195474. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-fenil-benzamid-származékok előállítására
5 195 474 6 il. próba (azatioprin) Előállítás: minden alkalmazás előtt frissen előállított szuszpenzió Alkalmazás módja: intragasztikus (i.g.) (gyomron át történő) gyomorszonda segítségével; 0,8(7 meto- 5 celben szuszpendálva Térfogat: 0,01 ml per testsúly-g és dózis Adagolási rend: I. próba /-3 naptól + 6 napig (nulladik nap a transzplantálás napja) II. próba / -2 naptól + 9 napig 10 Vizsgált dózis: I. próba / 10 mg/kg 6 napig, majd 5 mg/ kg 4 napit II. próba / naponta 4—8 mg/kg. napi emelkedő dózisban 12 napon át.-15 B) Próba leírása Egy donor patkányból származó 2 allogén bőrlebenyt rokonságban nem álló, beltenyésztett törzsből 20 származó recipiens patkányba visszük át. A bőrlebenyhez tapadó panniculus carnosust (bőralatti izomszövet) metszéssel eltávolítjuk (szuprapannikuláris tanszplantátum), vagy rajta hagyjuk a bőrlebenyen (szubpannikuláris transzplantátum). Az átültetést a „zérus” napon 25 hajtjuk végre enyhe éter-narkózis alatt, az átültetési helyek leborotválása és megtisztítása után. A bőrlebenyeket a receptor helyekre rögzítjük alkalmas kötés segítségével. A 9. naptól kezdve védő gallért helyezünk az állatokra, a kötést eltávolítjuk és a transzplantátumok állapotát naponta ellenőrizzük. A transzplantátum működését osztályozó skála segítségével értékeljük, amely 3-fokű súlyossági pontozással lehetővé teszi a kilökődés differenciálását. A próba azon a rapon ér véget, amikor egy állatcsoport 50(7-ánál mindkét transzplantátum kilökődik. A transzplantátum túlélésének a kontrolihoz viszonyított meghosszabbodását napokban adjuk meg. C) Eredmények Amint a következő I. és II. táblázat mutatja, az I. próbán az A anyag fölülmúlja az azatioprint és metilpreönizolont tartalmazó standard immunszuppresszív szer hatását. A II. próbában az A anyag ugyanolyan hatásos, mint az azatioprin immunszuppresszív standard. Az A anyagból azonban nagy aktivitása miatt jóval kisebb mennyiség szükséges a hatás eléréséhez, mint a standard gyógyszerből. Az I. táblázat a patkányon végzett I. próba (bőrtranszplantátum túlélési teszt) eredményeit mutatja. Recipiens: Long Evans á. Donor: Lewis d. A donorról a recipiensre 2 szuprapannikuláris bőrlebenyt viszünk át. A II. táblázat a patkányon végzett II. próba (bőrtranszplantátum túlélési teszt) eredményeit mutatja. Recipiens: Osborne Mendel d. Donor: Lewis d. A donorról a recipiensre 2 szuprapannikuláris bőrlebenyt viszünk át. I. táblázat Állatok 2 kilökődött bőrtanszplmtátummal (n/%) * xx Vizsgált anyag Dózis +9 nap +10 nap + 11 nap + 12 nap +13 nap + 14 nap + 15 nap +16 nap + 17 nap Kontroll (Mctocel i.g.) 1/6(17) 4/6 (50)xx 4/6 (66) 4/6 (66) 4/6 (66) 5/6 (83) 6/6 (100)A anyag xx 0/5 (0) 0/5 (0) 0/5 (0) 0/5 (0) 1/5 (20) 1/5 (20) 3/5 (60)x 4/5 (80) 5/5 (100) 10 mg/kg i. g. - 3 naptól +2 napig, utána 5 mg/kg i.g. +3 naptól +6 napig Azatioprin 0/6 (0) 0/6 (0) 1/6(17) 2/6 (33) 2/6 (33) 4/6 (66)x 6/6(100)-40 mg/kg i.g. + metil-prednizolon 2 mg/kg i.g.-3 naptól + 6 napig x Kilökődés napja: az állatoknak legalább 50%-ánál mindkét transzplantátum kilökődött xx A anyag: 4-amino-N-/2’-amino-fenil/-benzamid (1. példa) 4
