193936. lajstromszámú szabadalom • Fusarium oxysporum lipázt tartalmazó mosószer adalékanyag

193936

Aï 500 literes lő fermentórba az alábbi táptalajt készítjük el:

melegített, hántolt szójaliszt glükóz szója-olaj

KHjpOi

NbjHPOí.^HíO

39 kg 15 kg 3 kg 0,6 kg 1.2 kg

Pluronic habzósgátló 30 ml

Annyi vizet adunk hozzá, hogy a térfogat körülbelül 250 1 legyen. A szójabab lisztet vízben azuszpendéljuk. A pH érteket nátrium* karbonát segítségével 8,0 értékre állítjuk be és a hőmérsékletit 50*C-ra ■ emeljük. Ezután körülbelül 480 Anson Egység Alcalase-t (4 AU/ml) adunk a szuszpenzióhoz. Az elegyet 4 órán át 50°C-on, pH=8,0 értéken (nátrium-karbonát beadagolás) tartjuk levegőztetés nélkül, O* és 150-200 ford/perc keverés mellett. Ezután a többi táptalaj komponenst is hozzáadjuk az elegyhez és foszforsavval a pH értéket 6,5-re illttjuk be. A táptalajt 1 órán ét l2l°C-on gőzzel sterilizáljuk. Lehűtjük 34°C-ra és pH értékét sterilizált nátrium karbonát oldattal (3 kg nátrium-karbonát 20 1 teljes térfogatban) 6,0-ra állítjuk be. Az inokulálés előtt a végtérfogat körülbelül 280 liter. Ezután 25 1 oltó kultúrát inokulálunk a táptalajba. A fermentáció körülményei:

Fermentor-tlpusa: szokásos levegőztetett és kevert fermentor, magasság/átmérőarány körülbebetíil 2; .

Keverés: 150 ford/perc (0-tól 6-óráig) és 400 ford/perc (6 órától a fermentáció végéig) (két turbina impeller); Levegőztetés: 200*250 normál 1 /perc (0-tól 22-óráig) és 300 normál 1/perc levegő (22 órától a fermentáció végéig); Hőmérséklet: 34°C

Nyomás: 1,0 att (0-tól 34-óráig) és

0,5 at1 (34 órától a fermentáció végéig);

Idő: 112 óra

A túlzott habzás elkerülése érdekében a keverés, levegőztetés és nyomás változtatható. A feni leírt fermentáció során ezt a lehetőséget ki is használjuk, mint ahogy azt a megadott adatok mutatják,

A fermentáció pH értékét foszforsav beada? goiással kÖrü|belfil 6.5 értéken tartjuk. A fent leírt fermentáció Során a 30. órától kezdve a fermentáció végéig kell foszforsav beadagolást végezni. A foszíorsav oldatot 600 literes adagoló tartályban készítjük az alábbi módon: 20 kg tömény (80 %-os) foszforsávhoz annyi csapvizet adunk, hogy az Össztérfogal körülbelül 160 liter legyen. Az oldatot 1 órán át 121°C-on az adagolótartályban gőzzel sterilizáljuk, A végtérlogat az adagolás megkezdése előtt körülbelül 200 liter. A fő fermentórba csak a pH 6,5 érték fenntartásához szükséges' foszforsavoldatot adagoljuk be.

A fermentáció során sterilizált P2000 hal>zásgátló anyag (propijénglikol) beadagolást

10

15

20

29

30

3S

40

45

60

.55

60

85

végzünk a fő fermentórba, hogy a habzást megakadályozzuk. A leírt fermentáció során 3,5 1 P2000 anyagot használtunk.

A fermantáciot 112 óra után leállítjuk. A fő fermentor körülbelül 315 l fermentlevet tartalmaz és a kapott lipázhozam körülbelül 200 LU/g fermentlé, amit a NGVO-LU, No. 95/5-GB mérési eljárással tributirin szubsztrát alkalmazásával határozunk meg.

18. példa

A 17. példa szerint járunk el és iipázt állítunk ele azzal az eltéréssel, hogy a fermentációt 2500 literes fő fermentórba végezzük, megfelelően nagyobb táptalaj-mennyiség alkalmazásával.

Keverés: 250 ford/perc (két turbina impeller) ;

A túlzott habzás elkerülése érdekében a levegőztetést és a nyomást az alábbi módon változtatjuk:

Levegőztetés: 760 normál 1/perc levegő (0-13

óra);

1200 normál 1/perc levegő (13- -37 óra);

1500 normál l/perc levegő (37- -a fermentáció végéig);

Nyomás: 0,7 att (0-25 óra);

0,5 alt (25- a fermentáció végéig) •

A fermentáció során nem adagolunk P2000 habzásgátló anyagot a táptalajhoz. A fermentációvégén a fermentor 1800 liter fermentlevet tartalmaz és a lipá2hozam 125 LU/g fermcntlé.

19. példa

A 17. példa szerinti eljárással Iipázt állítunk elő, azzal az eltéréssel, hogy a fermentációt 2500 literes fő fermentorban, a megfelelően nagyobb táptalaj térfoga(mennyiségekkel végezzük, és a szójaliszt Alcalase-zal való kezelését elhagyjuk. 200 kg szójalisztet alkalmazunk és inokulálás előtt a térfogat 1400 liter A táptalajt a fő fermentorban gőzzel 1,5 órán át 123°C-on sterilizáljuk.

Keverés: 250ford/perc (két turbina impeller); A túlzott habzás elkerülésére a levegőztetést es a nyomást az alábbi módon változtatjuk: Levegőztetés: 750 normál 1/perc levegő (0-3 óra)

900 normál 1/perc levegő (3-11 óra)

1100normál 1/perc levegő (ü-24 óra)

1300 normál 1/perc levegő (24- -27 óra)

1500 normál 1/perc levegő (27- a fermentáció végéig) ;

Nyomás: 1,0 att (0-27 óra)

0.75 att (27-40 óra)

0,5 att (40- a fermentáció végéig),.

A fermentáció során, nem alkalmazunk P2000 habzásgátló anyagot. A fermentáció

10