195250. lajstromszámú szabadalom • Eljárás triciklusos makrolidok előállítására
195250 5 6 2. táblázat A 9993-as törzs és a Streptomyces misakiensis IFO 12891 fiziológiai tulajdonságai fiziológiai tulajdonságok 9993 IFO a növekedés hőmérsékleti tartománya 18°-35°C 12°-35°C optimális hőmérséklet 28°C nitrátredukciókeményítohidrolízis+ tejkoagulaciotej-peptonizacio + gyengén + melanintermelészselatinéifolyósítás + H2S termelesNaCl tűrés (X) •á-3% 3%/, lSX A szénforrás hasznosítást Pridham és Gottlieb (Pridham, T.G. és D. Gottlieb, „The utilization of carbon compounds by some Actinomyceteles as an aid for species determination“ J.Bacteriol, 56, 107-114, (1948)) módszerével állapítottuk meg. A növekedést 14 napos, 30°C hőmérsékleten történő inkubálás után határozzuk meg. A szénforrások hasznosításának eredményeit a 3. táblázatban foglaljuk össze. A 9993-as törzs hasznosítja a glicerint, maltózt és a nátrium-szulfátot. Kétséges a D-gl ükóz, szacharóz, D-mannóz és szalicin hasznosítása. 3. táblázat A 9993-as törzs és a Streptomyces misakiensis IFO 12891 szénforrás hasznosítása Szenforras 9993 IFO 12891 D-Glükoz + _ Szacharo'z +Glicerin + ” D-Xilo'z-D-Fruktóz-LaktózMaltóz +Ramno'zRaff inózD-Galaktóz+ L-ArabinózD-Mannóz . +D-TrehaldzInozitD-MannitInulinCellulózSzalicin + Kitin+ Natrium-citrat-Nátrium-szűkeinat +Natríum-acetat = hasznosít + - a hasznosítás ketseges - = nem hasznosít A mikroszkópi vizsgálatok és a sejtfalösszetétel analízise bizonyítja, hogy a 9993-as 20 törzs a Streptomyces (Waksman és Henrid 1943) nemhez tartozik. A 9993-as törzset különböző Streptomyces fajokkkal hasonlítottuk össze a közölt leírások alapján. (International Journal of Systema- 25 tic Bacteriology, 18, 69-189, 279-392 (1968) és 19,391-512 (1969), valamint Bergy’s Manual of Determinative Bacteriology, 8. kiadás (1974)). 30 Az összehasonlítások eredményeként megállapíthattuk, hogy a 9993-as törzs a Streptomyces aburaviertsis (Nishimura és munkatársai), a Streptomyces avellaneus (Baldacci és Grein), valamint a Streptomyces misakien- 35 sis (Nakamura) fajokhoz hasonlít, ezért a 9993-as törzs tenyészetének jellemző tulajdonságait összehasonlítottuk a Streptomyces aburaviensis IFO 12830, Streptomyces avellaneus IFO 13451 és a Streptomyces misakien- 40 sis IFO 12891 törzsekéivel. A 9993 törzs a Streptomyces misakiensis IFO 12891 törzshöz volt a leghasonlóbb, ezért a továbbiakban ezzel hasonlítottuk össze, amint az az 1., 2. és 3. táblázatból is kitűnik. A további 45 összehasonlítás során a 9993-as törzset meg lehetett különböztetni a Streptomyces misakiensis IFO 12891-től és új Streptomyces fajként lehetett leírni Streptomyces tsukubaensis sp. nov., elnevezés alatt, mely elnevezés 50 arra utal, hogy a talajmintát, melyből izoláltuk a Tsukuba-gunnál gyűjtötték. A 9993-as törzs a zablisztes agaron, az élesztő és maláta kivonatos agaron, a glükózos-aszparaginos agaron, a Czapek agaron 55 és a burgonya dextrózos agaron különbözik a Streptomyces misakiansis IFO 12891-tői. A keményítő-hidrolízis a 9993-as törzs esetében negatív, míg a Streptomyces misakiensis IFO 12891 -nél pozitív. 00 A zselatin-elfolyósítási próba a 9993-as törzsnél pozitív, a Streptomyces misakiensis IFO 12891 -nél negatív. A szénforrások közül a 9993-as törzs hasznosítja a glicerint, maltózt és nátrium-szukg5 cinátot, a Streptomyces misakiensis IFO 12891 viszont nem. A 9993-as törzzsel ellentétben 4