszszehasoniitva, in vilro vizsgáltuk HeLa ésP388 sejtekkel szemben. A vegyületek hidrokloridjaikként, vízben oldva vizsgáltuk. A 6. példa szerinti vegyület in vivo hatását P388 ascites leukémia ellen az 1. táblázat mutatja. A 6. és 4. példa szerinti vegyületek hatását disseminált Cross leukémia ellen vizsgáltuk. Az eredményeket a 2. táblázat mutatja. Ebben a rendszerben a két új vegyüld a legnagyobb vizsgált dózisban (22,5 mg/kg 6. példa szerinti vegyidet, illetve 50 mg/kg 4. példa szerinti vegyület) hatékonyabb volt, mint a DNR a maximális tolerálható dózisban (10 mg/kg). 2 1. Táblázat Hatás P3SS ascites leukémia ellen Vegyület Dózis b) T/C%c> Toxicitás (elhullás) DNR 2,9 152 1/10 4,4 157 5/10 6. példa szerinti 4 152 0/10 vegyület 6 162 0/10 9 171 1/10 13,5 124 9/10 a) ’ = A kísérletet CDF, egereken végeztük, melyeket intraperitoneálísan 106 leukémia sejttel inokuláltunk. k) = Intraperitoneális kezelés egy nappal a tumor-inokulálás után. c) = Kezelt egerek átalagos túlélési ideje/kontroll egerek átlagos túlélési ideje x 100. ^ = Autoptikus megfigyelések alapján tett értékelés. 2. Táblázat Hatás Gross leukémia ellen Vegyület Dózis b) T/C% c) Toxicitás (elhullás) ^ DNR 10 158.150 0/20 15 175.225 3/20 6. példa szerinti 10 125 0/10 vegyület 15 150 0/10 22,5 200 0/10 4. példa szerinti 25 175 0/10 vegyület 50 208 0/10 = (A kísérletet C3H egereken végeztük, melyeket intravénásán 2 x 106 leukémia sejttel inokuláltunk. = Intravénás kezelés egy nappal a tumor-inokulálás után. c) = Kezelt egerek átlagos túlélési ideje/kontroll egerek átlagos túlélési ideje x 100. ^ = Autoptikus megfigyelések alapján tett értékelés. 3. Táblázat ín vitro aktivitás HeLa sejtekkel és Lo Vo sejtekkel szemben___________________________________________ ID 50 (ng/ml) HeLa1 _LoYo DX 19 DX 36 8. példa szerinti 7. példa szerinti vegyület 18 vegyület '220 1 Telep-gátló vizsgálat 24 órás kezelés után végezve. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
