194280. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Új, nagy hatékonyságú gonaldoliberin-analógok és az ezeket tartalmazó gyógyaszati készítmények előállítására
1 2 dot, szerves bázisként pedig trietil-amint alkalmazzunk. Az X helyén 3,5-dibróm-tirozil-csoportnt tartalmazó (I) általános képletű gonadoliberin-analógokat önmagában ismert, például katalitikus tricdálási eljárások segítségével a megfelelő triciált származékokká lehet alakítani. Az ilyen radioaktív származékok az inaktív analógoknak a szervezetben valónyomonkövetésére használhatók. A találmány szerinti eljárásban kiindulási anyagként használt, kívánt esetben védett peptideket célszerűen fragmenskondenzációval, vagy lépésenként! lánchosszabbítással állíthatjuk elő a peptidkémiában önmagában ismert módszerek alkalmazásával. A peptidlánc egyes elemeit például valamely ismert módon aktivált aminosav-származék alkalmazásával kapcsolhatjuk össze így például az a) eljárásban felhasznált (O) általános képletű peptideket egy (VI) H—Leu—Arg(0)-Pro—Y (VI) általános képletű, adott esetben védett peptid-származék — ahol Y jelentése a fenti és O nitro-csoportot vagy hidrogénatomot jelent — és egy (VII) V—Asp(OR)—OH (VD) . általános képletű, adott esetben védett aminosav-származék - ahol R és V jelentése a fenti - kondenzáltatása útján úgy állíthatjuk elő, hogy a (VII) általános képletű aminosav-származék a-helyzetű karboxű-csoportjának re akció készségét például aktív észter kép. zéssel megnöveljük, majd az így kapott aktivált származékot reagáltatjuk a (VI) általános képletű pepiiddel, majd az adott esetben jelen levő nitro-csoportot eltávolítjuk. Az a) és b) eljárás során lényegében véve azonos módon keletkezik az Asu-csoport a láncban levő — Asp(OR—, illetve —Asp—OR-csoport —OR-csoportjának kilépése mellett. A két eljárásban azonos reakciókörülményeket célszerű betartani. A találmányunk szerinti eljárással kapott (I) általános képletű peptideket kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható savakkal reagáltatva savaddíciós sóikká alakíthatjuk. Arra is van lehetőség, hogy a sók formájában*kapott (I) általános képletű peptideket a só bázissal^ történő kezelése útján szabad állapotban nyerjük ki. Az R helyén álló 1—4 szénatomos alkil-csoportok közül megnevezzük a metil-, az etil-, a n- és az i-propü-, a n-, az i-, a szék- és a terc-butil-csoportokat. Ezen alkil-csoportok előnyös képviselői a metil- és az etű-csoport. A találmányunk szerinti (I) általános képletű GnRH-analógokat önmagában ismert módon gyógyászati készítménnyé alakíthatjuk. A gyógyászati készítmények előnyösen szilárd vagy cseppfolyós halmazállapotúak lehetnek. Ezek fontosabb képviselőiként megnevezzük a tablettákat, a drazsékat, a kapszulákat, a különféle egyéb porkészítményeket, valamint a különféle injekciós infúziós és inhalációs készítményeket, a kanalas orvosságokat és a különféle borogató folyadékokat. A szuperaktív GnRH-analógok közös jellemzője, hogy a natív GnRH-hoz képest többszörös mennyiségű LH hormont szabadítanak fel, és lényegesen hoszszabb ideig is tart a hatásuk. A fentiek szemléltetésére az 1. ábrán bemutatjuk a natív és néhány szuperaktív GnRH-analóg, Valamint a találmányunk szerinti (^általános képletű GnRH-analógok néhány képviselőjének LH felszabadító hatékonyságát. A kísérleteket hím egéren végeztük, a hatóanyagokat s.c. adtuk be az állatoknak és a szérum LH tartalmát radioimmunoassay módszenei mértük. Az ábrán jól látható, hogy a szuperaktív GnRH- analógok hatásának típusa és a hatás időbeli lefutása élesen eltér a natív GnRH hatásától. Az is látható, hogy a találmányunk szerinti (I) általános képletű GnRH-analógok hatása hasonló a szuperaktív analógokéhoz. A hatásban mutatkozó eltérés magyarázata valószínűleg az, hogy a szuperaktív származékoknál megnő a biológiailag aktív konformerek relatív koncentrációja és ezek metabolikus stabilitása is nagyobb a natív anyagénál. Az I. táblázatban megadjuk az (I) általános képletű GnRH-analógok egyik előnyös képviselőjének, az Asu4, dezGly10-GnRH-etilamidnak mért adatait. I. táblázat Szérum LH-koncentráció hím egéren. Dózis: 200 ng/egér i Analóg neve Egér szérum LH [ng/ml] a kezelés után 2 4 órával 6 GnRH 85,2 81,4 87,0 D-Phe6, dezgLy10— GnRH—etilamid 648,1 131,5 67,8 D-Ser(terc-butil)*, dezGly10-GnRH-etilamid 1021,3 81,2 90,0 Asu4, dezGly10- GnRH-e tü-amid 958,4 702,3 216,2 A találmány szerinti eljárás szemléltetésére az alábbi 1-6. e) 8-9. kiviteli példákat adjuk meg anélkül azonban, hogy azok a találmányt bármilyen szempontból is korlátoznák. A példákban megadott vékonyrétegkromatográfiás Rr értékeket Merck gyártmányú „Kieselgel DC, Alufolien” lapokon határoztuk meg. Futtatásra az alábbi összetételű futtatószereket használtuk. Az összetétel adatok térfogatszázalékban értendők. 1. etil-acetát - piridin — ecetsav — víz * 60 : 20: 6:11 2. etil-acetát - piridin - ecetsav -víz « 120:20:6:11 3. ecetsav—benzol ■ 1:7 4. n-butanol— ecetsav— víz * 4:1:1 3 194.280 6 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
