193512. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hibrid emberi leukocita interferonok előállítására
193512 30 dozóba a polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hidrid kétszálú dezoxiribonukleinsav töredéket viszünk be, ezzel valamely Escherichia nemzetségben, előnyösen E. coli mikroorganizmust transzformálunk, a mikroorganizmust tenyésztjük és kiváltjuk a kódolt pepiid kifejeződését, majd a képződött mikroorganizmust elroncsoljuk és belőle a polipeptidet elkülönítjük. (Elsőbbség: 1980. 11.10.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hibrid kétszálú dezoxiribonukleinsav töredéket alkalmazunk, amely ben az N-terminális rész a LelF-D 1-92 számú aminosavjából és karboxil-terminális rész pedig a LelF-A 92-165 számú aminosavjából áll. (Elsőbbség: 1980. 11. 10.) 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hibrid kétszáló dezoxiribonukleinsav töredéket alkalmazunk, amelyben az N-terminális rész a LelF-A 1-91 számú aminosavjából és a karboxil-terminális rész pedig a LelFD 93 166 számú aminosavjából áll. (Elsőbbség: 1980.11 10.) 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hibrid kétszálú dezoxiribonukleinsav töredéket alkalmazunk, amelyben az N-terminális rész a LelF-D 1-63 számú aminosavjából és a karboxil-terminális rész pedig a LelFA 63 165 számú aminosavjából áll (Elsőbbség. 1980. 11. 10.) 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hibrid kétszálú dezoxiribonukleinsav töredéket alkalmazunk, amelyben az N-terminális rósz a LelF-A 1-62 számú aminosavjából és a karboxil-terminális rész pedig a LelF-D 64-166 számú aminosavjából áll. (Elsőbbség: 1980 11 10) 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hibrid kétszálú dezoxiribonukleinsav töredéket alkalmazunk, amelyben az N-terminális rész a LelF A 1-91 számú aminosavjából és a karboxil-terminális rész pedig a LelF-B 93-166 számú aminosavjából áll. (Elsőbbség: 1981 02. 23.) 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan polipeptidet kódoló szálat tartalmazó hibrid kétszálú dezoxiribonukleinsav töredéket alkalmazunk, amelyben az N-terminális rész a LelF-A 1-91 számú aminosavjából és a karboxil-terminális rész pedig a LelF-F 93-166 számú aminosavjából áll. (Elsőbbségi 981. 02. 23.) 8. Eljárás az 1. igénypont tárgyi köre szerinti, 165-166, ill. 166-167 aminosavból álló, aminosav-szekvenciájában két különálló, egymást sorban követő, az aminosavak fajtája és száma tekintetében különböző természetes előfor dulású leukocita interferonoknak megfelelő alszekvenciát tartalmazó, de aminosav-szekvenciájának teljes összetétele szempontjából a 29 természetben előforduló leukocita interferonok aminosav-szekvenciájától eltérő vírusellenes hatású polipeptidet kódoló kétszálú dezoxiribonukleinsav előállítására, azzal jellemezve, hogy 1) kiválasztunk egy első kétszálas DNS töredéket, amely egy első, a természetben előforduló leukocita interferon aminosav-szekvenciáját vagy annak egy részét kódoló kodonokat tartalmaz és amely töredék az említett ámino-terminális részét kódoló kodonokat, valamint attól 3-irányban egy első restrikciós endonukleáz hasítási helyet foglal magába; 2) az említett töredéket hasítjuk az említett restrikciós endonukleáz enzimmel; 3) kiválasztunk egy második kétszálas DNS töredéket, amely egy második, az említett elsőtől különböző, a természetben előforduló leukocita interferon aminosav-szekvenciáját vagy annak egy részét kódolja és amely egy,az előbbivel azonos és a két interferon aminosav-számozása szempontjából lényegileg azonos helyzetű restrikciós endonukleáz hasítási helyet és ezen a helyen túl a második interferon karboxil-terminális részét kódoló kodonokat foglalja magába; 4) az említett második töredéket hasítjuk az említett restrikciós endonukleáz enzimmel; 5) a 2) és 4) hasítási lépésben kapott restrikciós endonukleázos hasítási termékeket kapcsoljuk az említett restrikciós endonukleáz hasítási helyek helyreállítására és így olyan hibrid töredéket képezünk, amely egymást követően az első interferon amino-terminális részét és a másik interferon karboxil-terminális részét kódoló kodonokat tartalmaz. (Elsőbbség: 1980. 11.10.) 9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a természetben előforduló első leukocita interferonként LelF D-t és a természetben előforduló második leukocita interferonként LelF A-t alkalmazunk. (Elsőbbség: 1980. 11. 10.) 10. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy első kétszálas DNS töredékként a LelF-D 1 -63 számú aminosavát kódoló kodonokat tartalmazó töredéket, második kétszálas DNS töredékként a LelF A 92-165 számú aminosavát kódoló kodonokat tartalmazó töredéket választunk. (Elsőbbség: 1980. 11. 10.) 11. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy első kétszálas DNS töredékként a LelF D 1-63 számú aminosavát kódoló kodonokat tartalmazó töredéket, második kétszálas DNS töredékként a LelF A 63-165 számú aminosavát kódoló kodonokat tartalmazó töredéket választunk. (Elsőbbség: 1980. 11.10 ) 12. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal /ellemezve, hogy a természetben előforduló első leukocita interferonként LelF A-t és a természetben előforduló második leukocita interferonként LelF D-t alkalmazunk. (Elsőbbség: 1980. 11. 10.) 13. A 8. igénypont szerinti eljárás .azzal jellemezve, hogy első kétszálas DNS töredékként 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
