195250. lajstromszámú szabadalom • Eljárás triciklusos makrolidok előállítására
'14. Táblázat Az FR-900506 vegyület hatása a II. tipusu kollagénnel kiváltott izületi gyulladásra patkányoknál Dózis (mg/ Az artritisz /kg/nap) kialakulása 29 kontroll (olivaolaj) - 5/5 FR-900506 3,2 0/5 5. próba — az (I) általános képletü triciklo-vegyületek hatása experimentális allergiás enkefalomielitiszre (EAE) SJL/J egereknél SJL/J egerekből gerincagy-homogenizátumot készítünk. A gerincagyat befujással távolítjuk el, körülbelül azonos térfogatú vízzel keverjük össze, és 4°C hőmérsékleten homogenizáljuk. A hideg homomgenizátumot ( 10 mg/ml) azonos térfogatú komplett Freund adjuvánssal (CFA) emulgeáljuk el, ami 0,6 mg/ml Mycobacterium tuberculosis H37RA mikroorganizmust tartalmaz. Az enkefaiomielitisz kiváltásához 0,2 ml gerincvelő-CFA emulziót injektálunk az SJL/J egerekbe a 0. és a 13. napon. Valamennyi egeret naponta értékeljük és pontozzuk az EAE klinikai jelei alapján. Az EAE súlyosságát a következő ismertetőjelek szerint pontozzuk: 1. fokozat — a farok tónusa csökken; 2. fokozat — bizonytalan járás; 3. fokozat — gyengeség egy vagy több végtagban; 4. fokozat — kétoldali vagy egyoldali bénulás. Az FR-900506 vegyületet olívaolajban oldjuk, és naponként adjuk be 19 napon át az immunizáció napjától (0. nap) kezdődően. Amint a 15. táblázat adataiból kitűnik, az FR-900506 vegyület határozottan gátolja az EAE klinikai jeleinek kialakulását. 15. Táblázat Az FR-900506 vegyület hatása az experimentális allergiás enkefalomielitiszre SJL/J egereknel Kezelés Dózis Megbetegedett (mg/kg) állatok száma a 24. napon kontroll (olivaolaj) - 10/10 FR-900506 32 0/5 6. próba — az (I) általános képletü triciklo-vegyületek hatása a helyi „graft-versus-host“ reakcióra (GvHR) egereknél 16 C57BL donorokból gyűjtött élő lépsejteket (lxlO7 sejt) szubkután fecskendezzük BDF, egér jobb hátsó lábának talpába-, hogy ezzel kiváltsuk a helyi GvHR-t. Az állatokat 7 nappal ezt követően leöljük, és lemérjük mind a jobb (injektált mancs), mind a bal (nem-injektált) láb térdhajlati nyirokcsomóinak tömegét. A GvHR kialakulását a jobb és bal oldali nyirokcsomók tömegei közti különbséggel jellemezzük. Az FR-900506 vegyületet olívaolajban oldjuk, és szájon keresztül adjuk be 5 napon Az FR-900506 19 mg/kg ED50-értékkel akadályozva meg a helyi „graft-versus-host“ reakció kialakulását. 7. próba — az (I) általános képletü triciklo-vegyületek akut toxicitása ddY egereknek intraperitoneális injekcióval FR-900506, FR-900520, FR-900523 és FR-900525 vegyületet adva be, egyik esetben sem észleltünk pusztulást 100 mg/kg dózisnál. A találmány szerinti eljárással előállítható (I) általános képletü vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények használhatók például szilárd, félszilárd vagy folyékony állapotban. A készítmények a hatóanyag mellett szerves vagy szervetlen hordozó és töltelék anyagokat is tartalmaznak, melyek alkalmasak az externális, enterális vagy parenterális alkalmazáshoz. Az aktív hatóanyagot kombinálhatjuk nem toxikus, gyógyászati szempontból alkalmazható hordozoanyagokkal tabletták, pirulák, kapszulák, kúpok, oldatok, emulziók, szuszpenziók és más formátumok kialakításához. A hordozóanyag lehet víz, glükóz, tejcukor, arabmézga, zselatin, mannitol, keményítő paszta, magnézium-triszilikát, talkum, kukoricakeményítő, keratin, kolloid szilika, burgonyakeményítő, uraeés más anyagok, melyek felhasználhatók a szilárd, félszilárd vagy folyékony készítmények ipari előállítására. Ezenkívül a készítmények tartalmazhatnak még további adalékanyagokat, stabilizáló anyagokat, sűrűsítő anyagokat, színező és szagosító anyagokat is. A készítmények olyan mennyiségben tartalmazzák a hatóanyagokat, mely szükséges ahhoz, hogy a kívánt hatást kifejtsék a folyamatokra vagy a betegség állapotára. Humán alkalmazásnál a készítményeket előnyösen parenterális vagy enterális adagolással alkalmazzuk. Az (I) általános képletü vegyület gyógyászatiig hatásos mennyisége a beteg állapotától, korától függően változó, napi 0,01 —1000 mg, előnyösen 0. 1—500 mg, még előnyösebben 0,5—100 mg, az egyszeri bevitt dózis mennyisége 0,5,1,5, 10 50, 100, 250 és 500 mg. Az alábbi példáknál — melyek a fentiek szemléltetésére szolgálnak — a végtermékek fizikai-kémiai állandói azonosak a leírás bevezető részében megadott adatokkal. 1. példa A Streptomyces tsukubaensis 9993 törzset a hígításos lemez technikával izoláltuk az alábbiak szerint. 30 195250 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
