193434. lajstromszámú szabadalom • Eljárás elnyújtott hatású antibiotikum készítmény előállítására
193434 10 9 I. Táblázat Vizsgált mikroorganizmus MIC ( jjg/ml) CCL CEX Escherichia coli NIH JC-2 3,13 6,25 Escherichia coli No. 29 1,56 3,13 Megjegyzés: a minimális gátló koncentrációkat (MIC) a Chemotherapy 29/1/, 76-79 (198l)-ban közölt hígításos módszer alapján határoztuk meg. 2. Táptalaj: Szív-infúziós-bouilion táptalaj (Nissui Pharmaceutical Co.) 3. Vizsgálati eljárás: A vizsgált mikroorganizmusokat a logaritmikus szaporodási fázisban (körülbelül 106 CFU/ml) a fent említett, kémcsövekbe 5 helyezett bouillon táptalajra oltottuk le, melyekhez meghatározott koncentrációsorozatban CCL-t vagy CEX-et adtunk. Az egyes kémcsövekben a leoltott telepnagyság 99%-os sterilizálásához szükséges idő mérése céljá- 10 ból megfigyeltük az életképes mikroorganizmusok számának — azaz csiraszámának — a változását. 4. Eredmények: A leoltott telepnagyság 99%-os csökkentéséhez a CEX-et egy vagy több MIC-ban kellett alkalmazni, a CCL azonban már alacsonyabb koncentrációban, 1/2 MIC esetében is hatékonynak bizonyult. Azt is megállapíthatjuk, hogy a 99%-os sterilizáláshoz szüksé- 20 ges idő 1/2 és körülbelül 64 között bármely MIC értéknél sokkal rövidebb volt a CCL esetében, mint a CEX-nél. II, Táblázat A 99%-os sterilizáláshoz szükséges idő a. Escherichia coli NIH JC-2 A MIC 2 MIC 1 MIC 1/2 MIC 1/4 MIC CCL 0h 35’ 0h 35’ 1h 00’ 1h 30’CEX 0h 55’ 1h 00’ 2h 00’-b. Escherichia coli No. 29. 4 MIC 2 MIC 1 MIC 1/2 MIC 1/4 MIC CCL 1h 00’ 1h 05’ 2h 00’ 2h 10’CEX 2h 10’ 2h 20’-3. kísérlet Egyetlen dózis vérszintjének szimulálásakor nyert szaporodási görbék (3. ábra) 1. Vizsgált mikroorganizmus: Staphylococcus aureus No. 1037 2. A vizsgált mikroorganizmus érzékenysége (MIC érték) 1,56 |Ag/ml: Ezt az értéket a fent ismertetett eljárással határoztuk meg, melyben táptalajként Müller-Hinton agart (Difco) alkalmaztunk. -----------1. módszer 3,13 pg/ml: Ezt az értéket egy másik táptalaj a 3. számú antibiotikum táptalaj (Difco; a továbbiakban ABM 3) alkalmazásakor nyertük. E bouillon táptalajon az MIC értékeket 18—20 órával a leoltás után mértük (105 CFU/ml)-----------------2. módszer. 3. Vizsgálati eljárás: A CCL vérszintek idő-függő változásait az ABM 3 bouillon táptalajon az 5. kísérletben nyert CCL vérszintgörbék alapján végzett komputeres szimuláció révén utánoztuk. 6 45 A leoltás (103 * 5 CFU/ml) után a csíraszámot időről időre ellenőriztük a CCL-t a komputer által szimulált koncentrációkban tartalmazó bouillon táptalajon. Ilyen kísérleteket végeztünk il-féle, 0:10— 50 —10:0 gyors: lassú kombinációs arányú készítménnyel létrehozott vérszinteken, '375 mgos CCL dózisnál, a CCL hatékonyságának megfelelően. Az eredményeket a 3. ábra szemlélteti. 55 4. Eredmények: A 11-féle készítménnyel nyert szaporodási görbéken a csíraszám csökkenésének mértéke — a görbék meredeksége az A tartományban —, valamint az újbóli szaporodásuk utáni 5Q növekedési ütem — a görbék meredeksége a B tartományban — igen hasonló volt; lényeges különbségek voltak azonban a 11 készítmény között minden egyes időpontban, azaz a csíraszám csökkenés kezdetének idejében, valamint a csíraszám növekedés kezdetének 65 idejében és a csíraszámban. Elsősorban a
