193291. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív heptapeptidek és sóik, valamint az ezeket tartalmazó gyógyszerkkészítmények előállítására
7 193291 8 izopropanol—diizopropil-éfer elegyből átkristályosítva 195° C (bomlás közben); [a]p° = -12,9 ° (c=l, metanol); RfD = 0,49; Ei,2 = 0,84. 5. lépés: BOC-Leu-Gly-Trp-Met-OMe (V) előáll ítása 12,16 g (48,76 mmól) BOC-Leu-OH 120 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához -12 °C-on 5,5 ml (48,76 mmól) N -metil-morfolint, majd 4,8 ml (48,76 mmól) etil-klór-formiátot adunk. Az elegyet a fenti hőmérsékleten 2 percen át keverjük, majd hozzáadjuk 21,6 g (48,76 mmól) HCl.H-Gly-Trp-Met-OMe (IV) és 5,5 ml N-metil-morfolin 100 ml dimetil-formamiddal készült hideg oldatát. A reakcióelegyet -12 °C-onJl órán át, majd 0-15 °C-on 2 órán át keverjük, ezután a sókat leszűrjük és vákuumban bepároljuk. A nyersterméket 0,040-0,063 mm szemcseméretű szilikagéllel (Merck) töltött oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást etil-acetáttal végezzük. Etil-acetát—dietil-éter—petroléter elegyből végzett átkristályosítás után 18,13 g cím szerinti (V) vegyületet kapunk 60% hozammal, olvadáspontja 110°C. 1“]»° = -31,6° (c= 1, metanol); RU = 0,14; Rf* = 0,54. 6. lépés: H-Leu-Gly-Trp-Met-OMe.HCl (VI) előállítása 18 g (29,04 mmól) BOC-Leu-Gly-Trp-Met-OMe-t (V) 290 ml jégecetes telített hidrogén-klorid-oldatban oldunk, amelyhez 18 ml anizolt és 9 ml 2-merkapto-etanolt adtunk. A BOC-védőcsoport lehasadása szobahőmérsékleten 30 perc alatt teljes mértékben végbemegy, ezután az oldószert 30 °C-on vákuumban eltávolítjuk. A nyersterméket 0,040 - - 0,063 mm szemcseméretű szilikagél lel (Merck) töltött oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást kloroform és metanol 8:2 térfogatarányú elegyével végezzük. 12,44 g cím szerinti (VI) terméket kapunk 77 % hozammal izopropanol—diizopropil-éter elegyből végzett átkristályosítással, olvadáspontja 170 °C. [a]£° = -9,9° (c— 1, metanol); Rfp = 0,62; E, , = 0,71. 7. lépés: BOC-Pro-Pro-OBzl (VII) előállítása 21,52 g (100 mmól) BOC-Pro-OH 200 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához -10 °C-on 11',2 ml N-metil-morfolint és 13,3 ml izobutil-klór-íormiátot adunk egymás után. Az elegyet a fenti hőmérsékleten 3 percen át keverjük, majd hozzáadjuk 24,17 g (100 mmól) HC1.H-Pro-OBzl [Ramachandran J. és Li C.H.: J. Org Chem. 28, 173 (1963)] és 11,2 ml (100 mmól) N-metil-morfolin 150 ml dimetil-formamiddal készült hideg oldatát. A reakcióelegyet -10 °C-on 1 órán át, majd 0-15 °C-on 2 órán át keverjük, a sókat szűréssel eltávolítjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, máj I egymás után nátrium-kloriddal telített 1 nól/1 koncentrációjú citromsavoldattal, 1 mól/l-es nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel többször átmossuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjik, majd az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. 34,21 g cím szerinti (VII) vegymetet kapunk, 85 % hozammal, olaj formáj íban. Rí* = 0,62. 8. lépés: HCI.H-Pro-Pro-OBzl.HCI (Vili) előállítása 1:4,21 g (85 mmól) BOC-Pro Pro-OBzl-t (VII ) 342 ml telített ecetsavas hidrogén-klorid-oldatban oldunk szobahőmérsékleten. A BOC-védőcsoport lehasadása szobahőmérsékleten- 30 perc alatt teljes mértékben végbemegy, ezután az oldószert vákuumban eltávolhjuk. Izopropanol—etil-acetát elegyből végzett átkristályosítás után 21,60 g cím szerinti (VIII) vegyületet kapunk 75 % hozammal Rf„ = 0,32; E, 2 = 1,12. 9. 7 l épés: BOC-Val-Pro-Pro-OBzl (IX) előg 11 J^ 13,79 g (63,45 mmól) BOC-Val-OH-ból és 21,5 g (63,45 mmól) HCl.H-Pro-Pro-OBzl-ből (VIII) kiindulva a 7. lépésben leírtak szer nt eljárva, a nyersterméket 0,040— —0,063 mm szemcseméretű szilikagél lel töltött oszlopon kromatográfiás eljárással tisztítva és etil-acetát és metanol 98:2 térfogataráryú elegyével eluálva 22,28 g cím szerinti (IX) terméket kapunk 70 % hozammal, olaj formájában. 10. lépés: BOC-Val-Pro-Pro-OH (X) előállítása 22,28 g (44,42 mmól) BOC-Val-Pro-Pro - -OB;:l-t (IX) 150 ml metanolban oldva szobahőmérsékleten atmoszférikus nyomáson 4,46 g 10 % fémtartalmú szénhordozós palládium-katalizátor jelenlétében hidrogénezünk. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk és az oldatot vákuumban koncentráljuk. A maradékot etil-í cetátban oldjuk, majd vákuumban koncentráljuk. Diet'il-éteres hígítás után 10,98 g cím szerinti (X) vegyületet kapunk 60 % hozammal, olvadáspontja 184-190 °C. [a]íp = -149,9 ° (c=l, metanol); Rfe = 0,53; Eö,g:= 0,51. 11. lépés: BOC-Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp-lWet--OMe (XI) előállítása 9,10 g (22,12 mmól) BOC-Val-Pro-Pro-OH ból (X) és 12,30 g (22,12 mmól) HC1.H-Leu-Gly-Trp-Met-OMe-ből (VI) kiindulva az 5. lépés szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a kromatográfiás tisztítási lépésben az eluá'ást 5-30 % növekvő koncentrációban metánod tartalmazó etil-acetáttal végezzük. Izopropanol—diizopropil-éter elegyből átkristályosítva 16,16 g cím szerinti (XI) vegyülhet kapunk, a hozam 80 %, olvadáspont, a 184-190 °C. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
