193250. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált 5,11-dihidro-6h-dibenzi(b,e)azepin-6-onok előállítására
193250 A kötési kísérlethez a szervhomogenizátumokat a következőképpen hígítottuk: a gyomorfenék simaizomját 1 : 100, az agykérget 1 :3000 arányban. A szervhomogenizátumok inkubálását a radioligandum meghatározott koncentrációjával és a nem radioaktív kísérleti anyagok koncentrációsorozatával Eppendorf-féle centrifugacsövekben 30°C- on végeztük. Az inkubálás 45 percig tartott. Radioligandumként 0,3 mmólos 3H-N-metil-szkopolamint (3H-NMS) használtunk. Az inkubálás befejezése után az anyagot 14000 g-nél centrifugáltuk és a kicentrifugált részben a radioaktivitást meghatároztuk. Ez az érték a 3H-NMS specifikus és nem-specifikus kötésének mennyiségét képviseli. A nem-specifikus kötési részt azzal a radioaktivitással definiáljuk, ami 1 jMmólos kinuklidinil-benzilát jelenlétében megkötődött. Mindig négy meghatározást 7 végeztünk. A nem-jelzett kísérleti anyagok IC50-értékeit grafikusan határozzuk meg. Ezek a kísérleti anyagok azon koncentrációit jelentik, amelyek a 3H-NMS specifikus kö- 5 tését a muszkarin-receptorokon a különböző szervekben 50%-kai gátolják. A fenti körülmények között a következő vegyületeket vizsgáljuk: 8 10 A 5,11 -dinidro-11- [ [ ( 1 -metil-4-piperidinil)-amino]-karbonil]-6H-dibenz [b, e] azepin-6-on, B 5,11 -dihidro-11 - [ ( 1 -metil-4-piperidinil)-acetil] -6-H-dibenz [b, e] azepin-15-6-on, C 5,1-1 - dihidro-11 - [4-metiI-l-piperazinií)-acetil]-6H-dibenz [b, e] azepin-6-on. Az eredményeket az alábbi táblázat szem- 20 lélteti: TÁBLÁZAT Anyag Receptor-kötési kísérlet Oxotremorin-kísérlet IC50 (nmól-1 ■1) (fg/kg) i.v. Agykéreg Simaizom a Fekélygátló Nyálkiválaszgyomorfenékből hatás, ED70 tást gátló hatás ED50 Mydriasis ED50 ( jug/kg) i.v. A 40 700 . 22. 190 75 B 25 150 13 186 179 C 30 400 80 335 161 A táblázat adatai bizonyítják, hogy az említett vegyületek általában nagy affinitással bírnak a muszkarin-receptorokhoz. Ezenkívül az adatok szemléltetik hogy az új (I) általános képletű ,vegyületek a különböző 5 szövetek muszkarin-receptorai között különbséget tesznek. Ez következik azokból a lényegesen alacsonyabb ICso-értékekből, amelyeket az agykéreg preparátumainak vizsgá- 50 latánál kaptunk, ellentétben a gyomor simaizomzatának vizsgálatánál kapott IC50-értékekkel. A táblázat farmakológiai adataiból — a receptor-kötési tanulmányokkal teljes ossz- 55 hangban — kitűnik, hogy az oxotremorinnal előidézett gyomornyálkahártya-sérülések képződését az említett vegyületek már olyan dózisokban is gátolják, amelyeknél a nyálkiválasztás korlátozása és pupillatágulat még ^ nem figyelhető meg. Az (I) általános képletű vegyületek messzemenően nem-toxikusak, még 1000 mg/kg egér feletti adagolásnál sem. A találmány szerinti eljárás kiviteli módját közelebbről a példák szemléltetik. 65 1. példa 5,11-Dihidro-1 1 -[( 1 -metil - 4-piperidinil) - acetiI]-6H-dibenz [b, ej azepin-6-on 5 g (0,024 mól) 5,11-dihidro-6H-dibenz [b, e] azepin-6-ont 70 ml abszolút tetrahidrofuránban feloldunk, és az oldathoz szobahőmérsékleten keverés közben 25,6 g (0,06 mól) n-butil-lítiumot (15%-os, hexánban) csepegtetünk. A reakcióelegyet 30 percig 40°C-on keverjük, majd 5°C-on 11,1 g (0,06 mól) 1- -metil-4-piperidin-ecetsav-etilésztert csepegtetünk az oldatba. Az elegyet 30 percig keverjük, majd az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A maradékot kevés vízben feloldjuk, hígított sósavval megsavanyítjuk és éterrel extraháljuk. Az éteres extraktumot eldobjuk. A vizes fázist kálium-karbonát hozzáadásával meglúgosítjuk és kloroformmal alaposan extraháljuk. Az egyesített kloroformos extraktumokat vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban szárazra pároljuk. A nyersterméket kovasavgélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként kloroform-etilacetát-metanol keveréket használva. Az eluátumból 950mg (11%) cím szerinti vegyü-5
