193738. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glioxilil-spermidin előállítására
193738 1,007 g (2,985 mmól) N- [4- (3-amino-propil)-amino-butil]-borkősav-monoamid (I). acetâtot 80 ml térfogatú vízben oldunk,és az oldathoz szobahőmérsékleten keverés közben, cseppenként 650 mg (3,04 mmól) nátrium-metaperjodát 20 ml vízben elkészített oldatát adjuk. A becsepegtetés után a keverést 30 percen keresztül folytatjuk, majd a reakcióelegyet 300 ml térfogatú CM-SephadexR (Na+) gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül, majd az oszlopot 1 liter vízzel mossuk,és az anyagot grádiens elúciós módszerrel 1,5 liter víz és 1,5 liter 1M. vizes nátrium-klorid-oldat elegyével eluáljuk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat öszszegyűjtjük, csökkentett nyomáson szárazra pároljuk, metanollal extraháljuk és a metanolos extraktumokat 300 ml térfogatú SephadexR LH-20 gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül és metanollal eluáljuk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson történő bepárlás után szirup formában 681 mg glioxilil-spermidin (II)• dihidrokloridot kapunk. Kitermelés: 78,1%. 3. példa 1. N,N’-bisz [4- (2-ciano-etil) -amino-butil] --borkősav-amid (XIII) előállítása 15,45 g (0,075 mól) (XII) képletű dietil-L-tartarátot cseppenként 23,31 g (0,165 mól) ciano-etil-putreszcinhez (V) adunk, majd a becsepegtetés után a kapott reakciókeveréket 2 órán keresztül 80°C hőmérsékleten keverjük. Hűtés után (jég) kivált csapadékot acetonnal mossuk és ily módon 29,64 g N,N’-bisz [4- (2-ciano-etil) - amino-butil] -borkősav-amidot (XIII) kapunk, nyers sárga kristály lemezkék formájában. Kitermelés: 99,8%. A kapott kristályokból 5 g-ot 20 ml 0,5M vizes nátrium-klorid oldatban oldunk, és a kapott oldatot 1,5 liter térfogatú DIAIONR HP-20 (Mitsubishi Chemical Industries, Ltd.) gyantával töltött oszlopon vezetjük keresztül az'equlibrálást 0,5M vizes nátrium-klorid oldattal végezzük és 10 liter vízzel, 5 liter 5%-os vizes metanollal és 5 liter 20%-os metanollal eluálunk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson történő bepárlás után fehér kristályok formájában 3,1 g N,N-bisz [4-(2- -ciano-etil)- amino-butil] - borkősav-amidot (XIII) kapunk. Kitermelés: 61,9%. NMR (DMSO-ds) : 6 1,3-1,7 (CH2x4), 2,4-2,9 (CH2N x 6, CH2CNx2), 3,3-3,7 (NHx2, OHx2), 4,20 (CHx2), 7,60 (CONHx2). IR (KBr) : v (cm“1) 3370, 2905, 2220 (CN), 1640, 1520, 1455, 1125. 2. N,N’-bisz [4- (3-amino-propil) - amino-butil]-borkősav-amid (I) előállítása Az 1. pontban leírtak szerint előállított 19,8 g (50 mmól) N,N’-bisz [4-(2-ciano-etil)-9 6-amino-butil]-borkősav-amid (XIII) nyers kristályokat 450 ml metanol és 33 ml víz elegyében oldjuk, majd jeges hűtés közben részletekben, 28,55 g (120 mmól) CoCl2.6H20-t és 22,71 g (600 mmól) nátrium-bórhidridet adagolunk. A nátrium-bórhidrid adagolása után a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1,5 órán keresztül keverjük, majd 700 ml vizet adagolunk és a pH-t 6n sósavval pH=6,5 értékre állítjuk. A kivált fekete szilárd anyagot kiszűrjük, és a szürletet a metanol eltávolítása céljából csökkentett nyomáson bepároljuk. A bekoncentrált párlási maradékot vízzel 400 ml össztérfogatra hígítjuk. Az ily módon kapott oldatból 40 ml 500 ml térfogatú CM-SephadexR C-25 (Na+) gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül és 3 liter víz és 3 liter 1,5M vizes nátrium-klorid-oldat elegyével grádiens elüciót végzünk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, csökkentett nyomáson szárazra pároljuk, metanollal extraháljuk, és a metanolos extraktumot 500 ml térfogatú SephadexR LH - 20 gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül és metanollal eluálunk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson történő szárazra párolás után szirup formában 1,65 g N,N’-bisz [4-(3- -amino-propil) -amino-butil]- borkősav-amid ( I) - tetrakloridot kapunk. Kitermelés: 60,0%. NMR (CD3OD): 6 1,5-2,4 (CH2x6), 2,9-3,4 (NCH2x8), 4,45 (CHx2) IR (KBr): v (cm'1) 3380, 2950, 2800, 1640, 1540, 1460, 1125, 1070, 750. 3. Glioxilil-spermidin (II) előállítása 16,04 g (75 mmól) nátrium-metaperjodátot tartalmazó vizes oldatot cseppenként 45 mmól nyers N,N’-bisz [4-(3-amino-propil)-amino-butil] -borkősav-amid (I) .tetrahidroklorid (előállítva a 2. pont szerint) 300 ml vizes oldatához adunk. A kapott reakciókeveréket 2 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakció lejátszódása után 4,5 g (30 mmól) L-borkősavat adagolunk, a keverést 15 percen keresztül folytatjuk,és a kivált sárgás-zöld terméket kiszűrjük. A szűrlet pH-értékét 2n nátrium-hidroxiddal pH=5,0 értékre állítjuk és 1000 ml térfogatú CM-Sephadex C-25 (Na+) gyantával töltött oszlopon vezetjük keresztül, ezután az oszlopot 3 liter vízzel mossuk és 1 liter víz és 3 liter 0,6M vizes nátrium-klorid-oldat elegyével grádiens elúciót végzünk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük, csökkentett nyomáson szárazra pároljuk és metanollal extrahálunk. A metanolos extraktumot 1000 ml térfogatú SephadexR LH-20 gyantával töltött oszlopon bocsátjuk keresztül, metanollal eluálunk. A célvegyületet tartalmazó frakciókat összegyűjtjük és csökkentett nyomáson történő bepárlás után 8,23 g szirup formájú glioxilil-spermidin (II) • dihidrokloridot kapunk. 10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6C 65
