193769. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a nátriumion kicserélésén alapuló egyéb, gyógyászatilag elviselhető, az injekciós célokat is kielégítő heparinátok előállítására
193769 4 Az ismert eljárások tehát a heparinát kationjának kicserélését vagy kationcserélő gyanta alkalmazásával „irreverzibilis" folyamat útján érik el, vagy „reverzibilis” folyamatok egymásutánjával, ahol az egyes lépésekben elért egyensúlyi állapotot a heparin „vegyes" sójának leválasztásával rögzítik, és ebből az állapotból kiindulva újabb reverzibilis folyamat segítségével igyekeznek az egyensúlyi állapotot a kívánt mértékben eltolni. A találmány célkitűzése olyan eljárás kidolgozása, amely, — a heparin kationjának kicserélését — a bomlékony heparin sav képzésének elkerülésével — egy átmeneti vízoldhatatlan fázistermék előállításával irreverzibilissé teszi, s a keletkezett fázistermékből a kationcsere egy lépésben teljes kvantitativítás mellett elvégezhető, — nemcsak gyógyszerkönyvi minőségű heparinátból, hanem a heparingyártás pirogénmentesítési lépését követő bármely vizes oldatból végrehajtható, és — alkalmas a kationcsere mellett a heparin további tisztítására, valamint specifikus aktivitásának növelésére is. Találmányunk azon a felismerésen alapul, hogy az ismert és egyéb célokra már alkalmazott karbotetradecil-oximetil-trimetil-ammónium-klorid (188 537 számú magyar szabadalmi leírás) és a benziI-dimetil-2- (2-p-1,1,3,3-tetrametil-butil-fenoxi (etoxi jetii-ammónium-k lórid (2 989 438 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) kvaterner-ammónium kationjai megfelelő körülmények között alkalmasak a heparinátok (pl. nátrium-heparinát) kationjainak kicserélésére is, és ez.a folyamat a heparin-kvaterner-amin komplex vízoldhatatlan jellegénél fogva irreverzibilis, tehát a kationcsere kvantitatívvá tehető. A képződött heparin-kvaterner-amin komplexből a később ismertetésre kerülő körülmények mellett a heparin kívánt, gyógyászatilag elviselhető sója ugyancsak irreverzibilis kationcserével úgy állítható elő, hogy a kapott heparinát gyakorlatilag csak a kívánt kationt tartalmazza. A találmány szerinti eljárásban tehát a kationcserét (pl. a nátriumion kicserélését kálciumkationra) két, egymást követő irreverzibilis folyamattal valósítjuk meg. A találmány eljárás a nátriumion kicserélésén alapuló nátriumsótól eltérő gyógyászatiig elviselhető-, injekciós célokat is kielégítő heparinátok előállítására karbotetradecil-oximetil-trimetil-amin- vagy benzil-dimetil-2- -(2-p-i,l,3,3-tetrametil-butil-fenoxi(etoxi)etil-amin kvaterner ammonium sójával történő komplex képzés útján, oly módon, hogy — a gyógyszerkönyvi előírásokat kielégítő-, vagy pirogénmentes, adott esetben nehézfémsót és inaktív heparinoid-frakciókat is tartalmazó nátrium-heparinát 500—10000 E/ml koncentrációjú oldatához 1,0—2,0 g/105 I.U. heparin-, előnyösen a potenciometrikus-gör-3 be inflexiós-pontjának — az aktív antikoaguláns potenciálnak — megfelelő mennyiségben egy fenti kvaterner-ammónium só 5— 15 m/v%-os oldatát adjuk, — a kivált heparin-kvaterner-amin komplexet elválasztjuk, majd pirogénmentes vízzel tisztítjuk, — a tisztított heparin-kvaterner - amin komplexet egy vízzel nem-, vagy víz2el korlátoltan elegyedő szerves oldószerben feloldjuk, majd — az oldathoz keverés közben az előállítandó heparinát kationjainak megfelelő só 0,3—1,0 mól-koncentrációjú vizes oldatát adjuk, a két fázist elválni hagyjuk, majd elválasztjuk, adott esetben a heparinát vizes oldatát tisztítjuk, majd — ezt követően a keletkezett heparinátot egy vízzel elegyedő szerves oldószerrel kicsapjuk, majd a heparinát csapadékot mossuk, végül ismert módon kinyerjük. A találmányunk szerinti eljárás első lépésében a heparinát pirogénmentes vizes oldatához, — mely az előző technológiai lépésektől függően a heparinát anionon kívül általában nátrium-kationt, de egyéb kationokat és anionokat is tartalmazhat, — a már említett kvaterner-ammónium só egyikének vizes oldatát adagoljuk, amely vizes közegben jól disszociál, és amelynek kvaterner-ammónium kationja a heparinát anionnal vízoldhatatlan komplexet képez. Az előzőekben vázolt folyamatot az alábbi egyszerűsített reakcióegyenlettel szemléltetjük: [Hep'-j +n[K, + ] + n [K2+] +n [A>-^ —*Hep/K2/n + n[K,+] + n [A ] [Hep"'] = a heparinát anion, [Ki ] = heparin eredeti kationja, (általában nátriumion, de egyéb, többértékű kation is lehet). [K2+) = a kvaterner-ammónium kation, amely a heparinátanionnal vízoldhatatlan sót képez, [A'] = K2+ eredeti halogenid (általában klorid- vagy bromidion), n —a heparinátanion negatív töltéseinek száma. Mivel a keletkező heparin-kvaterner-amin komplex vízoldhatatlan, ezért a reakció kvantitative a nyíl irányában megy végbe. A közegben esetenként jelenlévő egyéb kationok és anionok a folyamat lejátszódását nem befolyásolják. A kivált heparin-kvaterner-amin komplex csapadékot elválasztjuk, majd ion- és pirogénmentes vízzel tisztítjuk. A technika állása szerinti reverzibilis eljárás lassú egyensúlyi műveleteivel szemben a találmányunk szerint kivitelezett ioncsere pillanatszerűen játszódik le, és a kationok eltávolítása a hosszadalmas és nehézkes dialízis helyett egyszerűen szeparálási és mosási technikával megoldható. Felismertük továbbá, hogy a heparin-kvaterner-amin komplex leválasztási művelete műszeresen ellenőrizhető, ami lehetőséget nyújt 3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
