193936. lajstromszámú szabadalom • Fusarium oxysporum lipázt tartalmazó mosószer adalékanyag
végén a 16 fermentor körülbelül 1500 liter fermentlevet tartalmaz, és a Hpázhozam 198 LU/g fermentlé. A fermentáció ideje körülbelül 140 óra. 5 193936 11 20. példa A 17, példa eljárása szerint lipázt állítunk elő. azzal az eltéréssel, hogy a fermentációt 2500 literes fö fermentorban végezzük, valamint megfelelően nagyobb táptalajmennyiséget és térfogatokat alkalmazunk. A szójaliszt Alcalase-val történő kezelést elhagyjuk. 170kg szójalisztet alkalmazunk és az inokutálás előtti térfogat 1400 liter, A táptalajt a fő fermentorban 1,5 órán át 123ôC-on gőzzel sterilizáljuk-Keverés: 250ford/perc (kétturbina impeller); A túlzott habzés megakadályozására a levegőztetést és a nyomást az alábbi módon változtatjuk: Levegőztetés: 750 normát levegő 1/perc (0- -11 óra) 1150 normál levegő 1/perc (11- -19 óra) 1300 normál levegő 1/perc (19- -27 óra) 1500 normál levegő 1/perc (27- * a fermentáció végéig); Nyomás: 1,0 att (0-27 óra) 0,5 alt (27- a fermentáció végétg). iCIÓ ! A fermentáció során 0,6 liter P2000 habzásgátló anyagot alkalmazunk, A fermentáció befejezésekor a fermentor körülbelül 1400 liter, táptalajt tartalmaz, és a lipázhozam körülbelül 221 LU/g táptalaj. A fermentáció ideje körülbelül 144 óra. 10 15 20 25 30 35 21. példa 40 A 17. példa szerinti eljárással lipázt állítunk elő azzal a különbséggel, hogy a fő fermentor táptalajában a szójaliszt koncentrációt 5t %-ra csökkentjük,és nem alkalmazunk Alcalase kezelést a szójaliszlre. 45 A túlzott habzás elkerülése érdekében a keverést az alábbi módon változtatjuk: Keverés: 0 ford/perc (0-22 óra) 100-150 ford/perc (22-33 óra) 300 ford/perc (33- a fermentáció 50 vegéig). A fermentáció során nem atkaimazunk P2000 habzásgétló adalékanyagot. A fermentáció befejezésekor a fermentor körülbelül gB 310 I fermentlevet tartalmaz,és a lipáz hozatn körülbelül 146 LU/g fermentlé. 22. példa • A 17. példa szerinti eljárással lipázt ÔIII-/ 60 tunk elő azzal a különbséggel, hogy a fői,' fermentor táptalajában a szójaliszt koncentré- " ciót 51 %-ra csökkentjük, nem alkalmazunk^ Atcatase kezelést a szójalisztre, a kezdeti'1 fermentációs táptalajban nem alkalmazunk *5 szója-otnjat, hanem ehelyett a fő fermentor . 9 táptalajba adagolunk 1-1 literes adagokban a 48., 60., 72. és 84. fermentációs órában, összesen 4 liter sterilizált szója-olajat. A túlzott habzás elkerülése érdekében a keverést, levegőztetést és a nyomást az alábbi módon változtatjuk: Keverés: 200*300 ford/perc (0-24 órá) 400 ford/perc (24- a fermentáció végéig) ; Levegőztetés; 150 normál 1 levegő/perc (0- -17 óra) 250 normál 1 levegő/perc (17- -26 óra) 300 normál I levegő/perc (25- a fermentáció végéig) ; Nyomás: 0,9-1,0 alt (0-33 óra) 0,5 att (33-‘ a fermentáció végéig). A fermentáció során 2 liter P200O habzasgátló adalékanyagot alkalmazunk. A fermentáció befejezésekor a fermentor körülbelül 285 1 fermentlevet tartalmaz és a lipázhozam körülbelül 285 1 fermentlevet tartalmaz és a lipázhozam körülbelül 113 LU/g fermentlé. 12 23. példa A 19. példában kapott fermentlé pH értékét nátrium-hidroxiddal 8,0 érlékre állítjuk be, majd I t% kálcium-klorid, 1 t% Servamln, KZA 346 (Servo). 0,03 t% Superfloe, A-130 (American Cyanemid) és 0,5 t% Triton X-10Ö (Rohm and Haas) segítségével flokkuláljuk. A kicsapott fermentlevet tárcsa centrifugán (Westfaiia SAMS) centrifugáljuk. A centrifugált lé pH-ját ecetsavvaí 4,5 értékre állítjuk be, ekkor csapadék válik ki. A csapadékot centrifugálással (Westfaiia SAMS) elválasztjuk a felülúszótól, majd Triton X-100-al kezeljük. A kezelt csapadékot ezután vízzel hígítjuk és újra centrifugáljuk. A két centrifugálás során kapott felúszót egyesítjük és a második centrifugálás során kapott iszapot eldobjuk. A felüiúszót dializáljuk (DDS-egység GR60P membránok) és ezután ultraszüréssel betőményltjük. Az ultraszürt koncentrálumot monopropllén szöveten szűrjük Hy-flo-supercell (Johns Manville) szűrési segédanyag alkalmazásával. A szürlet pH értékét nátrium-hidroxid segítségével 8,0 értékre állítjuk be. majd Supra 100 szűrőlemezeken (Seilz) szűrjük, végül baktérium-szűrők Supra EKS (Seitz) segítségével. A baktérium-szűrlctet azonos térfogatú acetonnal kicsapatjuk és tiszta acetonnal mossuk. A csapadékot vákumban megszárítjuk. A kapott száraz koncentrátum körülbelül 90,000 LU/g aktivitású. 24. példa A Fusarium oxysporum Hpáz mosási hatásossága más lipázokkai összehasonlítva. v 7
