194873. lajstromszámú szabadalom • Eljárás indolin- és 2-indolinon-származékok előállítására
Kísérletek érzéstelenített kutyákban. Mindkét nembeli korcs, 7—14 kg súlyú kutyákat alkalmazunk. Az érzéstelenség állapotát nátrium-pentobarbitalla! (30 pg/kg, i.v.) indítjuk be, és ezzel is tartjuk fenn, szükség esetén további dózisokkal. Pozitív nyomású szivattyút alkalmazunk, hogy a kutyákat egy légcsövön belüli csövön át lélegeztessük (18 löket/perc, 20 ml/kg löket'1), és egy melegítő párna tartja a testhőmérsékletet 37—38°C hőmérsékleten. A combcsonti artériás vérnyomást egy heparin-oldattal (16 egység/ml) töltött és Statham nyomás-jelátalakítóval összekötött polietilén-katéteren át mérjük. Egy nyúlásmérő ív, amely a szív jobb kamrájába van varrva, méri a szív összehúzódási képességét. A húzóerőt a mérőeszközön 50 g-ra állítjuk be, és a rögzítő szerkezet (Beckman-dinográf) erősítőjét úgy állítjuk be, hogy 50 g egy 10 mm-es írótoll-kitérést idézzen elő. A szív összehúzódási húzóerejét (tenzióját) az irôtoll kitérés millimétereiben vagy a húzóerő gramjaiban mérjük. A vizsgált vegyületeket i.v. kapszula (2—5 ml) formájában vezetjük be, ahol a hordozóanyag normál fiziológiás sóoldat, a bevezetést egy 30— 45 perces kiegyensúlyozási periódus követi. Egy kontroll kísérletben 50 ml 5%-os dextrán-oldat gyors intravénás injekciózása és az aorta mechanikus összenyomása azt mutatja, hogy az összehúzódási képességre irányuló mérések függetlenek a terhelés előtti és terhelés utáni változásoktól. A szívverés sebességét egy szívműködés-sebességmérő (cardio-tachometer) segítségével határozzuk meg, amelyet az arteriális nyomás impulzus jel vezérel, és kiíratjuk a poligráfon. A maximális hatást az összehúzódási képességre különböző dózis-szinteken meghatározzuk és ábrázoljuk, és azt a dózist, amely az összehúzódási képességben 50%-os növekedést alakít ki (ED50), interpolálással meghatározzuk. Az összes vizsgált vegyület ED50 értékeit a II. táblázatban foglaljuk össze. II, Táblázat A vegyületek hatása a szívkamrai összehúzódásra érzéstelenített kutyákban 7 Vegyület ED50 /mcg/kg/ 1. példa szerinti 5 2. példa szerinti 10 3. példa szerinti 5 4. példa szerinti 8,5 5. példa szerinti 20 6. példa szerinti 21 7. példa szerinti 2,5 8. példa szerinti 6,3 "A" vegyület 10 ”B" vegyület 48 * i.v, adag, amely 50% csúcs-növekedést idéz elő az összehúzódási képességben Kísérletek eszméleten levő kutyákban Mindkét nembeli, 15—36 kg-os korcs kutyákat állandó jelleggel műszerrel kötünk össze, hogy megfigyeljük a csúcs szisztolés nyomást, a szívdobogás sebességét, a bal kamrai nyomást és annak eiső differenciálját, LVdP/dt-t 60 mm higany-nyomásnál. Halotán-nitrogén(I) oxid érzéstelenítés mellett egy előre kalibrált Königsberg P22 nyomás-jelátalakítót ültetünk be a bal kamrába egy szúrt seben át a csúcsnál. A sebészeti kezelésből való visszatérés után minimum két hetet kell hagyni a kutyáknak, hogy begyakorolják a nyugodt fekvést négy órás időtartamon át. Ez a beszabályozás szükséges, hogy stabil, reprodukálható eredményeket nyerjünk napról-napra. A kutyákat egy-egy kísérlet előtt 18 órán át éheztetjük. Az állatok szabad szemmel látható viselkedésének megfigyelését is elvégezzük minden egyes tanulmányban. A vegyületeket vagy a placebo-anyagot (laktóz) zselatin-kapszulákban adjuk be. Az összehúzódási képességre való maximális hatást különböző dózisszínteknél meghatározzuk és ábrázoljuk, és az összehúzódási képességben 50 százalékos növekedés előidézéséhez szükséges adagot (ED50) interpolálással határozzuk meg. Az ED50 értékeket minden vizsgált vegyületnél a III. táblázatban adjuk meg. III, Táblázat A vegyületek hatása a szívkamrai 8 összehúzódási képességre eszméiéten levő ' kutyákban Vegyület ED50 /mcg/kg/* 1. példa szerinti 25 2, példa szerinti >400 7. példa szerinti 50 8. példa szerinti 25 "A" vegyület 500 "B" vegyület >500 * Szájon keresztül adott dózis, amely az összehúzódási képességben 50%-os csúcsnövekedés előidézéséhez szűkséges A jelen találmány szerinti vegyületek különböző utakon adhatók be, beleértve a szájon át, végbélen át, bőrön át, bőr alatt, intravénásán, izomban vagy orrban történő beadagolást. Ezeknek a vegyületeknek speciális vonása, hogy szájon, át történő beadás után is hatásos pozitív inotróp szerek, értágítók és hörgő-tágítók. A vegyületeket általában gyógyászati kompozíció formájában alkalmazzuk. Az ilyen kompozíciók a gyógyszerészeti szakterületen jól ismert módon készülnek, és legalább egy aktív vegyületet tar-5 194873 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
