193569. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tri- és tetrapeptidek és ilyeneket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193569 22 1,27 g NMM-t, majd a reakciókeveréket 0°C-on 1 órán át és szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ekkor Tlc-vel kimutatható, hogy a reakció teljesen végbement. Ezután további 1,18 g DCCI-t adunk a keverékhez, és a keverést még 24 órán át folytatjuk. A DCU-ot szűréssel elválasztjuk, a DMF-ot vákuumban eltávolítjuk, a maradékot etil - -acetátban felvesszük és 2 órán át hűtőszekrényben tartjuk. A DCU-t ismét leszűrjük és az etil-acetátos oldatot négyszer 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, kétszer 10%-os citromsav oldattal, kétszer vízzel, és egyszer telített sóoldattal mossuk, az oldatot szárítjuk és betöményítjük. Az ily módon nyert 2,69 g nyers terméket további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben. Tlc.-vei kevés DCU mutatható ki. (D) H-Gly- EtPhe(4NOs)-OMe.HCI előállítása A 2,3 g védett dipeptideí 33 ml 1 mólos HCl/ecetsav oldattal kezeljük szobahőmérsékleten 1 órán át, a kapott anyagot vákuumban betöményítjük, a maradékot vízben oldjuk, háromszor éterrel mossuk és fagyasztva szárítjuk, Ily módon 1,42 g cím szerinti terméket nyerünk. (E) BOC-Tyr-D-Arg-Giy-EtPhe(4 N02)-0Me előállítása 1,96 g BOC-Tyr-D-Arg-HCl-ot és 1,11 g HOBT-t 17 ml DMF-ban oldunk, jéggel lehűtjük és hozzáadunk 0,93 g DCCI-t. A keveréket 0°C-on 1 órán át keverjük, majd hozzáadunk 17 ml DMF-ban oldott 1,42 g H-Glyx xEt.Phe(4N02)-OMe.HCl-ot és 0,42 g NMM-t, és a reakciókeveréket szobahőmérsékleten 24 órán át állni hagyjuk. Ezután még további 0,42 g DCCI-t adagolunk, és a keveréket 24 órán át keverjük. A szokásos feldolgozás után 3,6 g terméket nyerünk. (F) H-Tyr-D-Arg-Gly-EtPhe(4N02)-0Me«diacetát előállítása A 3,6 g védett tetrapeptid-metil-észterről a védőcsoportot ismert eljárás szerint eltávolítjuk és karboxi-metil-cellulózzal, kromatograíálással tisztítjuk. Kitermelés 1,55 g. Elemanalízis a C2gH40N8Og.2CH3CO2H. 1,5H20 összegképletre: számított: C% 51,09; H% 6,62; N% 14,44; mért: C% 51,15; H% 6,44; N% 14,70; (G) H-Tyr-D-Arg-Gly-EtPhe(4N02)-NH2.diacetát előállítása 0,5 g tetrapeptid-metil-észtert 25 ml metanolban oldunk, az oldatot jégben lehűtjük és vízmentes ammóniával telítjük. Ezután a lombikot lezárjuk és szobahőmérsékleten 24 órán át állni hagyjuk. Tlc-vel kimutatható, hogy a reakció teljesen végbement. Az ammónia-felesleget elpárologtatjuk, és a kapott nyers terméket karboxi-metil-cellulózzal kromatografáljuk. 21 12 Elemanalízis a C2gH39Ng072CH3C02H. 1H20 összegképletre: számított: C% 51,09; H% 6,62; N% 14,44; mért: C% 51,15; H% 6,44; N% 14,70. 38 példa (4) vázlat szerinti vegyület A) N-Etil-2-fluor-benzil-amín-hidrobromid 14,6 g 2-fluor-benzil-bromidot {Aldrich, 77 mmól) 150 ml 33%-os etanolos etil-aminnal elkeverünk és gőzfürdőn 1,5 órán át visszaíolyatás mellett melegítjük. Ezután az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a maradékot izopropanol és diizopropil-éfer elegyéből átkristályosítjuk, amikor is 10,4 g (58%) terméket nyerünk. Op.: 165—166°C. Elemanalízis a C9H13NBrF összegképletű vegyületre: számított: C% 46,17; H% 5,60; N% 5,98; mért: C% 46,42; H% 5,59; N% 5,99; B) BOC-Gly-N(Et)-CH2-C6H4-2F 9,68 g (55,3 mmól) BOC-Gly-t, 12,94 g ( 120 mmól) N-eti!-fluor-benzil-amin-hidrobromidot, 14,92 g HOBT-t és 7,7 ml trietil-amint 120 ml DMF-ban oldunk, jéggel lehűtjük, hozzáadunk 12,53 g DCCI-t és a kapott keveréket szobahőmérsékleten 48 órán át keverjük. Ezután a DCU-t szűréssel eltávolítjuk, a szüretet betöményítjük és a visszamaradó anyagot etil-acetát és 5%-os nátrium-hidrogénkarbonát között megosztjuk. A szerves fázist háromszor 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, telített nátrium-kloriddal, majd kétszer 5%-os citromsav-oldattal és végül kétszer telített nátrium-kloriddal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, aktív szénen szűrjük és betöményítjük. A gumiszerű termék mennyisége 16,8 g (98%) és Tlc-vel kimutathatóan DCU nyomokat tartalmaz. C) H-Gly-N(C2H5)-CH2-C6H4-2F Az első lépés szerinti nyert terméket (16,8 g, 54,2 mmól) 150 ml jégecetben oldjuk és szobahőmérsékleten 150 ml 2 mólos ecetsavas sósavval kezeljük 30 percig, szobahőmérsékleten. Ezután a keveréket betöményítjük, a maradékot víz és éter között megosztjuk, a vizes fázist az étertől elválasztjuk, fagyasztva szárítjuk, és a kapott gumiszerű anyagot izopropanol-diizopropil-étei elegyéből átkristályosítjuk. A termék mennyisége 10,15 g (76%). Tlc-vel SI, SIII, SV-ben tiszta. Op.: 111 —113°C. Elemanalízis a CnH,6N2OFCl összegképletű vegyületre: számított: C% 53,55; H% 6,50; N% 11,35; mért: C% 53,50; H% 6,54; N% 11,37. 4,26 g (9 mmól) BOC-Tyr-D-Arg.HCI-ot, 2,43 g HOBT-t, 2,22 g (9 mmól) H-Gly-N(C2H5)-CH2-C6H4 2F.HCI-ot és NMM-t 20 ml DMF-ban oldunk, —5°C-ra lehűtjük 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 66
