192989. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fiziológiailag aktív hormon készítmények előállítására
4 192989 5 portjai, amelyek egy sor determináns speclficitással rendelkeznek) kevésbé alkalmasak a találmány szerinti készítmények vagy eljárás céljaira, mint a monoklón antitestek. E találmányi leírás segítségével a területen Jártas szakember könnyedén ki tudja választani rutinjellegű kísérletek segítségével az alkalmas monoklón antitesteket. Bizonyos esetekben az alkalmas monoklón antitestek keverékét alkalmazzuk. Mindazonáltal ismert immunlzációs folyamatok során termelt emberi vagy állati antiszérumok is felhasználhatók, ha rendelkeznek az antitestek leírt epitóp specifitásával. Különösen előnyös monoklón antitestek a növekedési hormon (GH) és a chorionic somatomammotropin (CS) elleni EB01 és EB02 monoklón antitestek. A QB01 antitest prolactin esetében előnyös. Azt találtuk, hogy a leírt hatás eléréséhez, ha az antitesteket csak magukban adagoljuk, szükséges a hormonok jelenléte az állatokban. így például .normál" egyedek esetében a kiválasztott antitest egyedüli adagolása is a megkívánt hatást eredményezi, de például olyan egyedek esetében, amelyeknél nincs endogén GH - így például hypophlsls törpe gyermekek esetében - szükséges a GH-t külön, de nem szükséges az antitesttel egyidőben, adagolni. A megfelelő tulajdonságú antitesteket nemcsak az egyedeken kívül, hanem úgy is előállíthatjuk, hogy beinjekciózzuk az egyedbe a megfelelő növekedési hormon molekula egy kiválasztott fragmensét alkalmas hordozóanyaggal elkeverve. A fragmenst úgy választjuk meg, hogy csak azt az epitópot vagy epitópokat foglalja magában, amelyre a hormon hatását fokozó antitest specifikus, és a hormon molekula alkalmas hasításával vagy a peptld-fragmens (vagy a megfelelő analóg) szintetizálásval állítjuk elő. Ha a hormonnak olyan részét választjuk, amely sok hidrofil gyököt tartalmaz, ezek egyike valószínűleg kialakít vagy kiválaszt egy fragmenst (egy .antigén determinánst"), amely a teljes hormonmolekula felületén van és amely így keresztreakcióba lép a teljes hormonmolekulával. Ugyanígy, ha a fragmens nem tartalmazna olyan hormonhelyeket, amelyek a sejt felületen levő receptorokhoz kötődnek, sem bármilyen olyan helyet, amely egy harmadik anyagot megkötve alaki változással ilyet létrehoz, a receptorkötés gátolttá válik. Másszóval, a képződött antitestek inkább gátolják, mint növelik a hormonok hatását. A fenti típusú sikeres immunizációkor az állatokban szűk specifitású poliklón antitestkollekció képződik, és lehetővé válik a kevésbé gyakori injekciózás, amely egyébként az antitesteket kívülről való passzív adagolásakor szükséges. Belátható, hogy tényleges fragmens helyett funkcionális fragmens Is alkalmazható, amelyben a nem kívánatos epltopok bár jelen vannak, de az antitestekhez való hozzáférhetőségük valamilyen módon gátolt. A leírásban tényleges és funkcionális fragmenseket egyaránt értünk a .fragmens" megnevezés alatt. A fentieknek megfelelően a találmány értelmében gerinceseknél növelhetjük a hormonszabályozott választ olyan készítmények adagolásával is, amelyek a megfelelő hormonnak legalább egy, előzőek szerint definiált, kiválasztott .fragmensét" tartalmazzák alkalmas hordozóanyaggal elkeverve. A találmány szerinti készítmények előállításánál a vakcinákban az antigén immunogenitását fokozó immunológiai hordozóanyagokat alkalmazunk így például keyhole limpet organizmusból származó haemocyanint Sigma Chemical Co. vagy tetanus toxoidot. Továbbá, az immunrendszer stimulálására szolgáló adjuvánsokat Is alkalmazunk, így például alumínium-hidroxidot, saponint vagy muramil-dipeptidet. Az egységdózis általában 0,001- -10 pmól, előnyösen 0,01-0,05 jumól antigént tartalmaz, de a szakember megítélésétől függően ettől a mennyiségtől el is lehet térni. Az antitestek passzív adagolása esetében azokat lOMO7, előnyösen 105-10* ABTso egységnyi mennyiségben adagoljuk alkalmas steril hordozóanyag 0,01-10 ml-es, előnyösen 0,5 ml-es mennyiségében elkeverve. Csak a három következő hormont (GH, CS és PRL) figyelembevéve a találmány szerinti készítmények és eljárások a következő területeken hasznosíthatók: a) a teljes kifejlett nagyság elérésének gyorsítása iparilag fontos tenyészállatok, így például szarvasmarhák, sertések, baromfík esetében, vagy e nagyság elérése kevesebb táplálékkal, b) ezen állatok esetében a növekedés fokozása a normális maximum fölé, c) tejelválasztás időtartamának és mértékének növelése emlősök esetében, így például szarvasmarhák esetében nagyobb tej hozam biztosítása, vagy humán alkalmazási területen a gyermekek szoptatásának biztosítása, d) hús/zsír aránya növelése tenéyszállatok esetében, e) gyapjú, szőrme, vagy más hasonló állati termék hozamának növelése, például birkák esetében, f) GH-károsult egyedek, például törpe gyermekek normális növekedésének biztosítása. A fenti esetek mindegyikében a találmány szerinti eljárások alkalmazásával jelentős költség és munkamegtakarítás érhető el ahhoz képest, mintha csak tisztán hormonkezelést alkalmazunk,- továbbá a kívánt hatást kevesebb mennyiség felhasználásával érhetjük el. Ez utóbbi azt Is jelenti, hogy az állatok tejében és húsában csökken az esetlegesen káros anyagok mennyisége. Végül, igen előnyös, hogy a találmány szerinti készítményeket az állatoknak egyébként rutinszerűen adagolt más készítményekkel, így 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
