195251. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az új A80190 jelű antibiotikum származékai és ezeket tartalmazó gyógyhatású készítmények előállítására
kalmazhatjuk a szilikon habzásgátlókat, a glikolokat, a szorbitot és cukrokat. A belélegeztetéshez alkalmazott porok elkészítéséhez a hatóanyagot például talkummal, diatomafölddel vagy más közömbös adalékanyaggal keverjük el. Az A80190 vegyületek rovarölő és rühellenes szerként is alkalmazhatók. Az A80190 hatásos például az alábbi rovarokkal szemben (zárójelben a hatásos mennyiséget adjuk meg): szúnyoglárva (<50 ppm), húslégy lárva (35 ppm), kifejlett házilégy (35 ppm), mexikói babböde (Epilachna corrupta) és déli sereghernyó (<100 ppm). Az A80190 vegyületek gyomirtóhatással is rendelkeznek. Hatásosak például az ujjas muhar, a mustár, a libatop gyomnövényekkel szemben, 1,1 kg hatóanyagot számítva 1 hektár területre. A terület kezelését végezhetjük a gyomnövények kihajtása előtt vagy után is. Az A80190 vegyületek poliovirussal szemben aktívak. A szövettenyésztési vizsgálatok bizonyítják, hogy az A80190 például a polilll vírussal szemben 200 pg/ml koncentrációban hatásos. Az A80190 antibiotikum ionhordozó tulajdonságú, azaz ionoforként viselkedik (lásd: B.C.Pressman: „Alkali metal chelators the ionophores". „Inorganic biochemistry" 1. kötet. G.L. Eichhorn, Elsevier, 1973). Az A80190 ionofor hatást mutat 0,5 pg/ml koncentrációban; a Na+, K+ és Rb+ ionokat illetően aktívabb, mint a Cs+ vagy a Li+ ionok esetében. Alacsonyabb koncentrációnál (0,2 pg/ml) viszont az A80190 erősebb ionofor hatást mutat a Cs+, mint a Na+ kation esetében. Az A80190-et tehát alkalmazhatjuk olyan esetekben, amikor bizonyos kationok szelektív eltávolítására van szükség. Felhasználhatjuk például fényképészeti oldatok ezüstjének kinyerésére, a környezetszennyező ipari szennyvizek toxikus kationjainak eltávolítására, a tengervíz sótalanítására. Az A80190-et felhasználhatjuk ionspecifikus elektródok készítéséhez (O. Kedem és munkatársai, 3 753 887. számú USA szabadalom; 1973. augusztus 21.) Az A80190 megváltoztatja a kationok természetes és mesterséges membránokon keresztüli permeabilítását. Alkalmazhatjuk ezért olyan membrán alkotórészeként, mellyel koncentrációgrádienssel szembeni szelektív kationszállítást valósítunk meg. E tulajdonságának egyik lehetséges felhasználási területe az értékes nehézfémek ipari méretű visszanyerése [E.L. Cussler, D.F. Evans és Sister M.A. Matesick, Science, 172, 377 (1971)]. Az A80190 vegyületek további tulajdonsága, hogy gátolják az ATPáz enzimet. A sejtmembránban található alkálifém-érzékeny ATPáz enzim az energiaigényes aktív transzportban vesz részt. Az „aktív transzport" azt az energiaigényes eseménysorozatot jelenti, melynek révén az intracelluláris és extracelluláris folyadék megőrzi összetételét. Az 19 ATPáz-gátlók csökkentik az aktív transzport energiaigényét. Az in vitro vizsgálatok szerint mitokondriális ATPáz esetében az A80190 gátlási félértékkoncentrációja (IC50): 0,5 pg/ /ml. Az A80190 vegyületek hatásos szívserkentőszerek is. Az elmondottak szemléltetésére az alábbiakban példákat adunk meg. 1. példa Az A80190 előállítására használhatunk rázott lombikos tenyészetet és fermentorban történő fermentálást. A) Az A80190 előállítása rázott lombikban: az oltótenyészet elkészítéséhez a következő összetételű táptalajt oltjuk be az Actinomadura oiigospora NRRL 15878 törzs liofilizált pelletjével vagy folyékony nitrogén alatt tar20 tott szuszpenziójával: glükóz 1,0% oldható keményítő 2,0 % élesztőkivonat 0,5 % enzimmel hidrolizált kazein* 0,5 % kálcium-karbonát 0,1 % ionmentes víz 1 liter végtérfogathoz sterilizálás előtt az oldat kémhatását pH=7,2 értékre állítjuk be nátrium-hidroxi oldattal. *NZ Amin A, Sheffield Chemical Co., Norwich, N. Y. A táptalajhoz 2,5% agart adunk és ferde-agart vagy agárlemezeket öntünk. A beoltott ferde-agart 30°C hőmérsékleten inkubáljuk 10-14 napon keresztül. A kinőtt tenyészetről sterilen lekaparjuk a spórákat és a micéliumfonadékot. Az így kapott spóra és micélium egynegyedével 50 ml táptalajt oltunk be. A beoltott táptalajt 250 ml-es Erlenmeyer lombikokban rázatjuk 5,08 cm kitérésű körkörös rázógépen, percenkénti 250 fordulatszámmal, 30°C hőmérsékleten 48 órán keresztül. Az antibiotikum termeléséhez 0,4 ml inokulummal oltunk be 50 ml alábbi összetételű táptalajt: glükóz 3,0 % N-Z Amin A 0,4 % kollagén hidrolizátum* 0,5 % magnézium-szulfát-7 víz 0,05 % kálcium-karbonát 0,2 % hideg csapvíz 1 liter végtérfogatra Sterilizálás előtt a kémhatást pH=7,0 értékre állítjuk be. HPC-3, Inland Industrial Molasses Co., Dubuque., Iowa. A beoltott táptalajt széles szájú 250 milliliteres Erlenmeyer lombikokban rázatjuk 5,08 cm kitérésű, körkörös rázógépen, percenként 250 fordulatszámmal, 30-32°C hőmérsékleten, 8-10'napon keresztül. B) Fermentorban történő A80190 termelés: az oltóanyagot két lépésben állítjuk elő. Az első lépésben a tenyészetet úgy készítjük el, ahogyan az A) pontban leírtük az inokulum készítését. A második lépéshez 10 ml így elkész tett tenyészettel oltunk be 400 ml, az első 11 195251 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
