194940. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológiai eljárás új tumorellenes hatású piridil-kinolin származék és eljárás az e vegyületet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
194940 4 fiának vetjük alá, majd az adszorbeált MG883—12F2 anyagot megfelelő oldószerrel eluáljuk. Az eluátumot ezután vákuumban szárazra pároljuk. A végterméket nyerstermék formájában, vörös porként kapjuk. A nyersterméket a fentebb ismertetett extrakciós és adszorpciós eljárások megfelelő számú ismétlésével tisztíthatjuk, amelyeket kívánt esetben átkristályosítással is kiegészíthetünk. Az egymással kombinálható tisztítási eljárások például adszorbenseken vagy gélszűrő anyagokon — így szilikagélen, Sephadex LH 20R-on vagy Dia-Ion HP 20*-on-végzett oszlopkromatográfiás eljárások, megfelelő oldószerekkel végrehajtott folyadékkromatográfiás eljárások, ellenáramú megoszlási kromatográfia és vékonyréteg-kromatográfiás eljárás lehetnek. A tisztítást például az alábbi módon végezhetjük el: az MG883—12F2 nyersterméket kevés kloroformban oldjuk; az oldatot szilikagél-oszlopra visszük és megfelelő oldószerrel eluáljuk; a kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és vákuumban koncentráljuk; a koncentrátumot vékonyrétegen kromatografáljuk, a kívánt terméket visszanyerve lényegében homogén terméket kapunk. A kapott terméket nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással tovább tisztíthatjuk, vagy megfelelő oldószerből átkristályosíthatjuk. Az alábbi példában használt, Streptomyces nemzetségbe tartozó, MG883—12F2-t termelő mikroorganizmus mikrológiai tulajdonságai az alábbiak. A fenti mikroorganizmus egy Actinomycètes, amelyet 1983. áprilisában izoláltunk az Institute of Mickrobial Chemistryben, Setagaya-ku-ból (Tokio, Japán) származó talajmintából, és MG883—12F2 számon tartottunk nyilván. 1) Morfológiai tulajdonságok Az MG883—12F2 mikroszkópos képében elágazó léghifákból eredő spirális légmicéliumokat észlelünk, de örvények nem figyelhetők meg. Az érett spóraláncok legalább 10 spórából álló, jól észlelhető láncok. A spórák mérete közel 0,4—0,5 X 0,8— 0,9 pm. A spórák sima felületűek. 2) Szaporodás különféle táptalajokon A zárójelben feltüntetett színjelöléseket a Color Manual of Container Corporation of America szerint tüntetjük fel. (1) Szaccharóz-nitrát agar tápközeg (inkubálás 27°C-on) Síntelen-halványsárga tenyészeten fehér-barnásfehér (5ba, Shell Pink) légmicéliumok. Nincs oldható festék. (2) Glükóz-aszparagin agar tápközeg (inkubálás 27°C-on) Halványsárga (2gc, Bamboo — 2ic Honey Gold) tenyészeten fehér — sárgásszürke (3ba, Pearl) légmicéliumok. Nincs oldható festék. (3) Glicerin-aszparagin agar tápközeg (ISP-Medium 5, inkubálás 27°C-on) 3 Halvány sárásbarna (3ic, Lt Amber — 31 e Cinnamon) tenyészeten fehér — barnásfehér légmicéliumok. Nincs oldható pigment. (4) Keményítő-szervetlen só agar tápközeg (ISP-Medium 4, inkubálás 27°C-on) Halvány sárgásbarna (21e, Mustard) tenyészeten barnásfehér (3ba, Pear.l — 5ba, Shell Pink) légmicéliumok. Nincs oldható festék. (5) Tirozin-agar tápközeg (ISP-Medium 7, inkubálás 27°C-on) Halvány sárgásbarna (21e, Mustard) — halványbarna (31g, Adobe Brown) tenyészeten fehér — barnásfehér légmicéliumok, nincs oldható pigment. (6) Tápagar (inkubálás 27°C-on) Halvány sárgás-narancssárga (2gc, Bamboo) — halvány sárgásbarna (2ng, Dull Gold) tenyészeten fehér légmicéliumok. Nincs oldható pigment. (7) Élesztő-maláta agar tápközeg (ISP-Medium 2, inkubálás 27°C-on) Halvány sárgásbarna (2ne, Mustard Goid) — erős sárgás-narancssárga (3pg, Golden brown) tenyészeten sárgásszürke (2ca, Lt Ivory) légmicéliumok. Nincs oldható festék. (8) Zabliszt-agar tápközeg (ISP-Medium 3, inkubálás 27°C-on) Színtelen — halványsárga tenyészeten barnásfehér légmicéliumok. Nincs oldható festék. (9) Glicerin-nitrát agar tápközeg (inkubálás 27°C-on) Halványsárga — halványbarna (3ic, Lt Amber) tenyészeten fehér — sárgásszükre (3ba, Pearl) légmicéliumok. Nincs oldható festék. (10) Keményítő-agar tápközeg (inkubálás 27°C-on) Színtelen tenyészeten fehér légmicéliumok. Nincs oldható festék. (11) Kalcium-malát agar tápközeg (inkubálás 27°C-on) Színtelen — halvány sárgásbarna (2gc, Bamboo) tenyészeten fehér — barnásfehér légmicéliumok. Nincs oldható pigment. (12) Cellulóz tápközeg (inkubálás 27°C-on) Színtelen tenyészeten barnásfehér légmicéliumok. Nincs oldható pigment. (13) Zselatinos szúrt tenyészet Egyszerű, zselatinos tápközegben 20°C-on inkubálva színtelen — halvány sárgásbarna (2ne, Mustard Gold) tenyészeten fehér légmicélium fejlődik, nincs oldható pigmentképződés. Glükóz-pepton tartalmú zselatinos tápközegben 27°C-on inkubálva halványsárga (1—1/2 ea, Lt Yellow — 2ea, Lt Wheat) — halványbarna (3ic, Lt Amber — 31e, Cinnamon) tenyészeten fehér légmicéliumok nőnek. Halvány, barnás árnyalatú oldható festék keletkezik. (14) Lefölözött tehéntejes tápközeg (37°C-on inkubálva) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
