194940. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológiai eljárás új tumorellenes hatású piridil-kinolin származék és eljárás az e vegyületet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
194940 Halvány rózsaszínű (4gc, Nude Tan — 5gc, Peach Tan — 5ie, Copper Tan) tenyészeten barnásfehér légmicéliumok. Barna árnyalatú oldható festékképződés észlelhető. 3. Fiziológiai tulajdonságok (1) Tenyésztési hőmérséklet-tartomány A tenyésztést glükóz-aszparagin-agaron (1,0% glükóz, 0,05% L-aszparagin, 0,05% kálium-hidrogén-foszfát, 3,0% agar, pH 7,0) végeztük, különböző hőmérsékleteken, 20, 24, 27, 30, 37 és 50°C-on. A mikroorganizmus az 50°C-ot kivéve minden vizsgált hőmérsékleten szaporodik, az optimális hőmérséklet 30 és 37°C közé esik. (2) Zselatin elfolyósítása (15% sima zselatinos táptalajon, 20°C-on, vagy glükóz-pepton tartalmú zselatinos táptalajon, 27°C-on) Az egyszerű zselatinos táptalajon növő tenyészetet 20 napon át figyeltük, ezalatt nem tapasztaltunk elfolyósítást. A glükóz-pepton tartalmú zselatinos táptalajon kb. a 6. napon kezdődik az elfolyósítás, és az elfolyósodás mértéke közepes-gyenge. (3) Keményítő hidrolizálás (keményítő-szervelten só agarok vagy keményítő agaron 27°C-on inkulálva) Egyik táptalajon sem észlelhető keményítő-hidrolízis. (4) Lefölözött tehéntej koagulálása és peptonizálása (lefölözött tehéntejben 37°C-on inkubálva) A lefölözött tehéntej koagulálása kb. az inkubálás 10 napján kezdődik, és hamarosan teljesen végbemegy, majd peptonizáció következik. A koagulálás és peptonizáció foka közepes — erős. (5) Melanin-szerű pigment képződése (tripton-élesztő tápfolyadékban (ISP-Medium, 1) pepton-élesztő-vas agaron (ISP-Medium 6), vagy tirozin-agaron (ISP-Medium 7), 27°C-on) Egyik tápközegben sem észlelhető melamin-szerű pigment képződés. (6) Szénforrások hasznosítása (Pridham-Gottlieb agar tápközegen (ISP-Medium 9, 27°C-on) A mikroorganizmus D-xilózt, glükózt és D-mannitot felhasználva szaporodik, de nem hasznosítja a szaccharózt, inozitot, ramnózt és raffinózt. A mikroorganizmus valószínűleg nem hasznosítja a D-fruktózt, az L-arabinóz hasznosítására vonatkozóan nem sikerült határozott következtetésre jutni. (7) Kalcium-malát oldása (kalcium-malát agaron, 27°C-on) Nem figyelhető meg a kalcium-malát oldódása. 5 (8) Nitrát redukálás (0,1% kálium-nitrátot tartalmazó vizes peptonoldatban (ISP-Medfum 8, 27°C-on) A váltakozó vizsgálatokban mind pozitív. mind negatív eredmények előfordultak. A fenti megfigyeléseket az alábbiak szerint összegezhetjük: morfológiailag az MG883—12F2 törzsben nincs sporangium vagy örvény, és spirális légmicéliumokat növeszt. A mikroorganizmus spórái sima felületűek. Számos különféle táptalajon szaporodik, halványsárga — halvány sárgásbarna vagy halványbarna tenyészeten fehér — barnásfehér vagy sárgásszürke légmicéliumok fejlődnek. Oldható festék ritkán észlelhető, ha keletkezik, az barnás árnyalatú. Melanin-szerű festék egyetlen vizsgált tápközegben sem keletkezik. Nem észlelhető a keményítő hidrolízise. A mikroorganizmus protein-bontó képessége — azaz a zselatin gyenge elfolyósítása és a lefölözött tehéntej koagulálása és peptonizálása — közepes-erős. A mikroorganizmus sejtjei a 2,6-diamino-pimelinsav LL-formáját tartalmazzák. Ez a tény, a fenti tulajdonságokkal együtt világosan mutatja, hogy az MG883—12F2 törzs a Streptomyces nemzetségbe tartozik. A fenti mikrológiai sajátságokat figyelembevéve a következő három ismert streptomyces tekinthető az MG883—12F2 törzshöz leginkább hasonlónak: Streptomyces albus (International Journal of Systematic Bacteriology, 19, 401 (1969)); Streptomyces f Imquisti (International Journal of Systematic Bacteriology, 19, 403 (1969); és Streptomyces rangoon (International Jornal of Systematic Bacteriology, 19, 472 (1969). Az utóbbi két mikroorganizmust a Streptomyces albus-sal azonosnak találták. A fenti feltételezés igazolására beszereztük a fenti három homológ törzset, és összehasonlítottuk azokat az MG883—12F2 törzzsel. Az összehasonlítás eredményeit az 1. táblázatban adjuk meg. Mint az 1. táblázat mutatja, az MG883— Í2F2 mikrológiai sajátságait tekintve mind a három Streptomyces albus törzshöz — azaz Streptomyces albushoz, Streptomyces almquistihez és Streptomyces rangoonhoz — nagyon hasonlít. A Streptomyces albus var. bruneomycinit, mint sztreptonigrint (más néven bruneomicint) termelő törzset ismerik (Antibiotiki (Moskow), 14(11), 997— 1000 (1969)). 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 4
