192971. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-51568 A-faktor és B-faktor antibiotikumok előállítására
21 192971 22 Az A-51568 A-, ill. B-faktor in vivo antimikrobiális aktivitást mutat a kísérletileg előidézett bakteriális fertőzésekkel szemben. A vizsgálandó vegyületet két dózisban szubkután bejuttatva a fertőzött egerekbe, az aktivitást ED50 értékekben mértük [EDso= =mg/kg-ban kifejezett hatékony dózis, amely a vizsgálati állatok 50%-át megvédte. Warren Wick és munkatársai, J. Bacteriol. 81, 233-235 (1961)]. Az A-51568 A- ill. B-faktorra kapott ED50 értékek (mg/kgx2 egységben): A B Staph. aureus 3055 1.79 2.5 Strep. pyogenes C203 3.03 7.94 Strep. pneumoriae Park I 2.71 2.5 A találmány szerint előállított vegyületek alkalmasak ember vagy állatok fertözéses megbetegedésének kezelésére, az A-51568 A-faktor, A-51568 B-faktor vagy ezek gyógyászati szempontból alkalmas sójának antibiotikus hatású dózisát - 25-2000 mg - bejuttatva a szervezetbe. Fertőzött emberek kezelésénél az antibiotikumot parenterálisan, tehát i.m. injekcióval vagy i.v. infúzióval juttatjuk be. Az injekcióhoz az antibiotikumot kellő koncentrációban hígítjuk valamilyen gyógyászati szempontból alkalmazható közegben, például .Water-for-Injection "-ban, 0,99S-os konyhasó oldatban, 596-os dextróz oldatban, Ringer-oldatban, vagy más általánosan használt oldószerben. I.v. infúzióhoz az antibiotikumot vagy sóját fiziológiás oldatban vagy híg tápoídatban oldjuk megfelelő koncentrációban, például 5-10%-ban és így infuzáljuk lassan. Alternatív eljárásként az antibiotikumot valamilyen vivőanyaghoz kötve is bejuttathatjuk. Az antibiotikum vagy gyógyászati szempontból alkalmazható sója dózis egységet tartalmazó készítményként leolvasztott ampullákban, steril, légmentesen lezárt gumidugós üvegekben vagy műanyag tasakokban forgalmazható. Az ilyen egységnyi dózisú készítmények antioxidánsokat, stabilizáló anyagokat, diszpergáló anyagokat, puffereket stb. tartalmazhatnak. Egységnyi dózisú kiszerelés lehet például a 100 mg A-51568 A- vagy B-faktort vagy ezek nem toxikus sóját tartalmazó gimidugós (butil-gumi) üveg vagy 250 mg hatóanyagot tartalmazó steril, leolvasztott ampulla, I.v. infúzióhoz az egységnyi dózisú kiszerelés 5 g A-51568 A- vagy B-faktort vagy gyógyászati szempontból alkalmas sóját tartalmazza műanyag tasakban. Amennyiben az A-51568 A- és B-faktort antibakteriális szerként használjuk, beadható szájon át vagy parenterálisan. Amint az megszokott, az A-51568 A- és B-faktort általában egy gyógyászati szempontból alkalmazható vivő- vagy hígítóanyaggal adjuk be. Az antibiotikum dózist különböző tényezők határozzák meg, mint például az adott fertőzés természete és súlyossága. Az alkalmazandó dózisegységet és nagyságot a minimális gátlási koncentráció, az ED50 érték, valamint a kezelendő szervezettől és a fertőző mikroorganizmustól eredő tényezők figyelembevételével állapítjuk meg. Az A-51568 A-, illetve B-faktor gátolja többek között a Staphylococcusok, Streptococcusok és Propionibacterium acnes növekedését és ezért ezek az antibiotikumok alkalmasak pédául a szőrtüszőgyulladás kezelésére. A tisztított A-51568 A-, illetve B-faktor gyógyászati szempontból alkalmazható oldószerben, például izopropil-alkoholban forgalmazható a bőr kezelésére. Ezek az antibiotikum oldatok 1-15*-osak lehetnek. A bőr kezelésére szolgáló antibiotikum készítmény lehet ezen kívül krém vagy borogató víz formájában is. Az A-51568 A-, illetve B-faktor a pszeudomembrános vastagbélgyulladást okozó Clostridium difficile növekedését is gátolja. A pszeudomembrános bélhurut kezelésére alkalmazhatjuk tehát a szájon át beadott A-51568 A-, illetve B-faktort vagy gyógyászati szempontból alkalmazható, nem toxikus sóját. Az antibiotikum beadható ilyen célból zselatin kapszulában vagy folyékony szuszpenzióként. Az A-51568 A- és B-faktort az eddig még le nem irt Nocardia orientalis NRRL 15232 mikroorganizmus vagy annak A-51568 antibiotikumot termelő mutánsának vagy variánsának tenyésztésével állítjuk elő, asszimilálható szén- és nitrogénforrásokat, valamint szervetlen sókat tartalmazó táptalajon, süllyesztett, aerob fermentációs körülmények között addig végezve a fermentációt, amíg jelentős szintű antibiotikus aktivitás nem jelentkezik. Az antibiotikus aktivitás legnagyobb része a fermentlében található, míg kisebb mennyisége a micéliumhoz kötődik. Az antibiotikumot legkönnyebben a micéliumnak szűréssel történő eltávolítása után, a szűrt fermentlóből nyerjük ki, előnyösen oszlopkromatográfia alkalmazásával. Alkalmas adszorbensek: a szén, az anion- és kation-cserélő gyanták, a poliamid, a karboxi-emetil-cellulózok, a nagy-porozitású sztirol és divinil-benzol kopolimerek, például a Diaion HP-20, az Amberlite XAD gyanták, a keresztkötésű dextránnal készült hidrofil, oldhatatlan molekulasziták, mint amilyen a Duolite gyanták és a TSK gélek. A Diaion gyantákat a Mitsubishi Chemical Industries, Limited, (Tokió, Japán) készíti, az Amberlite XAD gyantákat Rohm and Haas (Philadelphia, Pennsylvania). A Doulite gyanták a Diamond Shamrock (Redwood City, California) készítményei. A Sephadex gyantákat a Pharmacia Fine Chemicals AB (Uppsala, Svédország) készíti. A TSK gélek az E. Merck, (Damstadt, NSZK) és a Bio-Rad (2200 Wright Ave., Richmond, California, 94804) cégektől szerezhetők be. Az A-51568 A- és B-faktor termeléséhez számos különféle táptalaj használható. A gaz-5 :.o 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
