193628. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kristályos 7-(dimetil-amino-metilén-amino)9a-metoxi-mitozán előállítására
193628 A találmány az (I) képletü 7-(dimetil-amino-metilén-amino)-9a-metoxi-mitozán új, kristályos alakjának előállítására vonatkozik, amely még 100°C-on is stabil. A mitomicin C fermentálással előállított antibiotikum, amely jelenleg kereskedelmi forgalomban van, és az Egyesült Államok egészségügyi hatóságának jóváhagyása alapján más, engedélyezett kemoterápiás szerekkel kombinálva alkalmazásra kerül a gyomor vagy a hasnyálmirigy szétszórt adenokarcinomájának gyógyításánál, valamint tüneti kezelésekhez, ha egyéb kezelések sikertele-neknek bizonyultak [Mutamycin^ Bristol Laboratories, Syracuse, New York 13201, Physicians’ Desk Reference 38 th Edition, 1984, p. 750]. — :.... A mitomicin C-t es fermentálás útján történő előállítását fárgy^lja a 3 660 578 sz. amerikai egyésütLAÜat^^úeli szabadalmi leírás, ameiy 1972 május 2-án kapott szabadalmi oltalmat, és az elsőbbsége korábbi szabadalmi bejelentések, így többek között egy Japánban 1957 április 6-án benyújtott szabadalmi bejelentés elsőbbségének felel meg. A mitomicin A, mitomicin B, miotmicin C és a porfiromicin kémiai szerkezetét először J. S. Webb és munkatársai (Lederle Laboratories Division American Cyanamid Company) írták le [J. Amer. Chem. Soc., 84, 3185-3187 (1962)]. A mitomicin A és a mitomicin C közötti szerkezeti összefüggés tanulmányozásánál alkalmazott egyik kémiai átalakítás során az előbbit, a 7,9a-dimetoxi-mitozánt ammóniával az utóbbivá, 7-amino-9a-metoxi-mitozánná alakították. A mitocin A 7-metoxi-csoportjának más szubsztituensre történő lecserélése fontos reakció lett a mitomicin C daganatellenes hatású származékainak előállításánál. Az alábbi publikációk mindegyike a mitomicin A-nak a 7-es helyzetben helyettesített aminocsoportot tartalmazó, daganatellenes hatású mitomicin C-származékká történő átalakításával foglalkozik: Matsui és munkatársai, The Journal of Antibiotics, XXI, 189-198 (1968); Kinoshita és munkatársai, J. Med. Chem., 14, 103-109 (1971); Iyengar és munkatársai, J. Med. Chem., 24, 975-981 (1981); Iyengar, Sami, Remers and Bradner, Abstracts of Papers-Annual Meeting of the American Chemical Society, Las Vegas, Nevada, March 1982, Abstract No. MED1 72; Sasaki és munkatársai, Internat. J. Pharm., 15, 49 (1983). Az alábbi szabadalmi leírások 7-(szubsztituált amino)-mitozán-származékok előállítását tárgyalják, ahol primer vagy szekunder aminnal reagáltatnak mitomicin A-t, mitomicin B-t vagy ezek Nla-helyettesített származékát: Cosulich és munkatársai, 3 332 944 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (az engedélyezés időpontja 1967. július 25.); 2 1 Matsui és munkatársai, 3 420 846 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (az engedélyezés időpontja 1969. január 7.); Matsui és munkatársai, 3 450 705 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (az engedélyezés időpontja 1969. június 17.) Matsui és munkatársai, 3 514 452 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (az engedélyezés időpontja 1970. május 26.); Nakano és munkatársai, 4 231 936 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (az engedélyezés időpontja 1980.november.4); Remers, 4 268 676 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (az engedélyezés időpontja 1981. május 19.). A 7-es helyzetben helyettesített aminocsoportot tartalmazó mitomicin C származékokat irányított bioszintézissel is előállítottak, azaz oly módon, hogy a fermentléhez primer amint adtak, majd szokásos mitomicin-fermentálást végeztek [C. A. Claridge és munkatársai, Abst. of the Annual Meeting of Amer. Soc. for Microbiology, 1982. Abs. 028]. A 896 963 sz. belga szabadalmi leírás a mitomicin C új monoguanidino-, továbbá mono- és bisz-amidino-analógjait ismerteti. Ezeknél a vegyületeknél a 7-aminocsoport és/vagy az N -karbamoil-csoport nitrogénatomja egy amidinocsoportnak mint szubsztituensnek a részét képezi, vagy pedig a 7-aminocsoport nitrogénatomja egy guanidinocsoport része. Az egyik ilyen vegyület az (1) képletü 7-(dimetil-amino-metil idén-amino) -9a-metoxi-mitozán, amelynek az előállítását a 896 963 sz. belga szabadalmi leírás 8. és 15. példája mutatja be. Ez az amorf szilárd anyagként képződő vegyület igen hatékony az egéren és patkányon megfigyelhető P-388 leukémiával szemben, s kedvezőbb, mint a mitomicin C, akár a maximális hatást, akár az azonos hatás eléréséhez szükséges dózis nagyságát tekintve. A vegyület azonban általában instabil 25-56°C hőmérsékleten. Azt találtuk, hogy az (I). képletü 7-(dimetil-amino-metilidén-amino) -9a-metoxi-mitozán új, kristályos alakja még 100°C-ig terjedő hőmérsékleten is hat napig vagy ennél hosszabb ideig megtartja stabilitását. A kristályos forma infravörös spektrogramja az 1. ábrán látható. A kristályos forma tárolhatósága lényegesen kedvezőbb, mint az amorf 7- (dimetil-amino-metilidén-amino)-9a-metoxi-mitozáné. Az amorf 7- (dimetil-amino-metilidén-amino)-9a-metoxi-mitozánt a 896 963 sz. belga szabadalmi leírás 8. és 15. példájában ismertetett eljárással állítjuk elő, az alábbiak szerint. A 896 963 sz. belga szabadalmi leírás 8. példája szerinti eljárás 1. A következőképpen állítottuk elő 7- (dinetil-amino-metilidén-amino) - N10- (dimetilamino-metilidén)-9a-metoxi-mitozánt: 500 mg (1,50 mM) mitomicin C 25 ml kloroformmal készített szuszpenziójához össze-2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
