195614. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fungicid készítmény előállítására
1 195 614 2 A találmány tárgya eljárás olyan fungicid készítmény előállítására, amely tőzegtartalmú talajon, ágyúsokban termesztett növények gombás megbetegedéseinek leküzdésére alkalmas. Ezidáig megpróbálkoztak az üvegbázban termesztett növényeknél a talaj fertőtlenítésével és cseréjével, különféle termesztési módszerekkel (pl. vetésforgó) és vegyszeres védekező eljárásokkal is. Mostanáig a biológiai védekezést alig alkalmazták a növényi betegségek vonatkozásában. Mindezek ellenére néhány fontos termesztett zöldségnövény, így például a saláta, az uborka és a paradicsom, pusztító, talajközvetítette betegségektől szenved, amelyeket a növényvédő kemikáliák használatának korlátozása és az esetleges szermaradványok miatti várakozási idők következtében vagy kellő hatékonyságú szerek hiányában eddig nem sikerült hatékonyan leküzdeni. Amennyiben valamiféle biológiai védekezési módszert sikerülne kidolgozni és alkalmazni az említett növényfajtáknál, az jelentős előrelépés lenne a termelő és a fogyasztó számára egyaránt. Régebbről ismert az eljárás a Streptomyces családba tartozó sugárgombák termelte antibiotikumoknak a kinyerésére és fungisztatikumként való felhasználására. Misaío, T.; Ko, K.; Yamaguchi, I., Use of antibiotics in agriculture, Adv. Appl. Microbiol. 21, 53-88 (1977). De az antibiotikumok hatása rövid ideig tartó és megszűnik, amint az antibiotikumot az élő szervezetek elfogyasztották. A találmány célja a fentiek értelmében olyan Streptomyces családba tartozó sugárgomba törzset tartalmazó készítmény előállítása, amely jól tenyészik a talajban és képes más talajlakó mikroorganizmusokkal versengve azokat elnyomni Azt tapasztaltuk, hogy a Streptomyces családba tartozó ATCC 39271, ATCC 39272 és ATCC 39273 jeiű új S. griseo viridis törzseket a talajba vagy a növényekre juttatva, mind a talajjal, mind a magvakkal terjesztett megbetegedéseket tartósan és hatékonyan leküzdhetjük. A talajban vagy a növényeken tenyésző, Streptomyces családba tartozó sugárgoinba törzseket, amelyek a találmány szerinti készítményben alkalmazhatók, megtalálhatjuk például a tőzegben és abból ismert módszerekkel izolálhatjuk is. A finn tőzegből (Sphagnum) izolált, a Streptomyces családba tartozó ATCC 39271, ATCC 38272, ATCC 39273 jelű (Streptomyces griseo viridis) sugárgomba törzseket (amelyeket az American Type Culture Collection, Rockville, USA intézetnél deponáltunk) vizes szuszpenzió formájában - például permetezés útján — juttathatjuk a talajba, illetve a növényzetre. Ebben az esetben a vizes szuszpenzió előnyösen mintegy 100 ezer spórát tartalmaz milliliterenként. A szuszpenzió koncentrációja azonban nem kritikus. A kipermetezett mennyiség célszerűen legalább 1 dl/m2. Másképpen úgy is eljárhatunk, hogy a magvakat merítjük bele kiültetés előtt a vizes szuszpenzióba. A Streptomyces családba tartozó sugárgomba törzsek vagy a magvakon levő kórokozók hatását gátolják, vagy egy fertőzött palántáról egy egészségesre való átterjedésüket akadályozzák. Ez a kedvező fungjsztatikus tulajdonság világosan megmutatkozik a növénybetegségek elleni biológiai védelem kapcsán, amikor a Streptomyces családba tartozó Aktinomiceta gombafajokat tartalmazó tőzeget adunk a találmány értelmében az előzőleg fertőtlenített talajhoz, ami által a talaj hasznos mikrobakészlettel gyarapodik. Az 1. és a 2. ábra jól mutatja ezt a fungisztatikus hatást. A patogén mikroorganizmus a Fusarium oxysporum, az okozott betegség pedig a paradicsom tőhervadása. A találmány szerinti eljárásban az ATCC 39271, ATCC 39272, és/vagy ATCC 39273 jelű, a Streptomycesek családjába tartozó, S. griseoviridis törzseket használjuk fel, amelyek tőzegben fordulnak elő. A tör zsek fermentálását például literenként 4g glükózt, 4g élesztőkivonatot és 10 g malátakivonatot tartalmazó vizes oldatban, 25—30 °C-on, 6-7 pH-nál, rázatott tenyészetben végezhetjük. A fermentáció ideje 24- 72 óra. Az alkalmazott törzsek hatékonynak bizonyultak például a következő kórokozók szaporodásának gátlása terén: Altemaria brassicicola, Fusarium culmorum, F. oxysporum, Helminthosporium sativum, Thizoctonia solani, Phonia exieue var. exieue, P. exieue var. foveata, Pythium spp., Sclerotinia sclerotiorum, Botrytis cinerea. A találmányt az alábbiakban példák segítségével mutatjuk be részletesebben. 1. példa Alternaria- és Rhizoctonia-okozta káposzta száraz foltosság, illetve palántadőlés ellen hatékonyan tud tunk védekezni a magok sugárgombákkal való talál mány szerinti kezelésével. Az 1. táblázatban az ATCC 39271 és ATCC 39 272 jelű, Streptomyces griseo viridis törzsek fungisztatikus tulajdonságait mutatjuk be. A mikroorganizmusokat 106 spóra/mt koncentrációjú szuszpenzió formájában alkalmaztuk. 1. táblázat Különböző Streptomyces sugárgomba törzsek hatása káposzta szárazfoltossággal fertőzött magvainak esetében Alternaria brassicicola-val fertőzött magvak Sugárgomba törzs Palánták száma Egészséges + + életképes palánták száma a kísérlet végén ATCC 39271 91 84 ATCC 39272 107 78 Kezeletlen fertőzött magvak 16 3 Egészséges magvak 100 100 5 i0 15 20 23 30 35 40 45 50 55 60 65 2