194310. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új TAN-588 antibiotikum alkálifém-, alkáliföldfém-, ammóniumsójának és N-dezacetilezett-származékának előállítására
1 vonat, 0,1% ammónium-szulfát, 0,1% nátrium-klorid, 0,05% magnézium-szulfát (heptahidrát), a pH-t nátrium-hidroxiddal vagy kénsawal állítjuk be: ii) hőmérséklet: az optimális hőmérséklettartomány 21 -28°C között van, de a mikroorganizmusok 14—32 C hőmérsékleten is szaporodnak, Táptalaj : folyékony táptalaj : 15) Oxigén igény: aerob 16) O—F (oxidációs-fermentációs) vizsgálat (Hugh. Leifson módszer): nem reagál. 17) Cukorból sav és gáz termelése és ezek hasznosítása. Sav (vizes pepton) Gáz (vizes pepton) Hasznonosítás (Davis táptalajon) 1-Arabinóz _ — ± d-Xilóz — — + d-Glükóz — — + d-Mannóz — — d-Fruktóz — — d-Galaktóz — — + Maltóz — — — Szacharóz — — ♦ Laktóz — — ♦ Trehalóz — — ■f d-Szorbit-— . — — d-Mannit — — ♦ Inozit — — -— Glicerin — — ± Keményítő — — + 18) a DNS-ben guanin ♦ cítozin mól%-a (Tm módszer): 70,2 ± 1,5 19) Képesség poliszacharidok bontására Karboxi-metil-cellulóz: pozitív Kolloidális kitin: pozitív Nátrium-alginát: +/ — A fentiekben jellemzett mikrobiológiai jellemzőkkel rendelkző XK-422 törzset, összehasonlítottuk a Bergey s Mannual of Determinative Bacteriology, 8. kiadás és International Journal of Systematic Bacteriology, 30, 225-420 (1980) és 32, 146-149 (1982) irodalmi helyeken ismertetett törzsekkel. Azon jellemzők alapján, hogy a mikroorganizmus Gram-negatív, a telepek nyálkás felületet képeznek és szálas szerkezetben növekszenek, a kolloidális kitint és száraz élesztőt bontani képes a DNS-ben nagy a guanin ♦ citozin tartalom, megállapítottuk, hogy a törzs a Lysobacter nemzetségbe tartozik, bár a törzs különbözött a Lysobacter nemzetségbe tartozó International Journal of Systemativ Bacteriology, 28, 367-393 (1978) irodalmi helyen említett fajoktól abban, hogy nem reakcióképes az O-F vizsgálatokban, színtónusban nem különböző telepeket képez, valamint nem képes asszimilálni és hasznosítani a szervetlen nitrogén-forrásokat. A fentiek alapján megállapítottuk, hogy az YK-422 törzs egy új mikroorganizmus fajhoz tartozik. Ezt az mikroorganizmus fajt „Lysobacter albus sp. nov. -nak neveztük el. A Lysobacter albus sp. nov. YK-422 törzset az IFO-nál letétbe helyeztük, 14384 (1984. október 5.) számon. A törzset az FW-ben is letétbe helyeztük FERM P-7938 (1984. november 14.) számon, majd a Budapesti Szerződés feltételeit 2 teljesítve az FRI-ben FERM BP-698 szám alatt. A találmány szerinti kevert tenyészet, ami az Acinetobacter sp YK-504 mikroorganizmus az Empedobacten lactamgenus YK-258 vagy a Lysobacter albus sp. nov. YK-422 mikroorganizmus vagy ezek TAN-588 és/vagy N-dezacetil származékát termelni képes mutánsai vagy variánsai keveréke, a TAN- 588 antibiotikum N-dezacetilezett származékát nagy mennyiségben termeli. A nagy mennyiség alatt azt értjük, hogy a kevert tenyészet sokkal nagyobb mennyiségben termeli az N-dezacitelezett TAN-588 antibiotikumot, mintha csak az Empedobacter vagy Lysobacter mikroorganizmus tenyészetet használunk. A acinetobacter sp. YK-504 törzset, Japánba, Osaka Prefecture, Osaka city, Yodogawa-ku-ban gyűjtött édesvízből izoláltunk. Az YK-504 törzs mikrobiológiai jellemzői a következők: (a) Morfológiai jellemzők Szilárd, ferde táptalajon 24°C hőmérsékleten 5 napon át történő inkubálás után a sejtek 0,8-1,5 pm átmérőjű és 1,1—1,2 pm hosszúságú rövid vagy megnyúlt pálcika alakúak, esetenként párosak vagy szálformájúak. Ostorodás, sejt mozgással nem figyelhető meg. (b) Szaporodás különböző tápközegekben. A tenyésztést 24°C hőmérsékleten, a megfigyelést 4—14 nap elteltével végezzük. 1) Szilárd táptalaj csészében. Kis, köraiakú konvex felszínű és sima szélű telepek alakulnak ki. Nincs diffúzióképes pigment. 2) Szilárd ferde táptalaj. A telepek mérsékelt ütemben szálas szerkezetben növekednek, színtelenek és fényes felületűek. 3) Folyékony táptalaj. A tápoldat zavaros, csapadék képződik gyűrű kialakulása nélkül. 4) Szúrt tápzselatinos tenyészet. A felső részben csekély szaporodás figyelhető meg. Az elfolyósítási aktivitás negatív. 5) Lakmusz A lakmuszt nem redukálja, peptonizáció és koaguláció nem figyelhető meg. (c) Fiziológiás jellemzők: 1) Nitrátok redukciója: negatív 2) Denitrifikálási reakció: negatív 3) (MR) Metilvörös vizsgálat: negatív 4) (VP) Voges-Proskauer vizsgálat: negatív 5) Indol termelés: negatív 6) Hidrogén-szulfid termelés (TSI agar és ólom-acetát papír): negatív 7) Keményítő hidrolízise : negatív 8) Citrát hasznosítás (Kóser, Christensen, és Simon féle tápközegben): negatív 9) Szervetlen nitrogén-források hasznosítása: i) kálium-nitrát: negatív ii) ammónium-szulfát: negatív 10) Pigmentképzés (King A és B és mannitélesztő kivonat táptalajon): diffúzióképes pigmentképzés nem figyelhető meg: llJUreáz: negatív 12) Oxidáz: negatív 13) Kataláz: pozitív 14) Szaporodási tartományok: 194 310 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4