193746. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,4-dihidropiridin-származékok előállítására
193746 2H2; 0,42 mmól/l Na2HP04.H20; 11,9 mmól/ /I NaHC03; 5 mmól/l glükóz (Furchgott és Bhadakrom, 1956). 45 perc stabilizációs időszak után, 2 g terhelés mellett az aorta maximális összehúzódását 80 mmól/l végső koncentrációt biztosító mennyiségű KCl-nak a fürdőbe adagolásával váltjuk ki. Az összehúzódások stabilizálódása után a találmány szerint előállított vegyületeket vagy a pozitív kontrollként alkalmazott nifedipint adtuk halmozódóan a fürdőbe. Az adagolások között a relaxáció stabilizálódásának biztosítására legalább 10 perc szünetet tartunk. A találmány szerint előállított vegyületekből 1 mg/ /ml-es etanolos törzsoldatot készítünk. Ebből sóoldattal 10'10 — 10~6 mól/l-es oldatokat készítünk a vizsgálathoz. Az 50%-os gátlást kiváltó koncentrációkat (IC 50) regressziós’ analízissel határozzuk meg. 2. In vivo vizsgálat A szisztolés vérnyomást éber, spontán magasvérnyomású patkányok (SHR) farkán mérjük felfújható gumi mandzsettával és LE 5000 digitális nyomásmérővel (Letica Instruments, Barcelona, Spanyolország). A mérést a vizsgálandó anyagok beadása előtt, majd beadásuk után 30 perc, 1, 2, 6 és 24 óra múlva mérjük. A mérés alatt az állatokat előre melegített műanyag hengerekben tartjuk. A 160 Hgmm-nél alacsonyabb vérnyomású állatokat nem vonjuk be a vizsgálatba. Minden vegyületet 5 állaton vizsgálunk. A 11 találmány szerint előállított vegyületeket és a pozitív kontrollt is orálisan adjuk be 5%-os akácmézgás szuszpenzió formájában. Az 1. táblázatban patkány aorta 80 mmól/ 5 /I kálium-kloriddal kiváltott, összehúzódására kifejtett in vitro hatást mutatjuk be. A táblázatból látható, hogy a metil-etil-észter-származékok közül a 2. számú vegyület a legaktívabb, IC 50 = 3,5.10 9 mól/1 értékkel, 10 ugyanebben a vizsgálatban a nifedipinre az IC 50 = 7,5.10"9 mól/l, azaz aktivitása kisebb a 2. számú vegyület atkivitásának felénél. Az 1. számú vegyület, amely ortohelyzetü metoxi-metoxi-helyettesítőt tartalmaz, vala- 15 mint a 3. számú vegyület meglehetősen hatásosnak bizonyulnak. A 2. számú vegyület származékai közül az aszimmetrikus vegyületek a leghatásosabbak. Ez valamennyi 1,4-dihidro-piridin kalcium-antagonistára érvényes, a 20 szimmetrikus vegyületek általában kevésbé hatásosak, mint az aszimmetrikusak. A 10. számú vegyület a 2. számú vegyülethez hasonlóáh aktív, IC 50 értéke 2,1.10 9 mól/1. A 2. táblázatban az SHR patkányok vér- 25 nyomására kifejtett hatást mutatjuk be. Ebben a vizsgálatban az 5. számú vegyület (8 mg/kg p.o. adagolás mellett) a nitrependinének (8 mg/kg p.o.) megfelelő aktivitású, a SHR patkány vérnyomását 30%-kal csök- 30 kenti. A 3. számú vegyület, amely in vitro meglehetősen aktív, gyenge vérnyomáscsökkentő hatást fejt ki, míg az 1., 5. és 10. számú vegyületek in vivo hatásosnak bizonyulnak. 12 f 1 . táblázat A találmány szerint előállított vegyületek in vitro aktivitása KCl-dal depolarizalt patkány aortara Vegyület szama 1QB IC Ri R, x 10'B >-metoxi hidrogén etil metil 1. 836 V 1,2 metilén-dioxi etil metil 2. 837 V 0,31 etilén-dioxi etil metil 3. 838 V 4,5 metilén-dioxi metil metil 4. 841 8,3 metilén-dioxi izobutil metil 5. 842 1,2 metilén-dioxi metoxi-etil izopropil 6. 843 9,2 metilén-dioxi izopropil izopropil 7. 844 >10 metilén-dioxi metil Izopropil 8. 845 3,4 metilén-dioxi etil etil 9. 845 >10 metilén-dioxi etil izopropil 10. 847 0,21 metilén-dioxi metoxi-etil metoxi-etil 11. 848 >10 metilén-dioxi metil 2-piridil -metil 12. 849 >10 Nifedipin 0,71 n *— • táblázat 2. táblázat (folytat A találmány szerint előállított vegyületek vérnyomáscsökkentő hatosa SHR patkányokra (8 mg/kg p.o. dózis, n = 5) Vegyület a vérnyomáscsökkenés maximuma Hgmm % 1. 2. 34 65 15,2 33 55 60 65 Vegyület a vérnyomáscsökkenés maximuma Hgmm % 3. 12 7,2 5. 48 23,5 8. 10 5,2 10. 62 32,4 nitrendipin 54 26,3
