195658. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diszulfidcsopotot tartalmazó, szubsztituált 7-oxi-mitozánok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 195 658 2 tot és 150 nil dioxánt mérünk egymás után. A reagensek fenti sorrendben való beadagolása után 6 ml telített vizes nátrium-karbonát-oldatot, 10 g t"*rt jeget adunk a lombikba. A lombikot jeges fürdővel lehűtjük és a benne található elcgyet mechanikusan keveijük. Ezután a csepegtetőtölcsérből egy óra alatt a diazóniumsó-oldatot a reakcióelegyhez adagoljuk. A beadagolás befejeződése után a rekcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni és 3x400 ml éterrel extraháljuk. Az extraktuinot megszárítjuk és bepároljuk, és a kívánt tennéket kromatográfiásan alumíniumoXidon, 2,5 átmérőjű és 25 cm hosszúságú oszlopon hexán-diklór-metán (4: 1), hexán-diklór-metán (3:2), hexán-dildór-metán (1:4) és végül 1% metanoltartalmú diklór-metán-eluenst alkalmazva tisztítjuk. A megfelelő, vékonyrétcgkromatográfíás módszer segítségével azonosított frakciókat egyesítjük, és bepároljuk, így 2,5 g cím szerinti terméket kapunk. 2. előállítás 9a-Metoxi- 7-[2-/3-nitro-2-pirídil-ditio/-etoxi }-mi tozán 580 mg (1,73 mrnól) 7-hidroxi-9a-meíoxi-nütozánt gömblombikban 60 ml diklór-metánban oldunk és körülbelül 2,5 g (5,7 nimói) az 1. előállításban előállított triazént adunk hozzá, majd az clcgyct 5 °C-on 14.órán át és ezután szobahőmérsékleten 8 órán át keverjük. A reakció előrehaladását - vékonyrétegkromatografálás segítségével diklór-metanol (9:1) elucnst alkalmazva szilikagéten követjük. A reakcióelegyet további 26 órán át szobahőmérsékleten tartjuk, majd oszlopkromatográfiás mf ;zer segítségével 0,85 cm átmérőjű, 31 cm hosszúságú oszlopon, alomínium-oxidon tisztítjuk. A kromatografálás során 200—200 ml diklór-metán; 0,5% metanoltartalmú diklór-metán; 2% mctanoltartalmú diklór-metán; és 4% metanoltartalmú diklór-metán-eluenst alkalmazunk. A megfelelő frakciókat bcpároljuk és 470 mg kívánt terméket kapunk. Elemanalízis a C22H2 3N5 08S2 képlet alapján: Számított: C45,65; 114*09; N 11,82 (0,5 mój% CH2C12-re korrigált); Mért: C 45,74; II4,14; Ni 1,61. IR(KBr), max., cm-1 3440-3200, 3060, 2930, 1720, 1570, 1510, 1395, 1335, 1210, 1055. NMR(pindin-d5 5): 1,81 (s, 3H), 2,00 (sz s, 1H), 2,61 (sz s, 1H), 2,98 (sz s, 1H), 3,08 (s, 3H), 3,20 (m, 2H), 3,39 (d, 1H),3,83 (dd, 1H), 3,07 (d, 1H), 4,594,89 (m. 3H) 5,21 (dd, 1H), 7,16 (dd, 111), 8,31 (dd, 1H), 8,71 (dd, III), Az k és 2. előállítások eljárásai szerint mas to (3 íiitro-2-piridil-ditio)-alkil-aminokat, amelyek alkilcsoportjának szénatomszáma 3 vagy 4 lehet, alkalmazva, az (Ib) általános képletű mitozán-származékokat állítjuk elő. 1-14. példa A III. táblázatban leírt 1—14. példák szerinti (la) általános képletű vegyületeket az alábbiakban leírt A. vagy B. általános eljárás szerint állítjuk.elő. Az 1-14. példákban előállított mitozámok fizikai adatai az ezt követő IV. táblázatban adjuk meg. ( A. eljárás A 2. előállításban előállított, körülbelül 0,1 mmól mitozán 3—5 ml acetonban készített, oxigénmentesített oldatához keverés közben argon-atmoszférában körülbelül 1,1 ekvivalens trietil-amint és ezt követően cseppenként, vagy adagonként 1 ekvivalens merkaptána 1-2 ml acetonban készült oldatát adjuk. A legtöbb esetben15 a reakció előrehaladását szilikagélen (10% metanoltartalmú diklór-metán-eluens) vékonyrétegkromatografálás segítségével követjük. A reakció befejeződését a kiindulási anyag foltjának eltűnése és a tennék foltjának megjelenése mutatja. A befejeződés után a reakcióelegyet vákuumban (körülbelül 30 °C-on) bepároljuk és a maradékot Woelm semleges aluinínium-oxid oszlopon (0,63 cm x x 25 cm), 2-5% metanolt tartalmazó diklór-metán-elucns alkalmazásával kromatografáljuk. Az eljárással a mitozán-termék elválasztható a piridil-tion-mclléktennéktől, amely az oszlopon marad. A 2-5% meíanoltartalmú diklór-metánnal eluált terméket továbbtisztítjuk gyorskromatográfiás módszer segítségével, szilikagélen 5-7% mctanoltartalmú diklór-metán-eluens alkalmazásával. A fo tennéket tartalmazó frakciókat izoláljuk és a kapott amorf (la) általános képletű mitozán szerkezetét analizáljuk. a) Amennyiben a kiindulási merkaptdn szennyezett, ekvivalensnél több tiol alkalmazása szükséges. b) Amennyiben a 2. előállítás kiindulási mitozánja és a termék Rf értéke igen közeli, a vékonyrétegkromatográfiás analízis helyett, nagynyomású folyadékkormatográfiás (Bondapak-Cj g oszlop) analízist alkalmazunk. B. eljárás A 2. előállításban előállított, körülbelül 1,0 mmól mitozán 2-5 ml acetonban készült oldatát3 10 ml metanollal elegyítjük és 6 csepp telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldathoz15 adjuk. Ezt követően 1 ekvivalens merkaptánc 10 ml metanolban készült oldatát adjuk az elegyhez. A reakció előrehaladását vékonyrétegkromatografálás (sztlikagél, 10% mctanoltartalmú diklór-metán) segítségével követjük. A reakció befejeződésekor a reakcióelegyet 15 ml vízzel hígítjuk és vákuumban körülbelül 30 °C-on 20 ml-re töményítjük. A kapott oldatot reverz-fázisú C—18 oszlopon lépésenkénti gradiens* -eluciót (1 OCf/rA víz —80% metanoltartalmú víz) alkalmazva kromatografáljuk. A terméket, mint nagy vörös sávot eluáljuk. A frakciókat egyesítjük és bepároljuk, amorf szilárd (la) általános képletű mitozánt kapunk. Amennyiben további tisztítás szükséges, a kromatográfiás lépést megismételjük. a) Diklór-metán is alkalmazható, de az aceton alkalmazása előnyös. b) Amennyiben a merkaptán L-cisztein, ezt a bázist nem alkalmazzuk. c) Amennyiben a kiindulási tiol vízoldható, vizet alkalmazunk. d) A vízzel való eluálás elválasztja a sárga piridil-tion-melléktemiéket a terméktől, ami az oszlopon marad. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
