194310. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új TAN-588 antibiotikum alkálifém-, alkáliföldfém-, ammóniumsójának és N-dezacetilezett-származékának előállítására
1 194 310 2 antibiotikum (A és B típusú vegyületek keveréke) hiológiai jellemzőit adjuk meg. Megjegyezzük, hogy az A és B típusú vegyületek keverékére kapott biológiai jellemzők az A és B típusú vegyületekre különkiilőn is mérvadók. A 3. táblázatban összefoglaljuk az N-dezatilezett TAN-588 antibakteriális hatását különböző mikroorganizmusok ellen. Táptalaj összetétele: 17,5 g Bacto Antibiotic Medium 3 (gyártó cég: Difko Laboratories, USA) 50.0 g Bacto Yeast extract (élesztőkivonat) (gyártó cég: Difko Laboratories, USA) 20.0 g Bacto Agár (gyártó cég: Difko Laboratories, USA) 1000 mi desztillált víz (pH beállítás nélkül). Baktérium oltóanyagként ml-ként 106 telepképző egységet tartalmazó oldatot használunk. 3. táblázat Mikrooragnizmus Minimális inhibitor koncentráció Mg/ntl Staphylococcus aureus FDA 209P 50 Micrococcus luteus 1FO 12708 6,25 Bacillus subtilis NIHJ PCI 219 12,5 Bacillus cereus FDA 5 50 Escherichia coli NIHJ JC2 25 Salmonella typhymurium IFO 12529 50 Citrobacter freundii IFO 12681 50 Klebsiella pneumoniae IFO 3317 100 Serratia marcescens IFO 12648 25 Proteus mirabilis ATCC 21100 100 Proteus vulgaris IFO 3988 100 Proteus morganii IFO 3168 > 100 Pseudomonas aeruginosa IFO 3080 50 Alcaligenes faecalis IFO 13111 100 Acinetobacter calcoaceticus IFO 13006 50 Az N-dezacetilezett TAN-55 stabilitását különböző /J-laktamázokkal szemben vizsgáltuk. A vizsgálatokban Escherichia coli PG 8 mikroorganizmust alkalmaztunk. Az eredményeket a 4. táblázatban foglaljuk össze. A táptalaj 20 mg/1 diamino-pimelinsavat tartalmazó szilárd táptalaj (pH 7). Hatóanyagkoncentráció: N-dezacetílezett TAN-588 l000jug/ml egyéb hatóanyagok 100/ig/mI. A táblázatban használatos jelölések: PCG: benzil-penicillin CPC: cefalosporin C CMC: ceamicin C Xi : Bacillus cereus (gyártó cég: Calbio Chemical Co., USA) x2: Enterobacter closcae x3 : Nincs inhibiciós zóna. A táblázatban lévő értékek a kapott inhibiciós zónák átmérői. 4, táblázat 0-laktamáz dezacetilezett TAN-588 PCG CPC CMC __ 22,5 22 33 34 Penlcillináz Xj Cefalo s. pori-24,5-*s 32 34 náz X] 21,5-— — A találmány szerinti eljárással előállított alkálifém-, alkáliföldfém- vagy ammóniumsót és a dezacetilezett TAN-588 — a továbbiakban (I) vegyületek - antibakteriális hatást fejtenek ki a Gram-pozitív és Grant negatív mikroorganizmusokra. Ezen Itatásuk következtében bakteriálisán fertőzött emlősök [mint például patkányok, egerek, kutyák, macskák, háziállatok (lovak, stb.) emberekj, baromfi, stb. kezelésére használhatók. A találmány szerinti eljárással előállított (I) vegyületek gyógyszerészetileg elfogadható hordozó-, vivő-, hígítóanyagokkal gyógyszerészeti készítményekké alakíthatók. A gyógyszerészeti készítményeket különböző formákban készíthetjük el, így például szájon át történő adagoláshoz tabletta, kapszula, stb.: parenterális adagoláshoz injekciós oldatok formájában. Injekciós oldatok készítéséhez, például izotóniás sóoldatot használhatunk. Kapszulák készítéséhez például laktózt használhatunk. A hatóanyag /(I) vegyületek/ dózisa - szájon át történő adagolásnál - 5-50 mg/kg/nap, előnyösen 10-20 mg/kg/nap, és parenterális adagolásnál 2,5- 25 mg/kg/nap, előnyösen 5-20 mg/kg/nap. A találmány szerinti eljárással előállított (I) vegyületek külsőleg alkalmazható antibakteriális és fertőtlenítő szerekként is használhatók — oldat vagy kenőcs formájában. Oldatkészítésnél az (I) vegyületeket 0,1 vegyes %-ban desztillált vízben oldjuk fel. Kenőcskészítésnél fehér vazelinnel vagy lanolinnal keverjük össze az (I) vegyületeket. A kenőcsökben a hatóanyagkoncentráció 0,2—20 mg/lg kenőcs, előnyösen 1-10 mg/1 g kenőcs. A találmány szerinti eljárással előállított (I) vegyületek fontos intermedierek új gyógyszerek szintézisében. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületekre jellemző spektrumok a következők: 1. ábra — TAN-588 nátriumsójának (A és B típusú vegyület egyensúlyi keverékének) UV- spektruma, 2. ábra — TAN-588 nátriumsójának (A és B típusú vegyidet egyensúlyi keveréke) infravörös spektruma, 3. ábra - N-dezacetilezett TAN-588 (A és B típusú vegyidet keveréke) infravörös spektruma. A találmányt a következő példákon és referenciapéldákon keresztül mutatjuk be. 1. példa Empedobacter lactamgenus YK-258 (1FO 14322, FERM BP-699) szüárd táptalajon tenyésztett törzset 2 1 térfogatú Sakaguchi edényben lévő 500 ml táptalajra oltunk be. A táptalaj egy vizes oldat (pH 7,0), és összetétele a következő: 2 v% glükóz, 3 v/& oldható keményítő, 1 v% nyers szójaliszt, 0,5 v% Polypepton (gyártó cég: Daigo Nutritive Chemicals, Japán) és 0,3 v% nátrium-klorid kiegészítve 0,5 v% precipitált kálclum-karbonáttal. Az edényeket 24°C hőmérsékleten, 48 órán át rázatva Inkubáljuk. Az ilymódon kapott folyékony tenyészetet ezután egy 501 térfogatú fermentor tartályban lévő 301 táptalajba oltjuk át. A táptalaj összetétele a fentivel megegyező, 0,05 v% Actcol (gyártó cég: Takeda Chemical Industries Ltd., Japán) márkanevű habzásgátlóval kiegészítve. Az inkubálás folyamán a tenyészetet 24°C hőmér5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
