193696. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az új SB 22484 antibiotikum-komplex előállítására
193696 hosszabb időn át hatékony vérszintet tartsunk fenn. A gonorrhea kezelésében ezenkívül előnyösen a késleltetett hatású parenterális adagolási formát alakalmazzuk. A késleltetett hatású készítmények a szakember számára ismert különböző mechanizmusok alapján és módszerek segítségével állíthatók elő. Egy kitüntetett módszer szerint az SB 22484 antibiotikumot tartalmazó, nyújtott hatású készítmények előállítására ennek az antibiotikumnak valamely vízoldhatatlan sóját — amilyen pl. a benzatin-, prokain-, hidrabamin- stb. só— alkalmazzuk, vizes vagy olajos közegben szuszpendálva. Ezek a sók, i.m. bevitel során, ténylegesen nagyon lassan szabadulnak fel, alacsony vízoldhatóságuk miatt, és így az antibiotikum tartós vérszintjeit eredményezik. Gyógyszerkészítmények előállítása l.m. injekció céljára szolgáló egység-adagolási alakot úgy állítunk elő, hogy az SB^ 22484 antibiotikum prokain-sójából 2000 mg-ot 3 ml finomított amerikai mogyoró olajban szuszpendálunk, amelyet 2% alumínium-sztearáttal szilárdítunk. l.m. injekció céljára szolgáló egység-adagolási alakot állítunk elő úgy, hogy 250 mg SB 22484 antibiotikumot 5 ml, következő öszszetételű oldószerben oldunk: 40% propilénglikol, 10% etanol, 0,5% (s/térf.) trihidroxi-metil-aminból 50%. I.m. injekció céljára szolgáló egység-adagolási alakot állítunk elő 5 ml, 8% propilén-glikolt tartalmazó steril USP oldat és3500mg SB 22484 antibiotikum felhasználásával. I.m. injekció céljából egység-adagolási alakot állítunk elő oly módon, hogy az SB 22484 antibiotikum nátrium-sójából 2000 mg-ot 5 ml steril pro inj. vízben szuszpendálunk. A következő példákat abból a célból mutatjuk be, hogy a találmányt részletesebben szemléltessük, ezek azonban nem tekinthetők a találmány, oltalmi körét korlátozó jellegűnek. 1 1. példa. Az antibiotikum előállítása Felnyitunk egy liofilizált kémcsövet, amely a Streptomyces sp. NRRL 15496 tenyészetét tartalmazza, és tartalmát steril körülmények között átvisszük egy ferde zabliszt-agar kémcsőbe. 10 napi, kb. 28°C-on végzett inkubálás után a ferde tenyészetet desztillált vízben szuszpendáljuk és a szuszpenzióval 500 ml-es terelőlapot Erlenmeyer lombikokat oltunk be, amelyek 100 ml, következő összetételű táptalajt tartalmaznak: 13 marhahúskivonat 5 g pepton 5 g enzimes kazein-hidrolizátum 3 g élesztőkivonat 5 g NaCl 1,5 g dextróz 20 g desztillált víz 1000 ml. A lombikokat 28°C-on kb. 48 órán át inkubáljuk, 220 ford./perc mellett. 1 lombik tartalmát egy 10 literes fermentor beoltására használjuk fel, amely 6 liter, a következő összetételű fermentációs táptalajt 14 tartalmaz: marhahúskivonat 4 g pepton 4 g NaCl 2,5 g élesztőkivonat 1 g szójaliszt 10 g dextróz 25 g CaC03 5 g csapvíz 1000 ml. A fermentációt 28°C-on végezzük, 900 ford./perc mellett; a levegőztetési sebesség 1 térf./térf./perc. A maximális antibiotikus aktivitást kb. 40 órás fermentáció után érjük el. Az antibiotikum-szintet a papírkorongos agar-lemezes vizsgálati módszerrel határozzuk meg, vizsgálati organizmusként Neisseria caviae ATCC 14659-et és Streptococcus dysgalactiae ATCC 9926-ot használva. 2. példa. Az antibiotikum nagy mennyiségben való előállítása Felnyitunk egy Streptomyces sp. NRRL 15496 tenyészetet tartalmazó liofilizált kémcsövet és tartalmát steril körülmények között átvisszük egy zabliszt agart tartalmazó ferde kémcsőre. 10 napi, 28°C,-on végzett inkubálás után a ferde tenyészetet desztillált vízben szuszpendáljuk és a szuszpenzióval 2 db. terelőlappal ellátott 2000 ml-es Erlenmeyer lombikot oltunk be, amely 500 ml, a következő összetételű táptalajt tartalmaz: húskivonat 5 g pepton 5 g enzimes kazein-hidrolizátum 3 g élesztőkivonat 5 g NaCl 1,5 g dextróz 20 g desztillált víz 1000 ml Ezt a két lombikot 28°C-on inkubáljuk, 220 ford./perc mellett, kb. 40 órán át. A két lombikban kifejlődött tenyészetet egy 50 literes fermentor beoltására használjuk fel, amely 30 liter, a következő összetételű inokulum-táptalajt tartalmaz: marhahúskivonat 4 g pepton 4 g NaCl 2,5 g élesztőkivonat 1 g szójaliszt 10 g dextróz 25 g CaC03 5 g CaCOj 5 g csapvíz 1000 ml. A fermentációt 28°C-on végezzük, 500 ford./perc mellett; a levegőztetési sebesség 1 térf./térf./perc. 24 órai fermentáció után a 30 liter inokulum-tenyészettel egy 300 literes fermentort oltunk be, amely 200 liter, az előzővel azonos 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
