194273. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorellenes vegyületek előállítására
1 2 A. l-(6-klór-9H-purin-i-il)-3,5-bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,77 g (5,0 mmól) 6-klór-purin 50 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 1,31 g (5,0 mmól) trifenil-Foszfint és 0,87 g (5,0 mmól) dietü-azodikarboxilátot adunk. Ehhez az oldathoz adjuk hozzá 1,99 g (5,0 mmól) 3,5-bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-l-hidroxi-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz tetrahidrofurános oldatát. A re akcióele gyet szobahőmérsékleten mintegy 60 óráig keverjük és további 0,66 g (1,7 mmól) 3,5- bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-l-hidroxi-2-dezoxi-2,2- difluor-ribózt adunk a reakcióelegyhez. Az elegyet további 6 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert vákuumban lepároljuk és a maradékot egy éjjelen át kis mennyiségű dietil-éterrel keverjük. A kicsapódott száraz anyagot vákuumszűréssel eltávolítjuk. A szflrletet vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 70 g szilikagélen kromatografáljuk és kloroformmal eluáljuk. A főterméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert elpárologtatva 1,0 g l-(6-klór-9H-purin-9-il)-3,5-bisz(terc-butil-dimetilsziloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt nyerünk. A termék szerkezetét NMR-rel igazoltuk. Tömegspektrum = 477 [534—(terc-butil)]. B. l-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,5-bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,5 g (0,936 mmól) l-(6-klór-9II-purin-9-il)-3,5- bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt 75 ml abszolút etanolban oldunk és 0 °C-on vízmentes ammóniával telítjük. A lombikot lezárjuk és a reakcióelegyet szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni. Szobahőmérsékleten az elegyet 72 órán át keverjük, az illékony anyagokat csökkentett nyomáson eltávolítjuk. 420 mg l-(6-amino-9H-purin-9-il)-3,5- bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt nyerünk. Tömegspektrum = 458 [515-(terc-butil)]. C. 100 mg (0,194 mmól) l-(6-amino-9H-purin-9- il)-3,5-bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt 25 ml metilén-kloridban oldunk, külső jégfürdővel kb. 0 °C-ra hűtjük és vízmentes bróm-hidrogénsav gázzal telítjük. Az elegyet 0 °C körüli hőmérsékleten mintegy 4 órán át keverjük és nitrogént buborékolta tunk át rajta. Az elegyet szűrjük, az öszszegyűlt szilárd részt metanollal mossuk. 110 mg szilárd anyagot nyerünk. Ezt nagynyomású folyadékkromatográflával tisztítva 12,1 mg béta-l-(6-amino- 9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóhoz jutunk. NMR (Cd3OD, 30 mHz, delta) 3,8-4,65 (m, 4H), 4,83 (bs, 4H), 6,33 (dd, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,4 (s, 1H). Tömegspektrum m/e = 287. 7. példa A. l-(2,6-diklór-9H-purin-9-il)-3,5-bisz(terc-butildimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-diíluor-ribóz 1,89 g (10,0 mmól) 2,6-diklór-purin 100 ml tetrahidrofurános oldatához 2,62 g (10,0 mmól) trifenilfoszfmt és 1,74 g (10,0 mmól) dietil-azodikarboxilátot adunk. Ehhez az elegyhez hozzáadjuk még 3,98 g (10,0 mmól) 3,5-bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-l-hidroxi-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz oldatát 25 ml tetrahidrofuránban és az elegyet szobahőmérsékleten egy éjjelen át keverjük. A kicsapódott szilárd anyagot vákuumszűréssel távolítjuk el és a szüredéket vákuumban bepároljuk. A maradékot 100 ml dietil-éterben feloldjuk és az oldatot szobahőmérsékleten egy éjjelen át keverjük. Az elegyet szűrjük és a szüredéket vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 25 ml etil-acetátban oldjuk és az elegyet hűtőszekrénybe tesszük. Az elegyet szűrjük és a szüredéket nagynyomású folyadékkromatográfiának vetjük alá, 4 : 1, tf : tf hexán/etil-acetát eleggyel elyálva. Az első terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert lepároljuk. 2,5 g l-(2,6-diklór-9H-purin-9-ü)- 3,5-bisz(terc-butil-dimetil-sziIoxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt nyerünk. Tömegspektrum m/e =511 = [568-(terc-butil)j. B. 1 -(2-klór-6-oxo-1 H,9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2- difluor-ribóz és l-(2-klór-6-bróm-9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,5 g (0,88 mmól) l-(2,6-diklór-9H-purin-9-il)-3,5- bisz(terc-butil-dimetil-sziloxi)-2-dezoxi-2,2-di fluor-ribóz 100 ml metilén-kloridos oldatát 0 °C körüli hőfokra hűtjük és vízmentes gázalakú bróm-hidrogénsawal telítjük. Az elegyet 0 °C-on 7 órán át keverjük, majd szobahőmérsékleten 16 órán át. Az elegyet szűrjük és a kicsapódott és kiszűrt szilárd anyagot metanolban oldjuk. A metanolos oldatot vákuumban bepárolva 160 mg l-(2-klór-6-oxo-lH,9H-purin-9-il)-2-dezoxj-2,2-difluor-ribózból és az 1-(2-klór-6-bróm- 9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózból álló világossárga szjlárd halmazállapotú elegyet kapunk. Tömegspektrum m/e = 322, illetve 386. C. l-(2-klór-6-oxo-lH,9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2- difluor-ribóz 1,18 g (3 mmól) l-(2-klór-6-oxo-lH,9H-purin-9-il)- 2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz és 1 -(2-klór-6-bróm-9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz elegyét 11 ml 1,0 n nátrium-hidroxidban oldjuk és szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük. Az elegy pH-ját 2 n sósavval 7 körülire állítjuk be. Az elegyet 45 °C körüli hőmérsékleten vákuumban bepároljuk. A maradékot meleg metanolban szuszpendáljuk, szűrjük és e műveletet megismételjük. A szüredéket egyesítjük és az oldatot 15 °C-on vákuumban bepároljuk. 1,36 g l-(2-klór-6- oxo-1 H,9H-purin-9-Ü)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt nyerünk. Tömegspektrum m/e = 322. D. Ez az l-(2-amino-6-oxo-lH,9H-purin-9-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz előnyös szintézise. A következő reakcióval előállított anyagot viszonyítási sztenderdként használtuk a következő — biológiailag értékelt — vegyület vonatkozásában: 1,3 g l-{2-klór-ő-oxo-lH,9H-purin-9-il)-2-dezoxi- 2,2-difluor-ribóz 30 ml abszolút etanolos szuszpenziójához 0 °C-on vízmentes ammóniát adunk. Az elegyet zárt edényben egy éjjelen át 150 °C-on tarjjuk. Az elegyet lehűtjük és a kivált szilárd anyagot kiszűrjük. A kiszűrt anyagot 15 ml forró metanolban szuszpendáljuk és az elegyet ismét szüljük. A szüredéket vákuumban bepároljuk és a maradékot eluálószerként 194 273 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
