194910. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új D-glükopiranóz-származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
194910 Az oldószer elpárologtatósa után az L-alanin parciális racemizálása miatt és a diasztereomer elegyként keletkező terméket szilikagélen (1:50) kloroform/metanol 95:5 arányú elegyével ismételten kromatografálva az egyes komponensekre bonthatjuk szét. A vékonyréteg kromatogramon gyorsabban haladó L-alanint tartalmazó diasztereomer (főrész, 1 g) N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropilidén-L-[0- (terc-butil-oxi-karbonil-L-alanil) ] - -treonil-D-izoglutamin-y-benzilészter Ri értéke 0,52, a D-alanint tartalmazó izomeré 0,48, (kloroform/metanol 9:1 arányú elegyével). 8,9 g N-acetil-la-benzil-4,6-0-izopropilidén-muraminsav-nátriumsót 6,8 g L-treonil-D- izoglutamin-y-benzilészter-hidrokloridot és 4,2 g N-hidroxi-szukcinimidet 30 ml dimetil-formamid és 6 ml diklór-metán elegyében szuszpendálunk. 0°C-ra lehűtjük, 4,51 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, és az egészet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A sűrű szuszpenziót 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, a keletkezett csapadékot leszívatjuk, és a szűrletet szárazra pároljuk. Az ekkor keletkező maradékot 300 ml éti 1 - -acetáttal felvesszük és hidegen a szokásos módon vízzel, 0,6 n citromsav-oldattal, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és ismét vízzel mossuk. Az oldószer elpárologtatósa után viszszamaradó olajat szilikagélen (1:20) kloroform/metanol 95:5 arányú elegyével kromatografáljuk. A 25-47. frakció 9,7 g (az elméleti hozam 70%-a) tiszta N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropilidén-murami 1-L-treonil-D-izoglutamin-y-benzilésztert tartalmaz, további 10%-ot nyerhetünk, ha ismételten kromatografáljuk a vegyes frakciókat, [oc]20= -j-92itl0 (c=l, metanol), R/=0,84 (kloroform/metanol/víz 75:30:5 arányú elegyével) és R(=0,49 (kloroform/metanol 9:1 arányú elegyével). 9,12 g N-BOC-L-treonil-D-izoglutamin-y-benzilésztert 150 ml vízmentes etil-acetátban oldunk, és szobahőmérsékleten keverés közben, a nedvesség kizárásával azonos térfogatú etil-acetátos 4,5 n sósavoldattal elegyítjük. A termék azonnal meginduló kiválását 1,25 óra után 200 ml dietiléter hozzáadásával tesszük teljessé. A keletkező csapadékot leszűrjük, éterrel mossuk és nátriumazbeszten (Merck AG) vákuumban szárítjuk 7,4 g ( az elméleti hozam 95%-a) L-treonil-D-izoglutamin-y-benzilészter-hidrokloridot kapunk színtelen porként, bomláspontja 196-98°, [a]^°= +13±1° (c=l°; metanol) R/=0,71 (kloroform/metanol/víz 70:30:5 arányú elegyével) és R/=0,80 (etil-acetát/n-butanol/pirid in/jégecet /víz 42:21:21:6:10 arányú elegyével). A kiindulási anyagot a következőképpen állítjuk elő: 27 5,48 g BOC-L-treonint és 6,82 g D-izoglutamin-y-benzilészter-hidrokloridot 10 ml dimetil-formamid és 50 ml etil-acetát elegyében szuszpendálunk, 2,78 ml N-metil-morfolin és 6,18 g l-etoxi-karbonil-2-etoxi-l,2-dihidrokinolin (EEDQ) hozzáadása után 7 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A narancssárga színű szuszpenziót 300 ml etil-acetáttal felvesszük és a szokásos módon mossuk. Az oldószer elpárologtatása után visszamaradó semleges anyagot szilikagélen (1:25) kloroform/metanol 95:5 arányú elegyével kromatografálva tisztítjuk. A tiszta frakciókat öszszegyűjtjük. 10,2 g N-BOC-L-treonil-D-izoglutamin-y-benzilésztert kapunk színtelen gyanta alakjában, [«]& nm - —13±1° (c=l; metanol), Rf= 0,65 (kloroform/metanol/víz 70:30:5 arányú elegyével) és R/=0,80 (acetonitril/víz 3:1 arányú elegyével). 4. példa 1,09 g (3 mmól) 2-fenil-4,5-(3-0-karboxi-metil-5,6-0-izopropilidén-D-glükofurano) -Ä2- -oxazolint és 0,35 g N-hidroxi-szukcinimidet 6 ml dimetil-formamidban oldunk, jégfürdőn lehűtjük és 0,74 g (3,6 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá. 30 perc múlva 0,45 ml trietil-aminnal elegyítjük és lassan, alapos keverés közben 1,7 g L-(0-sztearoil)-szeri l-D-glutaminsav-dimetilészter-hidroklorid 10 ml dimetil-formamiddal készített oldatát csepegtetjük hozzá. Még fél órán át keverjük jéghűtés közben és 4 órán át szobahőmérsékleten. A reakciótermék R/ értéke 0,64 és a következőképpen tisztítható: a reakcióoldatot olajvákuumban bepároljuk, és a maradékot kloroformmal felvesszük, vízzel háromszor kirázzuk, és a vizes fázist kloroformmal extraháljuk. A kloroformos fázist szárítjuk és bepároljuk, majd a maradékot kovasavgélen (G Merck) kromatografáljuk (eluálószer kloroform és aceton 9:1 arányú elegye). 1,9 g (az elméleti hozam 72,5%-a), tiszta, védett muramil-peptidet kapunk, amorf porként. E vegyület 1,28 g-ját hidrolizáljuk, 17 órán át 40°C-on, 20 ml 0,1 n sósav és 40 ml tetrahidrofurán elegyében. Ezután nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal semlegesítjük és vákuumban bepároljuk. Az így kapott maradékot kovasavgélen (G, Merck) kromatografáljuk szukcesszív eluálással, amit kloroformmal, kloroform/aceton 9:1 arányú elegyével, kloroform/aceton 7:3 arányú és kloroform/metanol 9:1 arányú elegyével végzünk. 0,54 g (az elméleti hozam 43,5%-a) N-benzoil-normuramil-L- (0-sztearoil) -szeril-D-glutaminsav-dimetilésztert kapunk, R/ értéke 0,65, (kloroform/metanol 85:15 arányú elegyével). Éter/petroléter elegyéből kicsapva mikrokristályos port kapunk, amelynek olvadáspontja 56-61°C. [a]ő°= +25±1° (c= 1, dimetil-szulfoxid). 28 15 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
