193737. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzferrin-indol-dihidroindol alkaloid-származékok előállítására
193737 1 A találmány tárgya eljárás új transzferrin-indol-dihidroindol alkaloidszármazékok előállítására, melyek értékes citotoxikus hatóanyagok. Az elmúlt évek során megkíséreltek citotoxikus (sejtmérgező) anyagokhoz kovalensen kötött ellenanyagokat használni a célsejtekre kifejtendő szelektív hatás elérése, és a citotoxikus szerek egyébként viszonylagosan aspecifikus hatásának megakadályozása vagy legalább is lényeges csökkentése céljából. Az ellenanyaghoz kötött citotoxikus szerek alkalmazásáról Ghose és munkatársai (J. Natl. Cancer Inst. 61, 657—676 /1978/) adnak áttekintést. Bár sok erőfeszítést tettek már ellenanyagoknak sejtirányító célokra való felhasználására — különösen a ma már hozzáférhető monoklonális ellenanyagokat illetően —, a kutatás folytatódik más, élő sejteket irányító részek felfedezése céljából. Találmányunk tárgya ilyen sejtirányító részt tartalmazó készítmények előállítása. A 124 502 számú európai szabadalmi leírás vinblasztin és bizonyos proteinek, például bovin szérumalbumin, humán albumin, fetuin és immunglobulinok konjugátainak előállítását ismerteti. E proteinek azonban nem sejtspecifikusak, így a hatóanyag nem kötődik megfelelően a kívánt helyhez. A transzferrin keringő glikoprotein, amely a vérben a vasat szállítja, és szerepet játszik az új hemoglobin molekulák képződéséhez vezető mechanizmusban, A tranázferrin vasat visz be a sejtekbe a sejtfelszíni transzferrin-receptorokon keresztül. A sejtfelszínen lévő transzferrin-receptorok száma függ a sejttípustól, és igen változó. Mégis, általában az erősen proliferáló sejtek nagyobb számú transzferrin-receptorral rendelkeznek. Nagyszámú transzferrin-receptort tartalmazó sejttípust képviselnek általában a daganatsejtek, különösen a leukémia sejtek. A találmány alapját a fenti feltételezés képezi. A találmány szerint vinka alkaloidhoz kovalensen kötött transzferrint tartalmazó, sejtcélzó készítményt állítunk elő. Közelebbről (I) általános képletü (R-O-CO-X-CO) „-transzferrin vegyületeket állítunk elő, ahol R-O-a (II) általános képletü vinka alkaloidrészt jelenti, melyben R7■' karbamoil- vagy metoxi-karbonil-csoport, X jelentése 1—4 szénatomos alkiléncsoport, és n = 15—25. A találmány szerint egy (III) általános képletü RO-CO-X-CO-Z (III) vegyülettel reagáltatunk melyben R és X jelentése a fenti, és Z kilépőcsoportot jelent. A találmány szerinti készítmények egyik alapvető komponense a vinka alkaloid. A Vin-2 2 ca rosea-ból nyerhető alkaloidok a kísérletes emlős-tumorokat gátló szerek egyik rendkívül hatékony forrását képezik. Kezdetben csak a vinka növény leveleiből kivont és kromatográfiával tisztított néhány alkaloidot találták hatásosnak. A vinka növényből közvetlenül kinyerhető ezen aktív daganatgátló alkaloidok közé tartozik a VLB (vinblasztin, vinkaleukoblasztin), vinkrisztin (leurokrisztin), leurozin (vinleurozin), leurozidin (vinrozidin), leuroformin (formil-leurozin) és dezoxi-VLB „A" és „B” (4’-dezoxi-VLB és 4’-dezoxi-leurozidin). A fentebb leírt vegyületeket a találmány szerinti készítményekben használt vinka alkaloidok meghatározásához alapul véve, a (IT) általános képletü, a kiindulási anyagokként felhasználandó 4-dezacetil-indol-dihidroindol alkaloidokat szimbolizálja. Ha a fenti általános képletben R7 -COOCH3 csoportot, R2 metilcsoportót, R3 hidroxilcsoportot, R4 etilcsoportot, és R5 hidrogénatomot jelent, a vegyület 4-dezacetil-vinblasztin, és, ha R7 -CONHo csoportot, R2 metilcsoportot, R3 hidroxilcsoportot, R4 etilcsoportot és R5 hidrogénatomot jelent, a vegyület vindezin (4-dezacetil-VLB-3-karboxamid. A 4-dezacetil-származékok kiindulási alkaloidjaira vonatkozó irodalmi hivatkozások a következők: leurozin (3,370,057 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), VLB (3,097,137 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), leurozidin (vinrozidin) és leurokrisztin (vinkrisztin) (3,205, 220 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), dezmetil-VLB (3,354,163 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), vindezin és egyéb 3-karboxamidok (4,203,898 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), vinblasztinsav és vinkrisztinsav (4,012,390 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), 4’-epivinkrisztin (4,143,041 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), leuroformin és formil-leurozin (4,279,816 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) és dezoxi-VLB „A” és „B” (Tetrahedron Letters 783 /1958/). A találmány szerinti készítmény másik komponense a transzferrin, előnyösen humán (emberi) transzferrin. E vegyület kereskedelmileg könnyen beszerezhető például a Sigma cégtől (Sigma Chemical Company, St.Louis, Missouri). A találmány szerint előállított vegyületekben — átlagosan — egy molekula indol-dihidroindol alkaloid van jelen transzferrin-molekulánként, úgyhogy az alkaloid és a transz-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
